牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）為黃病毒科，瘟病毒屬成員，是一種在世界范圍內(nèi)對造成家畜健康嚴(yán)重危害的病原。該病能引起患畜高熱、鼻內(nèi)粘膜及口腔出血或產(chǎn)生大量粘液、母牛奶量減少甚至停止產(chǎn)奶、懷孕母牛流產(chǎn)或產(chǎn)死胎、畸形胎等癥狀。牛病毒性腹瀉病毒與豬瘟病毒和羊邊界病毒在血清學(xué)上有交叉反應(yīng)。目前為止，還沒有有效的預(yù)防和控制BVDV的措施。建立高效快速的檢測方法，對于該病的早發(fā)現(xiàn)、早防制具有重要作用。本研究以純化的BVDV為包被抗原，建立了檢測BVD血清抗體的間接ELISA檢測方法。經(jīng)優(yōu)化選擇，確定了ELISA最佳工作條件：包被液為磷酸鹽緩沖溶液，4℃包被過夜；包被抗原稀釋度為1:200，4℃孵育過夜；封閉液為5%脫脂奶粉，37℃封閉2h；被檢血清稀釋度為1:100，37℃孵育1h；HRP標(biāo)記兔抗牛IgG稀釋度為1:10000，37℃孵育30min，陰陽性界限值為0.320。試驗(yàn)結(jié)果表明，建立的牛病毒性腹瀉病血清抗體ELISA檢測方法具有特異性高、靈敏性好、變異性小的優(yōu)點(diǎn)，與國外試劑盒相比符合率為91.3%�？傊�，本研究建立的牛病毒性腹瀉病抗體ELISA檢測方法，為新疆地區(qū)牛病毒性腹瀉的監(jiān)控奠定了基礎(chǔ)... 

【文章來源】：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：37 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 緒論
    1.1 BVDV 的生物學(xué)特性
        1.1.1 BVDV 的病原學(xué)特征
        1.1.2 BVDV 的分型
    1.2 BVDV 的基因組和編碼蛋白
        1.2.1 BVDV 的基因組結(jié)構(gòu)
        1.2.2 BVDV 編碼的結(jié)構(gòu)蛋白
    1.3 BVDV 國內(nèi)外流行現(xiàn)狀
        1.3.1 國外流行現(xiàn)狀
        1.3.2 國內(nèi)流行現(xiàn)狀
    1.4 臨床癥狀
    1.5 檢測方法
    1.6 本研究的目的和意義
第二章 牛病毒性腹瀉全病毒包被的 ELISA 檢測方法的建立
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 病毒株與細(xì)胞
        2.1.2 血清及抗體
        2.1.3 主要試劑、耗材
        2.1.4 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 病毒的增殖和純化
        2.2.2 ELISA 條件的優(yōu)化
        2.2.3 交叉反應(yīng)試驗(yàn)
        2.2.4 敏感性試驗(yàn)
        2.2.5 重復(fù)性試驗(yàn)
        2.2.6 與同類商品化試劑盒的對比
        2.2.7 臨床樣品的檢測
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 病毒的濃度測定結(jié)果
        2.3.2 間接 ELISA 檢測方法最佳工作條件的確定結(jié)果
        2.3.3 交叉反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果
        2.3.4 靈敏性試驗(yàn)結(jié)果
        2.3.5 重復(fù)性試驗(yàn)
        2.3.6 與商品化試劑盒的比較試驗(yàn)結(jié)果
        2.3.7 臨床樣品的檢測
    2.4 討論
第三章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介及在學(xué)成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]黑龍江省部分奶牛場牛病毒性腹瀉病毒感染的血清學(xué)調(diào)查[J]. 魏偉,李巖,劉長軍,萬培明,王君偉.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2009(06)
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博士論文
[1]牛傳染性鼻氣管炎病毒和牛病毒性腹瀉病毒分子生物學(xué)檢測技術(shù)研究[D]. 季新成.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010

碩士論文
[1]基因2型牛病毒性腹瀉病毒的分離、鑒定[D]. 任敏.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號：3233847