硬脂酸（SA）是研究飽和長鏈脂肪酸的理想模型。本研究的目的是確定外源添加的SA能否改變泌乳奶牛乳腺上皮細(xì)胞（DBMEC）中與乳成分合成相關(guān)的轉(zhuǎn)錄組,并構(gòu)建應(yīng)答SA的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。首先,使用RT-PCR技術(shù)檢測與乳成分合成相關(guān)基因的表達(dá),SA能夠顯著上調(diào)參與脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)（CD36）、細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸（FABP3, FABP4）、細(xì)胞內(nèi)長鏈脂肪酸激活（ACSL1）、去飽和（SCD）、甘油三酯合成（AGPAT6, GPAM, DGAT1, DGAT2, Lpinl）及脂生成轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)（PPARG）的基因的表達(dá),編碼乳蛋白（CSN1S1, CSN1S2, CSN2, CSN3, MGLB, LALBA）、調(diào)控乳蛋白轉(zhuǎn)錄（JAK2）及與乳糖合成相關(guān)的基因（beta-1,4-GT1）表達(dá)也發(fā)生上調(diào),而參與脂肪酸從頭合成（FASN, ACACA）、其他脂代謝轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子（SREBF1）以及乳蛋白合成翻譯過程的基因（EIF4E-BP1, mTOR, S6K）的表達(dá)發(fā)生下調(diào)。SA增加了細(xì)胞及培養(yǎng)基中TG和乳糖含量,并使≥16C與<16C脂肪酸的比例、非飽和與飽和脂肪酸的比例顯著上升,酪蛋白的含量顯著減少。結(jié)... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
圖表清單
第一章 ：緒論
    1. 乳脂的組成及來源
        1.1 乳脂的組成
        1.2 乳脂脂肪酸的組成及來源
    2. 脂肪酸對乳脂合成的調(diào)節(jié)
    3. MICRORNA與脂類代謝
        3.1 MicroRNAs對脂類代謝的影響
        3.2 脂肪酸對microRNA的調(diào)控
    4. 研究內(nèi)容
第二章 ：泌乳相關(guān)轉(zhuǎn)錄組對硬脂酸的應(yīng)答
    1. 前言
    2. 材料和方法
        2.1 樣本制備
        2.2 乳主要成分分析
        2.3 乳成分合成相關(guān)基因表達(dá)與分析
        2.4 基因網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
        2.5 數(shù)據(jù)處理與分析
    3. 結(jié)果
        3.1 硬脂酸對甘油三酯合成的影響
        3.2 硬脂酸對乳蛋白合成的影響
        3.3 硬脂酸對乳糖合成的影響
        3.4 應(yīng)答硬脂酸的乳合成相關(guān)基因網(wǎng)絡(luò)
        3.5 蛋白質(zhì)水平驗(yàn)證
    4. 討論
        4.1 硬脂酸對甘油三酯合成的影響
        4.2 硬脂酸對葡萄糖利用及乳糖合成的影響
        4.3 硬脂酸對乳蛋白合成的影響
        4.4 基因網(wǎng)絡(luò)與乳成分合成
    5. 小結(jié)
第三章 ：泌乳奶牛乳腺上皮細(xì)胞MICRORNAS的分析與鑒定
    1. 前言
    2. 材料和方法
        2.1 樣本制備
        2.2 文庫構(gòu)建及測序
        2.3 PCR驗(yàn)證
    3. 結(jié)果與討論
    4. 小結(jié)
第四章 ：硬脂酸改變泌乳奶牛乳腺上皮細(xì)胞MICRORNA表達(dá)譜
    1. 前言
    2. 材料和方法
        2.1 樣本制備
        2.2 定制芯片檢測
        2.3 PCR驗(yàn)證
        2.4 靶基因預(yù)測及GO、KEGG注釋
        2.5 數(shù)據(jù)處理與分析
    3. 結(jié)果與討論
    4. 小結(jié)
第五章 ：結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]PTEN in liver diseases and cancer[J]. Marion Peyrou,Lucie Bourgoin,Michelangelo Foti.  World Journal of Gastroenterology. 2010(37)
[2]MicroRNA signatures in liver diseases[J]. Xian-Ming Chen, Department of Medical Microbiology and Immunology, Creighton University Medical Center, CrissⅡ Room 529, 2500 California Plaza, Omaha, NE 68178,United States.  World Journal of Gastroenterology. 2009(14)



本文編號：3233190