睪丸組織的冷凍保存為雄性生殖細(xì)胞的保存、珍稀瀕危物種的保護(hù)以及人類輔助生殖技術(shù)等提供了新的途徑。冷凍睪丸組織能夠避免酶解造成細(xì)胞存活率降低，機(jī)械分離破壞細(xì)胞間連接造成細(xì)胞缺氧加重等影響。但與常見的細(xì)胞冷凍保存相比較，冷凍保存睪丸組織結(jié)構(gòu)和功能復(fù)雜，技術(shù)難度較大。為探索不同冷凍保護(hù)劑對(duì)犢牛睪丸組織的冷凍保護(hù)效果，篩選犢牛睪丸組織冷凍保存合適的冷凍保護(hù)劑，本試驗(yàn)選擇二甲基亞砜、甘油、丙二醇、蔗糖和葡萄糖原花青素作為犢牛睪丸組織冷凍保存的保護(hù)劑，對(duì)8月齡犢牛睪丸組織進(jìn)行冷凍保存，檢測(cè)冷凍前后犢牛睪丸組織內(nèi)一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和睪酮等生化指標(biāo)的變化以及細(xì)胞活率，揭示影響睪丸組織冷凍保存效果的關(guān)鍵因素，旨在初步建立犢牛睪丸組織低損傷冷凍保存體系，為犢牛睪丸組織冷凍保存的進(jìn)一步研究提供依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：1.新鮮犢牛睪丸組織中NO含量為0.45±0.02μmol/mg，NOS活性為0.86±0.05U/mg，SOD活性為8.85±0.3U/mg，MDA含量為1.95±0.1nmol/mg，睪酮釋放量為10.37±1.2nmol/l... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
文獻(xiàn)綜述
    第一章 睪丸組織冷凍保存概述
        1.1 睪丸組織冷凍保存的意義
        1.2 國(guó)內(nèi)外睪丸組織冷凍的研究進(jìn)展
        1.3 冷凍保護(hù)劑的研究進(jìn)展
        1.4 冷凍保護(hù)劑的保護(hù)機(jī)制
        1.5 睪丸組織冷凍效果評(píng)估的研究進(jìn)展
        1.6 睪丸組織冷凍保存技術(shù)的應(yīng)用前景
        1.7 本研究的目的和意義
試驗(yàn)研究
    第二章 不同冷凍保護(hù)劑對(duì)睪丸組織冷凍-解凍后細(xì)胞活率的影響
        2.1 材料和方法
            2.1.1 材料
            2.1.2 方法
        2.2 結(jié)果與分析
        2.3 討論
        2.4 小結(jié)
    第三章 不同冷凍保護(hù)劑對(duì)睪丸組織冷凍解凍后 NO、NOS 的影響
        3.1 材料與方法
            3.1.1 材料
            3.1.2 方法
        3.2 結(jié)果與分析
            3.2.1 新鮮睪丸組織內(nèi) NO 含量和 NOS 活性
            3.2.2 不同冷凍保護(hù)劑對(duì)睪丸組織中 NO 含量的影響
            3.2.3 不同冷凍保護(hù)劑對(duì)睪丸組織中 NOS 活性的影響
        3.3 討論
        3.4 小結(jié)
    第四章 不同冷凍保護(hù)劑對(duì)睪丸組織冷凍-解凍后 SOD、MDA 的影響
        4.1 材料與方法
            4.1.1 材料
            4.1.2 方法
        4.2 結(jié)果與分析
            4.2.1 新鮮睪丸組織中 SOD 活性和 MDA 含量
            4.2.2 不同冷凍保護(hù)劑對(duì)犢牛睪丸組織中 SOD 活性的影響
            4.2.3 不同冷凍保護(hù)劑對(duì)犢牛睪丸組織中 MDA 的影響
        4.3 討論
        4.4 小結(jié)
    第五章 不同冷凍保護(hù)劑對(duì)犢牛睪丸組織冷凍解凍后睪酮釋放量的影響
        5.1 材料與方法
            5.1.1 材料
            5.1.2 試驗(yàn)方法
        5.2 結(jié)果與分析
            5.2.1 新鮮睪丸組織勻漿液中睪酮釋放量的測(cè)定
            5.2.2 解凍后睪丸組織中睪酮釋放量的測(cè)定
        5.3 討論
        5.4 小結(jié)
結(jié)論
進(jìn)一步研究?jī)?nèi)容
參考文獻(xiàn)
附錄Ⅰ 主要溶液的配制
附錄Ⅱ 犢牛睪丸組織的冷凍保存方法
附錄Ⅲ 犢牛睪丸單細(xì)胞懸液的制備
附錄Ⅳ 組織勻漿液制備
縮略詞
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]不同冷凍保護(hù)劑對(duì)未成熟小鼠睪丸組織的保護(hù)作用[D]. 王曉英.河北醫(yī)科大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3231564