小花棘豆生物堿對小白鼠免疫功能及α-甘露糖苷酶基因表達的影響
發(fā)布時間:2021-06-13 16:05
研究小花棘豆的中毒機理,用索氏提取法從小花棘豆中提取出了苦馬豆素(SW)和喹諾里西啶類生物堿,并通過氣相色譜儀鑒定了SW的純度,用SW、喹諾里西啶類生物堿及兩類生物堿的混合物對小白鼠進行攻毒,通過臨床癥狀觀察,免疫器官臟器指數(shù)檢查,血液常規(guī)指標(biāo)檢查(紅細(xì)胞、白細(xì)胞、粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、血紅蛋白),病理組織學(xué)觀察,淋巴細(xì)胞增殖功能、T淋巴細(xì)胞亞群CD4+、CD8+表達率及CD4+/CD8+比值的測定,血清α-甘露糖苷酶活性及肝臟a-甘露糖苷酶基因相對表達量的測定,綜合評價小花棘豆的中毒機理,獲得如下結(jié)果:(1)通過索氏提取法從小花棘豆中提取出了SW和喹諾里西啶類生物堿,得到1.47gSW的結(jié)晶,經(jīng)過氣相色譜檢測結(jié)晶中SW的含量為96.25%,可供試驗使用。(2)給小鼠灌服不同劑量SW、喹諾里西啶類生物堿及其混合生物堿,低劑量的SW能夠不同程度的提高小白鼠外周血液中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞數(shù)目及血紅蛋白的含量,高劑量的SW和喹諾里西啶類生物堿能夠顯著的降低這些細(xì)胞的數(shù)目。病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn),各生物堿組小白鼠的肝臟、脾臟、腦、腎臟均出現(xiàn)了不同程度的病變。(3)低劑量的SW能夠提高動物機...
【文章來源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
1 引言
1.1 小花棘豆的研究現(xiàn)狀
1.1.1 小花棘豆的分布范圍
1.1.2 小花棘豆中毒的臨床癥狀及病理變化
1.1.3 小花棘豆毒性成分的探究
1.1.4 小花棘豆中毒的治療
1.2 小花棘豆生物堿的研究現(xiàn)狀
1.2.1 苦馬豆素的研究現(xiàn)狀
1.2.2 喹諾里西啶類生物堿的研究現(xiàn)狀
1.3 α-甘露糖苷酶的研究進展
1.3.1 α-甘露糖苷酶的分類
1.3.2 α-甘露糖苷酶在糖基化過程中的作用
1.3.3 α-甘露糖苷酶在成熟階段的作用
1.4 本研究的目的和意義
2 小花棘豆生物堿的提取及其檢測
2.1 材料與方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 結(jié)果
2.2.1 小花棘豆生物堿的提取結(jié)果
2.2.2 薄層層析檢測結(jié)果
2.2.3 氣相色譜檢查結(jié)果
2.3 討論
2.3.1 小花棘豆生物堿的提取
2.3.2 薄層層析檢測
2.3.3 氣相色譜檢測
2.4 小結(jié)
3 小花棘豆生物堿對小白鼠免疫毒性的研究
3.1 材料與方法
3.1.1 試驗材料
3.1.2 試驗方法
3.1.3 數(shù)據(jù)處理
3.2 結(jié)果
3.2.1 臨床癥狀觀察
3.2.2 免疫器官臟器指數(shù)結(jié)果
3.2.3 血液常規(guī)指標(biāo)檢測結(jié)果
3.2.4 病理組織形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果
3.3 討論
3.3.1 小花棘豆生物堿劑量的確定
3.3.2 臨床癥狀
3.3.3 小花棘豆生物堿對小白鼠臟器指數(shù)的影響
3.3.4 小花棘豆生物堿對血常規(guī)指標(biāo)的影響
3.3.5 病理組織學(xué)檢測
3.4 小結(jié)
4 小花棘豆生物堿對小白鼠特異性細(xì)胞免疫功能的影響
4.1 材料與方法
4.1.1 試驗材料
4.1.2 試驗方法
4.1.3 數(shù)據(jù)處理
4.2 結(jié)果
4.2.1 小白鼠血液淋巴細(xì)胞的收集及培養(yǎng)結(jié)果
4.2.2 T淋巴細(xì)胞增殖的測定結(jié)果
4.2.3 T淋巴細(xì)胞亞群CD_4~+、CD_8~+表達率及CD_4~+/CD_8~+的比值測定結(jié)果
4.3 討論
4.3.1 對T淋巴細(xì)胞增殖性反應(yīng)的影響
4.3.2 對T淋巴細(xì)胞亞群的影響
4.4 小結(jié)
5 小花棘豆生物堿對小白鼠α-甘露糖苷酶活性及其肝臟α-甘露糖苷酶基因相對表達量的影響
5.1 材料與方法
5.1.1 試驗材料
5.1.2 試驗方法
5.1.3 數(shù)據(jù)處理
5.2 結(jié)果
5.2.1 α-甘露糖苷酶活性的測定結(jié)果
5.2.2 普通PCR擴增電泳結(jié)果
5.2.3 α-甘露糖苷酶基因表達的結(jié)果
5.2.4 基因測序結(jié)果
5.3 討論
5.4 小結(jié)
6 結(jié)論
致謝
參考文獻
附錄
作者簡介
【參考文獻】:
期刊論文
[1]苦馬豆素抑制α-甘露糖苷酶的劑量效應(yīng)關(guān)系[J]. 孔祥雅,荊新堂,張麗慧,李勤凡,郭偉. 動物醫(yī)學(xué)進展. 2011(01)
[2]中西醫(yī)結(jié)合治療綿羊棘豆草中毒[J]. 郭繼君. 中國獸醫(yī)雜志. 2008(06)
[3]氣相色譜-甲基化-α-D-甘露糖苷內(nèi)標(biāo)法測定變異黃芪中的苦馬豆素[J]. 趙興華,崔忠華,耿果霞,王建華,張志敏,宋毓民,劉志濱. 色譜. 2007(05)
[4]抗菌肽對肉雞外周血T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響[J]. 王靜,李同樹. 家畜生態(tài)學(xué)報. 2007(03)
[5]冬蟲夏草提取液對實驗性病毒性心肌炎小鼠免疫功能的影響[J]. 李鋒,高興玉,饒邦復(fù),劉利,董波,崔連群. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2006(03)
[6]豆類絲核菌次級代謝產(chǎn)物對動植物細(xì)胞損害作用的對比[J]. 楊鳴琦,張黎. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2006(04)
[7]黃花堿對小白鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)中毒機理的研究[J]. 李培鋒,耿久榮,關(guān)紅. 畜牧與飼料科學(xué). 2005(03)
[8]苦馬豆素人工抗原免疫山羊的安全性試驗[J]. 董強,童德文,付廣建,劉文明,趙寶玉. 中國畜牧雜志. 2005(05)
[9]小鼠小花棘豆生物堿中毒的病理學(xué)觀察[J]. 陳紹淑,趙寶玉,何生虎,譚承建,董強. 中國獸醫(yī)科技. 2004(12)
[10]冰川棘豆對家兔的毒性研究[J]. 李勤凡,王建華,耿果霞,閆小兵,王筱婷. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2004(06)
碩士論文
[1]山羊小花棘豆中毒的藥物預(yù)防試驗[D]. 亢和平.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]小花棘豆主要有毒成分對小白鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)中毒機理的研究[D]. 耿久榮.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
[3]小花棘豆生物堿成分系統(tǒng)分析及其活性研究[D]. 陳紹淑.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2004
本文編號:3227853
【文章來源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
1 引言
1.1 小花棘豆的研究現(xiàn)狀
1.1.1 小花棘豆的分布范圍
1.1.2 小花棘豆中毒的臨床癥狀及病理變化
1.1.3 小花棘豆毒性成分的探究
1.1.4 小花棘豆中毒的治療
1.2 小花棘豆生物堿的研究現(xiàn)狀
1.2.1 苦馬豆素的研究現(xiàn)狀
1.2.2 喹諾里西啶類生物堿的研究現(xiàn)狀
1.3 α-甘露糖苷酶的研究進展
1.3.1 α-甘露糖苷酶的分類
1.3.2 α-甘露糖苷酶在糖基化過程中的作用
1.3.3 α-甘露糖苷酶在成熟階段的作用
1.4 本研究的目的和意義
2 小花棘豆生物堿的提取及其檢測
2.1 材料與方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 結(jié)果
2.2.1 小花棘豆生物堿的提取結(jié)果
2.2.2 薄層層析檢測結(jié)果
2.2.3 氣相色譜檢查結(jié)果
2.3 討論
2.3.1 小花棘豆生物堿的提取
2.3.2 薄層層析檢測
2.3.3 氣相色譜檢測
2.4 小結(jié)
3 小花棘豆生物堿對小白鼠免疫毒性的研究
3.1 材料與方法
3.1.1 試驗材料
3.1.2 試驗方法
3.1.3 數(shù)據(jù)處理
3.2 結(jié)果
3.2.1 臨床癥狀觀察
3.2.2 免疫器官臟器指數(shù)結(jié)果
3.2.3 血液常規(guī)指標(biāo)檢測結(jié)果
3.2.4 病理組織形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果
3.3 討論
3.3.1 小花棘豆生物堿劑量的確定
3.3.2 臨床癥狀
3.3.3 小花棘豆生物堿對小白鼠臟器指數(shù)的影響
3.3.4 小花棘豆生物堿對血常規(guī)指標(biāo)的影響
3.3.5 病理組織學(xué)檢測
3.4 小結(jié)
4 小花棘豆生物堿對小白鼠特異性細(xì)胞免疫功能的影響
4.1 材料與方法
4.1.1 試驗材料
4.1.2 試驗方法
4.1.3 數(shù)據(jù)處理
4.2 結(jié)果
4.2.1 小白鼠血液淋巴細(xì)胞的收集及培養(yǎng)結(jié)果
4.2.2 T淋巴細(xì)胞增殖的測定結(jié)果
4.2.3 T淋巴細(xì)胞亞群CD_4~+、CD_8~+表達率及CD_4~+/CD_8~+的比值測定結(jié)果
4.3 討論
4.3.1 對T淋巴細(xì)胞增殖性反應(yīng)的影響
4.3.2 對T淋巴細(xì)胞亞群的影響
4.4 小結(jié)
5 小花棘豆生物堿對小白鼠α-甘露糖苷酶活性及其肝臟α-甘露糖苷酶基因相對表達量的影響
5.1 材料與方法
5.1.1 試驗材料
5.1.2 試驗方法
5.1.3 數(shù)據(jù)處理
5.2 結(jié)果
5.2.1 α-甘露糖苷酶活性的測定結(jié)果
5.2.2 普通PCR擴增電泳結(jié)果
5.2.3 α-甘露糖苷酶基因表達的結(jié)果
5.2.4 基因測序結(jié)果
5.3 討論
5.4 小結(jié)
6 結(jié)論
致謝
參考文獻
附錄
作者簡介
【參考文獻】:
期刊論文
[1]苦馬豆素抑制α-甘露糖苷酶的劑量效應(yīng)關(guān)系[J]. 孔祥雅,荊新堂,張麗慧,李勤凡,郭偉. 動物醫(yī)學(xué)進展. 2011(01)
[2]中西醫(yī)結(jié)合治療綿羊棘豆草中毒[J]. 郭繼君. 中國獸醫(yī)雜志. 2008(06)
[3]氣相色譜-甲基化-α-D-甘露糖苷內(nèi)標(biāo)法測定變異黃芪中的苦馬豆素[J]. 趙興華,崔忠華,耿果霞,王建華,張志敏,宋毓民,劉志濱. 色譜. 2007(05)
[4]抗菌肽對肉雞外周血T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響[J]. 王靜,李同樹. 家畜生態(tài)學(xué)報. 2007(03)
[5]冬蟲夏草提取液對實驗性病毒性心肌炎小鼠免疫功能的影響[J]. 李鋒,高興玉,饒邦復(fù),劉利,董波,崔連群. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2006(03)
[6]豆類絲核菌次級代謝產(chǎn)物對動植物細(xì)胞損害作用的對比[J]. 楊鳴琦,張黎. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2006(04)
[7]黃花堿對小白鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)中毒機理的研究[J]. 李培鋒,耿久榮,關(guān)紅. 畜牧與飼料科學(xué). 2005(03)
[8]苦馬豆素人工抗原免疫山羊的安全性試驗[J]. 董強,童德文,付廣建,劉文明,趙寶玉. 中國畜牧雜志. 2005(05)
[9]小鼠小花棘豆生物堿中毒的病理學(xué)觀察[J]. 陳紹淑,趙寶玉,何生虎,譚承建,董強. 中國獸醫(yī)科技. 2004(12)
[10]冰川棘豆對家兔的毒性研究[J]. 李勤凡,王建華,耿果霞,閆小兵,王筱婷. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2004(06)
碩士論文
[1]山羊小花棘豆中毒的藥物預(yù)防試驗[D]. 亢和平.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]小花棘豆主要有毒成分對小白鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)中毒機理的研究[D]. 耿久榮.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
[3]小花棘豆生物堿成分系統(tǒng)分析及其活性研究[D]. 陳紹淑.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2004
本文編號:3227853
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