布魯氏菌�。˙rucellosis）是由布魯氏菌（Brucella）引起的一種人畜共患的全身性傳染病。布魯氏菌的宿主范圍主要包括家畜、野生動物和人等，該病的臨床癥狀為長期發(fā)熱、多汗、流產(chǎn)與不育、關(guān)節(jié)痛及肝脾腫大等。布魯氏菌病的廣泛流行，給世界各國的養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失，同時該病也給廣大一線獸醫(yī)和養(yǎng)殖者的健康帶來了嚴重的威脅，因此了解該病的致病機制，做好該病的預(yù)防和監(jiān)測工作是事關(guān)重要的。本實驗通過PCR（polymerase chain reaction）分子生物學(xué)檢測方法對16SrDNA、omp2b基因、Cu/Zn-SOD基因、omp28基因、omp10基因、omp25基因、virB10基因等的應(yīng)用來對病料進行分離鑒定，又通過布魯氏菌的分型方法AMOS–PCR對其進行分型。結(jié)果表明通過PCR方法檢測的53份病料中，有50份檢測結(jié)果為陰性，3份為陽性，檢出率為5.66%，且經(jīng)分型后發(fā)現(xiàn)2份為牛種布魯氏菌，1份為羊種布魯氏菌；而通過細菌分離培養(yǎng)的方法只分離到2份為陽性，檢出率為3.77%；PCR方法比細菌分離方法的檢出率高出1.89個百分點，細菌分離法和PCR檢測方法的陽性符合率為1... 

【文章來源】：浙江農(nóng)林大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

牛奶樣品中布魯氏菌的分離培養(yǎng)

A PCR 的擴增結(jié)果，M 為 100bp 的 DNA marker，1、2、3、4、5 為部分需；B:AMOS-PCR 的擴增結(jié)果，1、2、3 為鑒定陽性菌，4 為陰性對照，其:OMP2b PCR 的擴增結(jié)果，1、2、3 為鑒定陽性菌，4 為陰性對照，其它需MP10 PCR 的擴增結(jié)果，1、2、3 為鑒定陽性菌，4 為陰性對照，其它需鑒P25 PCR 的擴增結(jié)果，1、2、3 為鑒定陽性菌，4 為陰性對照，其它需鑒定CR 的擴增結(jié)果，1、2、3 為鑒定陽性菌，4 為陰性對照，其它需鑒定菌為 PCR 的擴增結(jié)果，1、2、3 為鑒定陽性菌，4 為陰性對照，其它需鑒定菌為陰性結(jié)果，2、3、4 為鑒定陽性菌，1 為陰性對照，其它需鑒定菌為陰性；結(jié)果及序列比對分析將送上海英俊公司測序部測序的測序結(jié)果與 NCBI 數(shù)據(jù)庫中已收錄現(xiàn)，所有的 53 份病料中，16SrDNA PCR 方法可以鑒定出 3 株疑似圖 1-2 各段目的基因的擴增Fig.1-2 Paragraphs purpose gene amplificationHG

圖 2-1 Cu/Zn-SOD、OMP28 基因的擴增g.2-1 Amplification of Cu/Zn-SOD and OMP28 by PCRarker; 1: amplification of Cu/Zn-SOD by PCR using P1/P2; 2:amsing P3/P1 MM 2522bp7M 1 2 M 35300bp520500bp700bp600bp800bp

【參考文獻】：
期刊論文
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