發(fā)布時(shí)間：2021-06-02 21:59

　　肝炎-心包積液綜合征（Hepatitis Hydropericardium Syndrome,HHS）是由Ⅰ群禽腺病毒血清4型（Fowl adenovirus 4,FAdV-4）引起的主要侵害雞的一種病毒性傳染病。典型癥狀為3-9周齡雞突然死亡,并伴隨心包積液、包涵體肝炎,發(fā)病率和死亡率均高。1987年在巴基斯坦的卡拉奇附近的安卡拉地區(qū)首次報(bào)道本病,隨后在墨西哥、印度、俄羅斯、韓國(guó)、日本等國(guó)家均有該病發(fā)生的報(bào)道。2015年以來(lái),由FAdV-4新基因型導(dǎo)致的HHS在我國(guó)山東、河南、江蘇等地出現(xiàn)流行,死亡率高達(dá)80%,給我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)了較大的經(jīng)濟(jì)損失。目前,疫苗免疫仍是防控禽腺病毒感染的重要手段,但市場(chǎng)還沒(méi)有預(yù)防該病較正規(guī)商品化的疫苗,研究針對(duì)FAdV-4新基因型的疫苗將有助于防控HHS在中國(guó)的流行。弱毒活疫苗能夠模擬病毒侵染機(jī)體的全過(guò)程,能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生包括黏膜免疫反應(yīng)在內(nèi)的各級(jí)免疫反應(yīng)。為了研發(fā)用于HHS防控的FAdV-4弱毒活疫苗,本研究對(duì)分離自健康雞的FAdV-4毒株ON1的生物學(xué)特性和體外增殖規(guī)律以及對(duì)FAdV-4中國(guó)流行株強(qiáng)毒攻擊的保護(hù)效果進(jìn)行了研究,以期為進(jìn)一步研發(fā)用于防控H... 

【文章來(lái)源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

FAdV-4ON1毒株感染LMH細(xì)胞后不同時(shí)間點(diǎn)的形態(tài)變化（100x）

圖 1-2 FAdV-4 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 標(biāo)準(zhǔn)曲線Figure.1-2 The standard curve for Real-time PCR of FAdV-4-4 ON1 在 LMH 細(xì)胞上的增殖動(dòng)態(tài)究 FAdV-4 ON1 毒株在雞肝癌上皮細(xì)胞中的復(fù)制動(dòng)態(tài)，病毒接毒后 12、2、84、96、108 和 120 h，分別收取細(xì)胞培養(yǎng)上清和全細(xì)胞裂解物，利清和細(xì)胞裂解物中的病毒滴度繪制病毒生長(zhǎng)曲線，細(xì)胞培養(yǎng)上清中的-48h 逐漸增高，在接毒后 72h 達(dá)到峰值（107.0TCID50/0.1 ml），96h 后中的病毒滴度也在接毒后 12h 逐漸上升，在接毒后 72h 達(dá)到最高（107.5毒 84h 后，開(kāi)始緩慢下降。利用 SYBR Green I 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR，測(cè)上清及細(xì)胞裂解物中 FAdV-4 ON1 的基因組拷貝數(shù)，并將其繪制成基可知，F(xiàn)AdV-4 在感染 LMH 細(xì)胞后上清中的病毒基因組復(fù)制動(dòng)態(tài)與一致，病毒基因組拷貝數(shù)在感染后 12-36h 不斷增加，在感染后 48-84h到 120h，細(xì)胞裂解物中的病毒基因組拷貝數(shù)在感染后的 12h 一直保持8-96h 上升緩慢，在 120h 達(dá)到最高（圖 1-3、1-4）。

圖 1-2 FAdV-4 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 標(biāo)準(zhǔn)曲線Figure.1-2 The standard curve for Real-time PCR of FAdV-4 ON1 在 LMH 細(xì)胞上的增殖動(dòng)態(tài)FAdV-4 ON1 毒株在雞肝癌上皮細(xì)胞中的復(fù)制動(dòng)態(tài)，病毒接毒后 12、24、36、84、96、108 和 120 h，分別收取細(xì)胞培養(yǎng)上清和全細(xì)胞裂解物，利用測(cè)定的和細(xì)胞裂解物中的病毒滴度繪制病毒生長(zhǎng)曲線，細(xì)胞培養(yǎng)上清中的病毒滴度在h 逐漸增高，在接毒后 72h 達(dá)到峰值（107.0TCID50/0.1 ml），96h 后逐漸下降；的病毒滴度也在接毒后 12h 逐漸上升，在接毒后 72h 達(dá)到最高（107.5TCID50/0.184h 后，開(kāi)始緩慢下降。利用 SYBR Green I 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR，測(cè)定不同時(shí)間清及細(xì)胞裂解物中 FAdV-4 ON1 的基因組拷貝數(shù)，并將其繪制成基因組復(fù)制曲知，F(xiàn)AdV-4 在感染 LMH 細(xì)胞后上清中的病毒基因組復(fù)制動(dòng)態(tài)與病毒滴度的，病毒基因組拷貝數(shù)在感染后 12-36h 不斷增加，在感染后 48-84h 增幅變小， 120h，細(xì)胞裂解物中的病毒基因組拷貝數(shù)在感染后的 12h 一直保持平緩的上96h 上升緩慢，在 120h 達(dá)到最高（圖 1-3、1-4）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]雞包涵體肝炎病毒DNA探針的制備及其流行病學(xué)調(diào)查[D]. 董婷婷.揚(yáng)州大學(xué) 2011
[2]Ⅰ群禽腺病毒的分離鑒定及其生物學(xué)特性研究[D]. 王小輝.揚(yáng)州大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3210828