金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）為葡萄球菌屬的革蘭陽性球菌,可引起食物中毒、心內(nèi)膜炎、葡萄球菌燙傷皮膚綜合征和中毒性休克綜合征,是一種常見的人獸共患病病原。目前治療金黃色葡萄球菌主要是使用抗生素,而抗生素的濫用導(dǎo)致金黃色葡萄球菌耐藥菌株愈來愈多,給臨床治療帶來困難。本研究通過噬菌體富集法從豬糞中分離出5株金黃色葡萄球菌烈性噬菌體,分別命名為4086-1、4086-2、4086-3、4086-4和4086-6。通過電鏡觀察,5株噬菌體均具有典型的二十面體頭部和不能收縮的短尾部,屬于尾噬菌體目、短尾噬菌體科。通過對噬菌體基因組進行限制性內(nèi)切酶（Eco R Ⅰ、Hpa Ⅰ、Rsr Ⅱ、Sac Ⅰ、Sph Ⅰ、Bgl Ⅱ、SMa Ⅱ、Sac Ⅱ、Sna B Ⅰ、Avr Ⅱ、Pst Ⅰ）分析,結(jié)果表明噬菌體4086-1、4086-2、4086-3、4086-4和4086-6是5株不同的噬菌體。宿主范圍測定結(jié)果顯示,4086-1、4086-2、4086-3可感染金黃色葡萄球菌S.aureus CVCC546、S.aureus 4086、S.aureus Ben和S.au... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 金黃色葡萄球菌研究進展
        1.1.1 金黃色葡萄球菌生物學(xué)特性及流行性危害
        1.1.2 金黃色葡萄球菌的生物膜形成過程及調(diào)控機制
        1.1.3 金黃色葡萄球菌耐藥性及耐藥機制
    1.2 噬菌體研究進展
        1.2.1 噬菌體的概述
        1.2.2 噬菌體的分類及應(yīng)用
        1.2.3 噬菌體的應(yīng)用
        1.2.4 噬菌體在控制細菌生物膜方面的應(yīng)用
    1.3 研究目的與意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 樣品和菌株
        2.1.2 主要試劑和設(shè)備
        2.1.3 培養(yǎng)基配制
        2.1.4 主要溶液配制
        2.1.5 實驗動物
    2.2 試驗方法
        2.2.1 金黃色葡萄球菌的鑒定
        2.2.2 金黃色葡萄球菌噬菌體的分離
        2.2.3 噬菌體生物學(xué)特性的鑒定
        2.2.4 噬菌體基因組結(jié)構(gòu)分析
        2.2.5 理化因素對噬菌體活性的影響
        2.2.6 噬菌體對不同細菌吸附率的檢測
        2.2.7 噬菌體感染后對細菌生長繁殖的影響
        2.2.8 噬菌體對金黃色葡萄球菌生物膜的影響
        2.2.9 乳腺炎模型的建立
        2.2.10 噬菌體對小鼠乳腺炎的治療
3 結(jié)果
    3.1 金黃色葡萄球菌的鑒定結(jié)果
        3.1.1 nuc和 mecA基因的擴增及鑒定
        3.1.2 耐藥性的測定結(jié)果
    3.2 金葡菌噬菌體的分離及其生物學(xué)特性鑒定結(jié)果
        3.2.1 噬菌斑的觀察結(jié)果
        3.2.2 噬菌體的電鏡觀察結(jié)果
        3.2.3 宿主范圍的測定結(jié)果
        3.2.4 最佳感染復(fù)數(shù)的測定結(jié)果
        3.2.5 一步生長曲線測定結(jié)果
    3.3 噬菌體基因組結(jié)構(gòu)的鑒定結(jié)果
        3.3.1 基因組性質(zhì)的鑒定結(jié)果
        3.3.2 基因組酶切鑒定結(jié)果
    3.4 理化因素對噬菌體活性的影響結(jié)果
        3.4.1 溫度對噬菌體活性的影響結(jié)果
        3.4.2 pH對噬菌體活性的影響結(jié)果
        3.4.3 有機試劑對噬菌體活性的影響結(jié)果
        3.4.4 去污劑對噬菌體活性的影響結(jié)果
        3.4.5 滲透壓對噬菌體活性的影響結(jié)果
        3.4.6 鈣鎂離子對噬菌體活性的影響結(jié)果
    3.5 噬菌體對不同細菌吸附率的測定結(jié)果
    3.6 噬菌體感染后對細菌生長繁殖的影響結(jié)果
    3.7 噬菌體對金黃色葡萄球菌生物膜形成的影響結(jié)果
        3.7.1 pH對生物膜形成的影響結(jié)果
        3.7.2 不同培養(yǎng)時間對生物膜形成的影響結(jié)果
        3.7.3 噬菌體清除生物膜能力的檢測結(jié)果
    3.8 小鼠金葡菌乳腺炎模型的建立
        3.8.1 臨床表征變化
        3.8.2 乳腺組織中細菌數(shù)的測定結(jié)果
        3.8.3 乳腺病理組織學(xué)變化
        3.8.4 乳腺組織內(nèi)細胞因子TNF-α含量變化
    3.9 噬菌體對小鼠乳腺炎治療結(jié)果
        3.9.1 噬菌體對小鼠的毒性檢測
        3.9.2 乳腺組織中細菌數(shù)的測定結(jié)果
        3.9.3 乳腺組織病理學(xué)觀察結(jié)果
        3.9.4 乳腺組織內(nèi)細胞因子檢測結(jié)果
4 討論
    4.1 金葡菌噬菌體對理化因素耐受能力的分析及對生產(chǎn)實踐的指導(dǎo)意義
    4.2 噬菌體對金黃色葡萄球菌生物膜的清除作用
    4.3 金葡菌噬菌體在治療耐藥菌感染方面的應(yīng)用
5 結(jié)論
致謝
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3207378