牛病毒性腹瀉/粘膜�。˙ovineviraldiarrhea/mucosaldisease）是由牛病毒性腹瀉病毒引起的、主要發(fā)生于牛的一種急性、熱性傳染病，其臨診特征為黏膜發(fā)炎、糜爛、壞死和腹瀉。本病呈世界性分布，廣泛存在于歐美等許多養(yǎng)牛業(yè)發(fā)達(dá)的國(guó)家。自1980年以來(lái)我國(guó)從國(guó)外引進(jìn)奶牛和種牛，將本病傳入我國(guó)，并對(duì)病毒進(jìn)行了分離鑒定。發(fā)達(dá)國(guó)家針對(duì)感染牛群多采取大量淘汰或屠殺，目前尚無(wú)有效的疫苗對(duì)BVDV進(jìn)行預(yù)防，給畜牧業(yè)生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，促使人們不斷尋求新的防治BVDV的途徑，以便更好的控制該病的發(fā)生和流行。自雜交瘤細(xì)胞技術(shù)問(wèn)世，單克隆抗體已被廣泛用于疾病的診斷和治療�？贵w來(lái)自于有機(jī)體，使用過(guò)程中無(wú)毒性，在人們看來(lái)抗體用于治療疾病似乎具有無(wú)限的潛力。然而傳統(tǒng)的單克隆抗體依然存在各種缺陷，比如：體積大、穩(wěn)定性差、制備工藝繁瑣、耗資高、必須人源化等。駝科動(dòng)物和鯊魚(yú)體內(nèi)存在一種特殊的天然缺失輕鏈的重鏈抗體。這種重鏈抗體的可變區(qū)序列具有體積小、容易獲得、高水溶性和穩(wěn)定性、能夠識(shí)別溝槽或縫隙間的抗原表位及結(jié)合活性好等優(yōu)點(diǎn)，被稱作是單域抗體，又稱納米抗體。鑒于單域抗體的這些優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于... 

【文章來(lái)源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英文縮略表
引言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    綜述一 牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）的研究進(jìn)展
        1 BVDV概述
            1.1 BVDV病毒特性
            1.2 病毒的生物型
        2 病毒基因組及其編碼蛋白
            2.1 病毒基因組
            2.2 編碼結(jié)構(gòu)蛋白
            2.3 編碼的非結(jié)構(gòu)蛋白
        3 BVDV感染抑制宿主的免疫反應(yīng)
            3.1 BVDV感染抑制宿主適應(yīng)性免疫
            3.2 BVDV感染抑制宿主固有免疫
    綜述二 納米抗體的研究進(jìn)展
        1 納米抗體的概述
            1.1 納米抗體的發(fā)現(xiàn)
            1.2 納米抗體的結(jié)構(gòu)及功能
            1.3 納米抗體的特性
        2 納米抗體在抗感染中的應(yīng)用
            2.1 VHH抗細(xì)菌的應(yīng)用
            2.2 納米抗體用于抵抗真菌生物和寄生蟲(chóng)
            2.3 VHH靶向病毒
第二章 試驗(yàn)研究
    實(shí)驗(yàn)一 牛病毒性腹瀉病毒E~(RNS)、E2蛋白的表達(dá)純化
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 目的基因的擴(kuò)增
            2.2 重組質(zhì)粒PMD19-T-E~(RNS)/E2的鑒定結(jié)果
            2.3 重組表達(dá)質(zhì)粒的鑒定
            2.4 原核產(chǎn)物的表達(dá)
        3 討論
            3.1 牛病毒性腹瀉病毒囊膜蛋白E2、E~(RNS)的研究
            3.2 原核表達(dá)載體的構(gòu)建及蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)
            3.3 包涵體純化應(yīng)注意的問(wèn)題
        4 小結(jié)
    實(shí)驗(yàn)二 噬菌體展示ANTI-BVDV納米抗體文庫(kù)的構(gòu)建
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 病毒增殖
            2.2 常規(guī)微量法測(cè)定BVDV-NADL株TCID50
            2.3 全病毒抗原的滅活檢測(cè)
            2.4 免疫后抗體效價(jià)的測(cè)定
            2.5 總RNA的提取與分析
            2.6 納米抗體基因（VHH）的擴(kuò)增
            2.7 重組質(zhì)粒PCANTAB5E-VHH酶切鑒定
            2.8 初始文庫(kù)的抗體序列多樣性和庫(kù)容量測(cè)定
            2.9 噬菌體抗體庫(kù)的庫(kù)容量測(cè)定
        3 討論
            3.1 駝源單域抗體基因序列的擴(kuò)增
            3.2 噬菌體抗體庫(kù)的構(gòu)建
        4 小結(jié)
結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附錄：主要試劑的配制
    一、分子克隆所需試劑的配制
    二、蛋白表達(dá)與純化所需試劑的配制
    三、細(xì)胞培養(yǎng)所需試劑的配制
    四、試劑盒操作說(shuō)明書(shū)
致謝
作者簡(jiǎn)介
導(dǎo)師評(píng)閱表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的研究進(jìn)展及應(yīng)用[J]. 王凱,劉洪艷,牟玲.  微生物學(xué)雜志. 2011(06)
[2]具有熒光標(biāo)簽的豬瘟病毒Erns蛋白在桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)[J]. 陳柳,余斌,云濤,倪征,華炯鋼,李雙茂.  華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2011(01)
[3]牦牛病毒性腹瀉/黏膜病和傳染性鼻氣管炎血清學(xué)調(diào)查[J]. 韓志輝,圈華,賀曉龍,魏科峰,額爾德尼扎布.  中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào). 2010(06)
[4]牛病毒性腹瀉的研究概況[J]. 謝西鋒,崔保安.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2001(11)
[5]雙抗體夾心ELISA檢測(cè)牛病毒性腹瀉病毒的研究[J]. 王新平,任文陟,朱維正,李佑民,宣華,常國(guó)權(quán),丁壯.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1995(03)
[6]牛病毒性腹瀉—粘膜病病毒株（長(zhǎng)春184）的分離與鑒定[J]. 李佑民,劉振潤(rùn),武銀蓮.  獸醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 1983(02)



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