本研究從已有血紅扇頭蜱miRNA數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選出與卵發(fā)育相關(guān)的miR-275基因,尋找調(diào)控靶基因的啟動(dòng)子等轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)域,預(yù)測(cè)靶標(biāo)基因,采用RNA干擾及qRT-PCR方法對(duì)其真實(shí)性進(jìn)行驗(yàn)證;PCR擴(kuò)增靶標(biāo)基因進(jìn)行序列分析;選擇功能區(qū)構(gòu)建重組表達(dá)載體,進(jìn)行體外原核表達(dá)及免疫反應(yīng)的研究。miR-275作為重要的基因調(diào)控因子,分析其在血紅扇頭蜱不同發(fā)育階段的表達(dá)水平具有重要意義。利用RNA干擾、實(shí)時(shí)熒光定量（qRT-PCR）、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等方法共同分析miR-275調(diào)控靶標(biāo)基因的作用機(jī)制。結(jié)果顯示,卵黃原蛋白（vitellogenin,Vg）基因是miR-275重要的靶標(biāo)基因。參考GenBank中微小扇頭蜱（Rhipicephalus microplus）（登錄號(hào):EU086096）卵黃原蛋白核苷酸序列,設(shè)計(jì)特異性引物,擴(kuò)增獲得基因全長(zhǎng)為1218bp的血紅扇頭蜱Vg基因序列,該基因與微小扇頭蜱同類(lèi)基因具有較高的同源性,達(dá)到93%;其次與變異革蜱、希伯來(lái)花蜱、肩突硬蜱同源性分別為85%、78%、62%。值得注意的是Vg基因包含一個(gè)221個(gè)氨基酸的Von Willebrand Factor tyeD（V... 

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