為建立能同時快速檢測牛星狀病毒（BAstV）和牛諾如病毒（BNoV）的方法,本研究根據(jù)BAstV ORF1a基因和BNoV RdRp基因設計了2對特異性引物,通過優(yōu)化反應條件,建立了能夠同時檢測BAstV和BNoV的雙重PCR方法。特異性試驗結果顯示,該方法對牛輪狀病毒等5種犢牛腹瀉常見病原的擴增結果均為陰性,僅BAstV和BNoV擴增結果為陽性,特異性較強;敏感性試驗結果顯示,該方法對BAstV和BNoV重組質粒的最低檢測限分別為1.09×10³拷貝/μL和1.42×10³拷貝/μL,敏感性較高;批內(nèi)和批間試驗結果一致,該方法重復性好。利用該方法和各病原單一PCR方法同時對221份河南省犢牛腹瀉糞便樣品進行檢測,BAstV和BNoV的陽性檢出率分別為18.1%和9.96%,兩種方法符合率為100%。本研究在國內(nèi)首次建立了檢測BAstV和BNoV的雙重PCR方法,其特異性強,敏感性高,重復性好,為BAstV和BNoV的鑒別檢測及其分子流行病學調查提供了技術支持。 

【文章來源】：中國預防獸醫(yī)學報. 2020,42(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要實驗材料
    1.2 引物設計與合成
    1.3 單一PCR的擴增
    1.4 重組質粒標準品的構建與鑒定
    1.5 雙重PCR反應體系及條件的優(yōu)化
    1.6 特異性試驗
    1.7 敏感性試驗
    1.8 重復性試驗
    1.9 臨床樣品的檢測
2 結果
    2.1 重組質粒標準品的鑒定結果
    2.2 雙重PCR方法的構建及優(yōu)化
    2.3 特異性試驗結果
    2.4 敏感性試驗結果
    2.5 重復性試驗
    2.6 臨床樣品檢測
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]犬瘟熱與犬副流感病毒雙重一步法RT-PCR檢測方法的建立[J]. 趙國清,尹斐斐,安泓霏,王貴升,胡永浩.  中國預防獸醫(yī)學報. 2018(09)



本文編號：3181394