試驗(yàn)旨在對哈薩克綿羊DRB1基因外顯子1和4多態(tài)性與布魯氏菌病的相關(guān)性進(jìn)行研究。使用虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBPT）對試羊的血清進(jìn)行血清學(xué)檢測,參考GenBank中綿羊MHC ClassⅡ區(qū)DRB1基因序列（登錄號:NC₀40271.1）,對其外顯子1和4片段設(shè)計引物,采用PCR-SSCP和DNA測序技術(shù)對230只哈薩克綿羊的DRB1基因進(jìn)行多態(tài)性檢測,分析其多態(tài)位點(diǎn)與哈薩克綿羊布魯氏菌易感性之間的關(guān)系。RBPT檢測發(fā)現(xiàn)66只哈薩克綿羊?yàn)椴剪斒暇腥娟栃?陽性檢出率為28.7%。外顯子1片段存在一個SNP位點(diǎn)（F1-G22A）,測序確定兩種基因型（GG、GA）,優(yōu)勢等位基因和基因型分別為G、GG,F1-G22A多態(tài)位點(diǎn)的易感基因型為GA�？ǚ綑z驗(yàn)表明,哈薩克綿羊DRB1基因F1-G22A多態(tài)位點(diǎn)與布魯氏菌易感性的相關(guān)性不顯著（P>0.05）。通過生物信息學(xué)在線軟件分析得出,F1-G22A多態(tài)位點(diǎn)導(dǎo)致了RNA二級結(jié)構(gòu)的改變和最小自由能的降低,引起了蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的改變。DRB1基因外顯子4片段未發(fā)現(xiàn)SNPs。由此得出,哈薩克綿羊DRB1基因F1-G22A多態(tài)位點(diǎn)與... 

【文章來源】：中國畜牧獸醫(yī). 2020,47(12)北大核心

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 樣品來源
        1.1.2 主要試劑和儀器
    1.2 方法
        1.2.1 布魯氏菌病檢測
        1.2.2 哈薩克綿羊基因組DNA的提取及PCR擴(kuò)增
        1.2.3 哈薩克綿羊DRB1基因的SSCP分析
        1.2.4 測序分析
        1.2.5 統(tǒng)計分析及生物信息學(xué)分析
2 結(jié) 果
    2.1 布魯氏菌病檢測
    2.2 哈薩克綿羊DRB1基因外顯子1、外顯子4 PCR擴(kuò)增
    2.3 哈薩克綿羊DRB1基因外顯子1和外顯子4多態(tài)性分析
    2.4 哈薩克綿羊DRB1基因外顯子1多態(tài)位點(diǎn)F1-G22A與布魯氏菌易感性的相關(guān)性分析
    2.5 F1-G22A多態(tài)位點(diǎn)生物信息學(xué)分析
    2.6 易感布魯氏菌哈薩克綿羊DRB1基因外顯子1 F1-G22A基因型分析
3 討 論
4 結(jié) 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]吉林省布魯氏菌流行株種屬鑒定及其耐藥分子機(jī)制的研究[D]. 孫麗媛.吉林大學(xué) 2011

碩士論文
[1]中國美利奴羊MHC-DRB1 exon2單倍型構(gòu)建及與布魯氏菌病易感性關(guān)聯(lián)性[D]. 陳月娥.石河子大學(xué) 2014
[2]甘肅高山細(xì)毛羊微衛(wèi)星親子鑒定及DRB1基因第3外顯子多態(tài)性研究[D]. 李潔.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



本文編號：3181101