轉(zhuǎn)移因子（Transfer factor，TF）是一種低分子量的淋巴細胞提取物，能夠?qū)⒚庖咧旅粜畔⑥D(zhuǎn)移到T淋巴細胞，增強機體免疫功能，是一種新型的免疫激發(fā)劑。目前，該產(chǎn)品不僅用于家禽的免疫抑制病、過敏癥及自身免疫疾病的治療，而且已作為一種免疫增強劑用于提高疫苗的免疫效果。但是，轉(zhuǎn)移因子的組成一直是一個難于破解的迷。本研究利用凍融-透析法制備獸用雞脾轉(zhuǎn)移因子口服溶液，分別采用福林酚法測定雞脾轉(zhuǎn)移因子的多肽含量；利用SDS-PAGE電泳法和基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜法（MALDI-TOF-MS）測定其分子量；采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS）分析雞脾轉(zhuǎn)移因子的多肽組成；利用脫E受體法測定雞脾轉(zhuǎn)移因子活力。同時，對其在臨床上的應(yīng)用效果進行了評價。研究表明，通過福林酚法測定的雞脾轉(zhuǎn)移因子口服溶液多肽含量為1570.8μg/mL；利用SDS-PAGE電泳法測得的多肽分子量為9213Da；利用脫E受體法測定的雞脾轉(zhuǎn)移因子活力為10.92%；利用LC-MS法測得的多肽分子量為800Da～7476Da，共含有581種多肽，其中包括T細胞凋亡抑制相關(guān)蛋白（TIAL1）、胸腺肽β4（TMSB4X... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
符號說明
中文摘要
Abstract
1.文獻綜述
    1.1 轉(zhuǎn)移因子的分類
    1.2 轉(zhuǎn)移因子的理化特性
    1.3 轉(zhuǎn)移因子的生物學(xué)活性及作用機理
        1.3.1 TF 可增強體液免疫、抗放射及免疫抑制
        1.3.2 TF 可增強細胞免疫
        1.3.3 TF 可趨化中性粒細胞和巨噬細胞活性
        1.3.4 TF 具有免疫調(diào)節(jié)作用
        1.3.5 TF 可促進機體生長發(fā)育
        1.3.6 TF 的人工被動免疫作用
    1.4 轉(zhuǎn)移因子的制備方法
        1.4.1 凍融透析法
        1.4.2 乙醇提取法
        1.4.3 層析法
        1.4.4 超濾法
    1.5 轉(zhuǎn)移因子在生產(chǎn)中的應(yīng)用
        1.5.1 在人臨床上的應(yīng)用
            1.5.1.1 治療小兒心肌炎
            1.5.1.2 治療流行性腮腺炎
            1.5.1.3 治療呼吸道反復(fù)感染
            1.5.1.4 治療皰疹病毒
            1.5.1.5 治療病毒性腸炎
        1.5.2 在動物臨床上的應(yīng)用
            1.5.2.1 在家畜疾病防治中的應(yīng)用
            1.5.2.2 在家禽疾病防治中的應(yīng)用
    1.6 本研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 材料來源
        2.1.2 主要試劑和物品
        2.1.3 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 非特異性雞脾轉(zhuǎn)移因子制備
        2.2.2 多肽含量測定
        2.2.3 分子量測定
            2.2.3.1 SDS-PAGE 電泳法
            2.2.3.2 MALDI-TOF-MS 法
        2.2.4 多肽組成分析
            2.2.4.1 樣品處理
            2.2.4.2 毛細管高效液相色譜方法
            2.2.4.3 質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集
            2.2.4.4 數(shù)據(jù)分析
        2.2.5 活力測定
    2.3 脾轉(zhuǎn)移因子初步臨床應(yīng)用實驗
        2.3.1 試驗動物
        2.3.2 藥物選擇
        2.3.3 動物分組
        2.3.4 治療方案
        2.3.5 數(shù)據(jù)記錄方法
3 結(jié)果與分析
    3.1 多肽含量測定結(jié)果
    3.2 分子量測定結(jié)果
        3.2.1 SDS-PAGE 電泳法
        3.2.2 MALDI-TOF-MS 法
    3.3 多肽組成分析結(jié)果
    3.4 活力測定結(jié)果
    3.5 脾轉(zhuǎn)移因子初步臨床應(yīng)用實驗
        3.5.1 蛋種鴨發(fā)病概況
        3.5.2 產(chǎn)蛋率總體變化
        3.5.3 治療前后產(chǎn)蛋率降幅比較
        3.5.4 產(chǎn)蛋率恢復(fù)效果評價
4 討論
    4.1 轉(zhuǎn)移因子的多肽組成
    4.2 轉(zhuǎn)移因子分子量及其分布
    4.3 轉(zhuǎn)移因子功能與組分的關(guān)系
    4.4 脾轉(zhuǎn)移因子初步臨床應(yīng)用實驗
5 結(jié)論
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)移因子對豬圓環(huán)病毒亞單位疫苗免疫效果的影響[J]. 屈泰龍,李潤成,錢幸,楊宇,余興龍.  湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2013(04)
[2]轉(zhuǎn)移因子治療小兒病毒性心肌炎的療效分析[J]. 程瑞蓉,蔡軍.  中國美容醫(yī)學(xué). 2012(12)
[3]轉(zhuǎn)移因子對豬病毒性免疫抑制的緩解作用[J]. 陳智敏.  福建畜牧獸醫(yī). 2012(05)
[4]雞脾轉(zhuǎn)移因子的制備及對雛雞免疫應(yīng)答的作用研究[J]. 喬宏興,張曉根,任敏,寧豫昌,白靜.  甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2012(01)
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[6]一例蛋鴨黃病毒病的診治[J]. 唐維國,施少華,傅光華,韋啟鵬,劉林秀,季華員,林建生,黃瑜.  中國家禽. 2012(02)
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[9]特異性和非特異性豬脾轉(zhuǎn)移因子的制備及其免疫活性比較[J]. 李士學(xué),侍俊超,周微,袁麗,肖龍文,宋文飛,曹錦艷,張英.  中國生物制品學(xué)雜志. 2011(10)
[10]鴨黃病毒油乳劑滅活疫苗研制及免疫效果測定[J]. 萬春和,施少華,傅光華,梁昭平,王斌,程龍飛,李敏,陳紅梅,林芳,林建生,王鑫,許芬芬,黃瑜.  養(yǎng)禽與禽病防治. 2011(10)

博士論文
[1]雞脾轉(zhuǎn)移因子的研制、檢驗規(guī)程及其應(yīng)用[D]. 凌紅麗.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006

碩士論文
[1]雞轉(zhuǎn)移因子脂質(zhì)體的制備及其免疫增效研究[D]. 王志龍.天津農(nóng)學(xué)院 2011
[2]轉(zhuǎn)移因子對雞免疫機能的影響及其毒性試驗研究[D]. 孫秀玉.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號：3168094