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雞脾轉(zhuǎn)移因子多肽的組成研究及其在蛋種鴨黃病毒治療中的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)

發(fā)布時(shí)間:2021-04-29 20:09
  轉(zhuǎn)移因子(Transfer factor,TF)是一種低分子量的淋巴細(xì)胞提取物,能夠?qū)⒚庖咧旅粜畔⑥D(zhuǎn)移到T淋巴細(xì)胞,增強(qiáng)機(jī)體免疫功能,是一種新型的免疫激發(fā)劑。目前,該產(chǎn)品不僅用于家禽的免疫抑制病、過敏癥及自身免疫疾病的治療,而且已作為一種免疫增強(qiáng)劑用于提高疫苗的免疫效果。但是,轉(zhuǎn)移因子的組成一直是一個(gè)難于破解的迷。本研究利用凍融-透析法制備獸用雞脾轉(zhuǎn)移因子口服溶液,分別采用福林酚法測(cè)定雞脾轉(zhuǎn)移因子的多肽含量;利用SDS-PAGE電泳法和基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜法(MALDI-TOF-MS)測(cè)定其分子量;采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS)分析雞脾轉(zhuǎn)移因子的多肽組成;利用脫E受體法測(cè)定雞脾轉(zhuǎn)移因子活力。同時(shí),對(duì)其在臨床上的應(yīng)用效果進(jìn)行了評(píng)價(jià)。研究表明,通過福林酚法測(cè)定的雞脾轉(zhuǎn)移因子口服溶液多肽含量為1570.8μg/mL;利用SDS-PAGE電泳法測(cè)得的多肽分子量為9213Da;利用脫E受體法測(cè)定的雞脾轉(zhuǎn)移因子活力為10.92%;利用LC-MS法測(cè)得的多肽分子量為800Da~7476Da,共含有581種多肽,其中包括T細(xì)胞凋亡抑制相關(guān)蛋白(TIAL1)、胸腺肽β4(TMSB4X... 

【文章來源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】:49 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
符號(hào)說明
中文摘要
Abstract
1.文獻(xiàn)綜述
    1.1 轉(zhuǎn)移因子的分類
    1.2 轉(zhuǎn)移因子的理化特性
    1.3 轉(zhuǎn)移因子的生物學(xué)活性及作用機(jī)理
        1.3.1 TF 可增強(qiáng)體液免疫、抗放射及免疫抑制
        1.3.2 TF 可增強(qiáng)細(xì)胞免疫
        1.3.3 TF 可趨化中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活性
        1.3.4 TF 具有免疫調(diào)節(jié)作用
        1.3.5 TF 可促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育
        1.3.6 TF 的人工被動(dòng)免疫作用
    1.4 轉(zhuǎn)移因子的制備方法
        1.4.1 凍融透析法
        1.4.2 乙醇提取法
        1.4.3 層析法
        1.4.4 超濾法
    1.5 轉(zhuǎn)移因子在生產(chǎn)中的應(yīng)用
        1.5.1 在人臨床上的應(yīng)用
            1.5.1.1 治療小兒心肌炎
            1.5.1.2 治療流行性腮腺炎
            1.5.1.3 治療呼吸道反復(fù)感染
            1.5.1.4 治療皰疹病毒
            1.5.1.5 治療病毒性腸炎
        1.5.2 在動(dòng)物臨床上的應(yīng)用
            1.5.2.1 在家畜疾病防治中的應(yīng)用
            1.5.2.2 在家禽疾病防治中的應(yīng)用
    1.6 本研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 材料來源
        2.1.2 主要試劑和物品
        2.1.3 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 非特異性雞脾轉(zhuǎn)移因子制備
        2.2.2 多肽含量測(cè)定
        2.2.3 分子量測(cè)定
            2.2.3.1 SDS-PAGE 電泳法
            2.2.3.2 MALDI-TOF-MS 法
        2.2.4 多肽組成分析
            2.2.4.1 樣品處理
            2.2.4.2 毛細(xì)管高效液相色譜方法
            2.2.4.3 質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集
            2.2.4.4 數(shù)據(jù)分析
        2.2.5 活力測(cè)定
    2.3 脾轉(zhuǎn)移因子初步臨床應(yīng)用實(shí)驗(yàn)
        2.3.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        2.3.2 藥物選擇
        2.3.3 動(dòng)物分組
        2.3.4 治療方案
        2.3.5 數(shù)據(jù)記錄方法
3 結(jié)果與分析
    3.1 多肽含量測(cè)定結(jié)果
    3.2 分子量測(cè)定結(jié)果
        3.2.1 SDS-PAGE 電泳法
        3.2.2 MALDI-TOF-MS 法
    3.3 多肽組成分析結(jié)果
    3.4 活力測(cè)定結(jié)果
    3.5 脾轉(zhuǎn)移因子初步臨床應(yīng)用實(shí)驗(yàn)
        3.5.1 蛋種鴨發(fā)病概況
        3.5.2 產(chǎn)蛋率總體變化
        3.5.3 治療前后產(chǎn)蛋率降幅比較
        3.5.4 產(chǎn)蛋率恢復(fù)效果評(píng)價(jià)
4 討論
    4.1 轉(zhuǎn)移因子的多肽組成
    4.2 轉(zhuǎn)移因子分子量及其分布
    4.3 轉(zhuǎn)移因子功能與組分的關(guān)系
    4.4 脾轉(zhuǎn)移因子初步臨床應(yīng)用實(shí)驗(yàn)
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)移因子對(duì)豬圓環(huán)病毒亞單位疫苗免疫效果的影響[J]. 屈泰龍,李潤(rùn)成,錢幸,楊宇,余興龍.  湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2013(04)
[2]轉(zhuǎn)移因子治療小兒病毒性心肌炎的療效分析[J]. 程瑞蓉,蔡軍.  中國(guó)美容醫(yī)學(xué). 2012(12)
[3]轉(zhuǎn)移因子對(duì)豬病毒性免疫抑制的緩解作用[J]. 陳智敏.  福建畜牧獸醫(yī). 2012(05)
[4]雞脾轉(zhuǎn)移因子的制備及對(duì)雛雞免疫應(yīng)答的作用研究[J]. 喬宏興,張曉根,任敏,寧豫昌,白靜.  甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(01)
[5]凍融法提取脾臟轉(zhuǎn)移因子影響因素的試驗(yàn)[J]. 劉堯,劉宗柱.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2012(01)
[6]一例蛋鴨黃病毒病的診治[J]. 唐維國(guó),施少華,傅光華,韋啟鵬,劉林秀,季華員,林建生,黃瑜.  中國(guó)家禽. 2012(02)
[7]豬脾轉(zhuǎn)移因子微囊的制備及其活性檢測(cè)[J]. 符華林,唐文,黃平全,金超,胡俊,鄧?guó)P英.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2012(01)
[8]鴨黃病毒BZ株的生物學(xué)特性研究[J]. 馬秀麗,于可響,高鳳,李玉峰,黃兵,吳靜,秦卓明.  中國(guó)家禽. 2011(21)
[9]特異性和非特異性豬脾轉(zhuǎn)移因子的制備及其免疫活性比較[J]. 李士學(xué),侍俊超,周微,袁麗,肖龍文,宋文飛,曹錦艷,張英.  中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2011(10)
[10]鴨黃病毒油乳劑滅活疫苗研制及免疫效果測(cè)定[J]. 萬春和,施少華,傅光華,梁昭平,王斌,程龍飛,李敏,陳紅梅,林芳,林建生,王鑫,許芬芬,黃瑜.  養(yǎng)禽與禽病防治. 2011(10)

博士論文
[1]雞脾轉(zhuǎn)移因子的研制、檢驗(yàn)規(guī)程及其應(yīng)用[D]. 凌紅麗.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006

碩士論文
[1]雞轉(zhuǎn)移因子脂質(zhì)體的制備及其免疫增效研究[D]. 王志龍.天津農(nóng)學(xué)院 2011
[2]轉(zhuǎn)移因子對(duì)雞免疫機(jī)能的影響及其毒性試驗(yàn)研究[D]. 孫秀玉.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào):3168094

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