雞等級(jí)卵泡顆粒細(xì)胞培養(yǎng)24 h后,在培養(yǎng)基中加入10、5、2.5 mmol/L的3-硝基丙酸（3-NPA）繼續(xù)培養(yǎng)24 h。利用活性氧（ROS）試劑盒檢測(cè)細(xì)胞中ROS的含量;采用ELISA檢測(cè)細(xì)胞上清中孕酮（P4）含量,并采用qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)類固醇生成急性調(diào)節(jié)蛋白（StAR）、細(xì)胞色素P450膽固醇側(cè)鏈裂解酶（P450scc）及3β-類固醇脫氫酶（3β-HSD）m RNA的相對(duì)表達(dá)量,以檢測(cè)3-NPA對(duì)顆粒細(xì)胞孕酮分泌的影響。結(jié)果,加入3-NPA培養(yǎng)24 h后,10、5、2.5 mmol/L組細(xì)胞中ROS含量相對(duì)于細(xì)胞對(duì)照組均顯著升高（P<0.05）;各組細(xì)胞上清的孕酮分泌量并無(wú)顯著差異,而10、5、2.5 mmol/L組細(xì)胞中StAR、P450scc、3β-HSD m RNA的相對(duì)表達(dá)量相對(duì)于細(xì)胞對(duì)照組均極顯著降低（P<0.001）。上述結(jié)果說明,3-NPA會(huì)導(dǎo)致雞等級(jí)卵泡顆粒細(xì)胞的ROS生成并能顯著降低StAR、P450scc、3β-HSD m RNA的相對(duì)表達(dá)量。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(05)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和主要試劑
    1.2 雞等級(jí)卵泡顆粒細(xì)胞的分離培養(yǎng)
    1.3 3-NPA對(duì)雞等級(jí)卵泡顆粒細(xì)胞的安全濃度測(cè)定
    1.4 3-NPA在雞等級(jí)卵泡顆粒細(xì)胞上氧化應(yīng)激模型的建立及鑒定
    1.5 細(xì)胞上清中孕酮含量的檢測(cè)
    1.6 引物設(shè)計(jì)
    1.7 熒光定量PCR檢測(cè)StAR、P450scc、3β-HSD mRNA的相對(duì)表達(dá)量
    1.8 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果
    2.1 3-NPA在雞等級(jí)卵泡顆粒細(xì)胞的藥物安全濃度
    2.2 3-NPA對(duì)雞等級(jí)卵泡顆粒細(xì)胞ROS含量的影響
    2.3 3-NPA對(duì)雞等級(jí)卵泡顆粒細(xì)胞孕酮分泌的影響
    2.4 3-NPA對(duì)雞等級(jí)卵泡顆粒細(xì)胞StAR、P450scc、3β-HSD mRNA的相對(duì)表達(dá)量的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小鼠 雞卵巢顆粒細(xì)胞分離 培養(yǎng)方法的比較與優(yōu)化[J]. 扆妍妍,侯雅鑫,張宇瞳,孫娜,孫耀貴,李宏全.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2019(01)
[2]3-硝基丙酸誘導(dǎo)小鼠卵巢氧化應(yīng)激模型的建立[J]. 張志畢,張媛,蔡婷,任仲坤,楊暉,張榮平.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2018(02)
[3]酵母硒對(duì)鉛暴露致蛋雞卵巢毒性損傷的保護(hù)效應(yīng)研究[J]. 陳大偉,馬麗娜,劉茵茵,蒲俊華,陸俊賢,顧榮,高玉時(shí).  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2016(10)



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