鑒于牛流行熱（BovineEphemeralFever,BEF）對養(yǎng)牛行業(yè)的危害以及熒光定量PCR技術(shù)高效、快速、精準(zhǔn)的優(yōu)點,本研究針對牛流行熱病毒（Bovine Ephemeral Fever Virus,BEFV）G基因建立熒光定量PCR檢測方法。并用所建立的熒光定量PCR檢測方法對臨床采集的樣本進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示:在GenBank數(shù)據(jù)庫中對BEFV全基因組序列進(jìn)行比對分析,找出保守序列,設(shè)計1對擴(kuò)增BEFV G基因片段的引物,通過分子克隆構(gòu)建重組質(zhì)粒制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,擴(kuò)增效率是95.1%,用所建立的方法檢測臨床樣本,陽性15份,陽性率為75%。該試驗成功建立了檢測BEFV的熒光定量PCR檢測方法,證明云南省的牛場中廣泛存在BEFV,建立的熒光定量PCR檢測方法對BEFV的臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查等具有應(yīng)用價值。 

【文章來源】：國外畜牧學(xué)(豬與禽). 2020,40(11)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 樣本采集
        1.1.2 主要儀器
        1.1.3 主要試劑
        1.1.4 引物設(shè)計
    1.2 方法
        1.2.1 BEFV RNA的提取
        1.2.2 反轉(zhuǎn)錄及熒光定量PCR
        1.2.3 熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        1.2.4 臨床樣本的檢測
2 結(jié)果與分析
    2.1 目的片段的擴(kuò)增鑒定
    2.2 構(gòu)建BEFV熒光定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線
    2.3 臨床樣本檢測
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]牛流行熱病毒人工感染牛外周血淋巴細(xì)胞T淋巴細(xì)胞亞類的分布研究[J]. 金紅,李媛,宋曉華,孟慶文,吳東來,于康震,劉寶全.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2002(05)
[4]牛流行熱病毒JB76H株G蛋白基因核苷酸序列分析[J]. 金紅,李媛,于康震,嚴(yán)雋端,劉寶全.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2000(01)
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[6]應(yīng)用電鏡技術(shù)對牛流行熱病毒形態(tài)學(xué)的研究[J]. 李成,谷守林,姜紹德,郝桂玉,張?zhí)?  電子顯微學(xué)報. 1993(01)

博士論文
[1]牛流行熱病毒外膜糖蛋白G基因在重組病毒中的表達(dá)研究[D]. 金紅.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2000

碩士論文
[1]牛流行熱病例的綜合診斷[D]. 岳瑞超.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014



本文編號：3163214