發(fā)布時(shí)間：2021-04-26 01:47

　　本研究對(duì)新城疫病毒（NDV）基質(zhì)蛋白（M）的生物學(xué)功能進(jìn)行了初步研究,試驗(yàn)包括6個(gè)部分,各個(gè)內(nèi)容如下：1、M蛋白結(jié)構(gòu)的生物信息學(xué)分析蛋白質(zhì)的功能由其生物學(xué)結(jié)構(gòu)決定,NDV M蛋白的功能研究目舊非常少,對(duì)其結(jié)構(gòu)的認(rèn)知也很膚淺。本文用生物信息學(xué)方法,對(duì)M蛋白翻譯后修飾的磷酸化位點(diǎn)、糖基化位點(diǎn)、類泛素化位點(diǎn)、酰胺化位點(diǎn)和豆蔻�；稽c(diǎn),線性motif和domain,B細(xì)胞抗原表位,T細(xì)胞表位,二級(jí)結(jié)構(gòu),亞細(xì)胞分布等進(jìn)行預(yù)測(cè)分析,為今后研究M蛋白的結(jié)構(gòu)和功能提供理論依據(jù)。2、M蛋白多克隆抗體的制備及其B細(xì)胞線性抗原表位分析通過(guò)構(gòu)建NDV M蛋白原核表達(dá)載體,對(duì)M蛋白進(jìn)行體外表達(dá),經(jīng)分離純化后免疫小鼠,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)免疫效果,適時(shí)收集血清制備M蛋白多克隆抗體；同時(shí)利用生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)M蛋白B細(xì)胞線性抗原表位,對(duì)綜合得分較高的寡肽序列進(jìn)行人工合成,偶聯(lián)BSA后免疫動(dòng)物,對(duì)高免血清采用ELISA和Western blot進(jìn)行表位驗(yàn)證。結(jié)論：成功表達(dá)M蛋白,成功制備M蛋白特異性的多克隆抗體,并且確證2個(gè)B細(xì)胞表位。3、穩(wěn)定表達(dá)M蛋白DF-1細(xì)胞構(gòu)建研究中使用PiggyBac轉(zhuǎn)座子系統(tǒng),將M基因隨機(jī)轉(zhuǎn)座到宿主... 

【文章來(lái)源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：130 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 RNA病毒M蛋白生物學(xué)功能研究進(jìn)展
    1 RNA病毒M蛋白概述
    2 RNA病毒M蛋白與病毒裝配和出芽
    3 RNA病毒M蛋白與宿主細(xì)胞的相互作用
    4 NDV M蛋白的結(jié)構(gòu)與功能
    5 小結(jié)與展望
    參考文獻(xiàn)
第二章 M蛋白生物信息學(xué)分析
    摘要
    1 試驗(yàn)方法
    2 結(jié)果及分析
    3 討論
    ABSTRACT
    參考文獻(xiàn)
第三章 M蛋白抗體制備及B細(xì)胞抗原表位分析
    摘要
    1 材料與方法
    2 結(jié)果與分析
    3 討論
    ABSTRACT
    參考文獻(xiàn)
第四章 穩(wěn)定表達(dá)M蛋白DF-1細(xì)胞構(gòu)建
    摘要
    1 材料與方法
    2 結(jié)果與分析
    3 討論
    ABSTRACT
    參考文獻(xiàn)
第五章 M蛋白細(xì)胞定位研究
    摘要
    1 材料與方法
    2 結(jié)果與分析
    3 討論
    ABSTRACT
    參考文獻(xiàn)
第六章 M蛋白對(duì)NDV增殖的影響
    摘要
    1 材料與方法
    2 結(jié)果與分析
    3 討論
    ABSTRACT
    參考文獻(xiàn)
第七章 M蛋白與宿主細(xì)胞相互作用蛋白的捕獲及其蛋白質(zhì)組學(xué)分析
    摘要
    1 材料與方法
    2 結(jié)果與分析
    3 討論
    ABSTRACT
    參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文與學(xué)術(shù)交流情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]新城疫病毒基質(zhì)蛋白與禽細(xì)胞核磷蛋白B23.1在HEK-293T細(xì)胞中的相互作用[J]. 段志強(qiáng),陳堅(jiān),何亮,許海旭,李群輝,胡順林,劉秀梵.  微生物學(xué)報(bào). 2013(07)
[2]新城疫病毒基質(zhì)蛋白第23位苯丙氨酸對(duì)病毒復(fù)制與細(xì)胞致病性的作用[J]. 高海崗,陸建榮,胡增壘,胡嬌,劉曉文,王曉泉,朱杰.  中國(guó)家禽. 2012(09)
[3]水泡口炎病毒基質(zhì)蛋白對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J]. 趙菊梅,劉濤,魏于全,文艷君,吳揚(yáng).  四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2009(02)
[4]新城疫病毒（NDV）基質(zhì)（M）蛋白在體外對(duì)炎癥因子誘導(dǎo)的作用[J]. 王蕾,陳福勇,鄭世軍,索勛.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2008(04)
[5]水泡口炎病毒M蛋白對(duì)小鼠Lewis肺癌LL/2c細(xì)胞增殖與凋亡的影響[J]. 趙菊梅,劉濤,徐健蓉,王國(guó)慶,杜小波,文艷君.  癌癥. 2007(03)



本文編號(hào)：3160495