農(nóng)作物副產(chǎn)品如秸稈等含有很高的纖維素成分,是一種潛在的自然資源,在全球資源危機的今天,利用其大力發(fā)展畜牧業(yè),不僅可以充分利用資源,還能避免因秸稈燃燒對生態(tài)環(huán)境造成的污染。利用纖維素酶分解纖維素是利用纖維素資源的有效手段之一,目前產(chǎn)纖維素酶菌株多分離自反芻動物瘤胃液、堆肥、土壤等,所得降解纖維素能力較強的菌株多為厭氧菌株,由于培養(yǎng)條件嚴(yán)格,在生產(chǎn)中的應(yīng)用得到限制。本研究以竹鼠腸道內(nèi)容物作為微生物來源,從中分離篩選出優(yōu)良的兼性厭氧產(chǎn)纖維素酶菌株,為最大限度開發(fā)利用纖維素資源奠定基礎(chǔ),同時促進新能源、食品、以及畜牧業(yè)等相關(guān)行業(yè)的快速發(fā)展。本研究主要包括以下四部分內(nèi)容：試驗一：通過嚴(yán)格厭氧結(jié)合需氧培養(yǎng),以羧甲基纖維素鈉為唯一碳源對竹鼠腸道內(nèi)容物進行涂布培養(yǎng),初步分離出具有降解纖維素能力的菌株后,結(jié)合剛果紅染色以及酶活測定復(fù)篩出所需目的菌株。試驗結(jié)果顯示,從竹鼠回腸、盲腸、結(jié)腸共得到17株菌株,根據(jù)菌株形態(tài)篩選出7株疑似纖維素降解菌,分別為來自竹鼠回腸的H-1、H-2菌株;盲腸的M-1、M-2、M-3菌株；結(jié)腸的J-1、J-2菌株；結(jié)合剛果紅染色法所得到的透明圈與菌落直徑比,測定其發(fā)酵液酶活后,... 

【文章來源】：廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 纖維素構(gòu)造
        1.1.1 天然纖維素的成分
        1.1.2 纖維素的化學(xué)結(jié)構(gòu)
    1.2 纖維素酶
        1.2.1 纖維素酶的分子結(jié)構(gòu)及作用特征
        1.2.2 纖維素酶的催化機制
        1.2.3 纖維素酶活性的測定
    1.3 纖維素酶的應(yīng)用
        1.3.1 在食品業(yè)上的應(yīng)用
        1.3.2 在畜牧業(yè)上的應(yīng)用
        1.3.3 在洗滌劑工業(yè)中的應(yīng)用
        1.3.4 在紡織工業(yè)上的應(yīng)用
        1.3.5 在能源工業(yè)中的應(yīng)用
    1.4 纖維素降解菌研究概況
    1.5 選育纖維素降解菌的方法
        1.5.1 從環(huán)境中篩選纖維素降解菌株
        1.5.2 誘變育種
        1.5.3 分子生物學(xué)手段構(gòu)建高產(chǎn)纖維素酶菌株
        1.5.4 優(yōu)化菌種的培養(yǎng)條件
    1.6 菌種鑒定方法
        1.6.1 常規(guī)鑒定
        1.6.2 分子生物學(xué)鑒定
    1.7 研究目的與意義
第二章 竹鼠腸道兼性厭氧纖維素菌株的篩選
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要儀器設(shè)備
        2.1.3 培養(yǎng)基配制
        2.1.4 纖維素酶測定試劑配制
        2.1.5 樣品處理
        2.1.6 富集培養(yǎng)
        2.1.7 初篩
        2.1.8 復(fù)篩
        2.1.9 纖維素酶活的測定
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 纖維素降解菌的初篩
        2.2.2 纖維素降解菌的復(fù)篩
    2.3 討論
        2.3.1 兼性纖維素降解菌的篩選方法
        2.3.2 菌株纖維素酶活測定方法的選擇
    2.4 小結(jié)
第三章 竹鼠腸道兼性厭氧纖維素降解菌株的鑒定
    3.1 材料方法
        3.1.1 儀器設(shè)備
        3.1.2 試驗樣品及試劑
    3.2 試驗方法
        3.2.1 菌體形態(tài)觀察
        3.2.2 菌體革蘭氏染色
        3.2.3 需氧性與運動性
        3.2.4 菌株的生理生化實驗
        3.2.5 分子生物學(xué)鑒定
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 菌體形態(tài)學(xué)及革蘭氏染色觀察
        3.3.2 菌株運動性與需氧性
        3.3.3 菌株生理生化特征鑒定
        3.3.4 菌株分子鑒定結(jié)果
    3.4 討論
        3.4.1 細菌基因組DNA的提取
        3.4.2 菌株的鑒定
    3.5 小結(jié)
第四章 竹鼠腸道兼性厭氧纖維素降解菌的產(chǎn)酶性質(zhì)研究
    4.1 試驗材料與方法
        4.1.1 試驗菌株
        4.1.2 儀器設(shè)備
        4.1.3 種子培養(yǎng)基、發(fā)酵培養(yǎng)基
        4.1.4 酶活力測定
        4.1.5 菌株產(chǎn)酶條件的選擇和優(yōu)化
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 發(fā)酵時間對產(chǎn)酶的影響
        4.2.2 碳源對產(chǎn)酶的影響
        4.2.3 氮源對產(chǎn)酶的影響
        4.2.4 初始接種量對產(chǎn)酶的影響
        4.2.5 溫度對產(chǎn)酶的影響
        4.2.6 初始pH值對產(chǎn)酶的影響
    4.3 討論
        4.3.1 影響纖維素酶活力的因素
        4.3.2 產(chǎn)酶條件選擇和優(yōu)化
    4.4 小結(jié)
第五章 結(jié)論
    5.1 實驗結(jié)果
    5.2 創(chuàng)新點
    5.3 問題與不足
    5.4 研究展望
參考文獻
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號：3150568