誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）是體細(xì)胞經(jīng)過重編程而來的一類多能干細(xì)胞。重編程可以通過核移植、過表達(dá)外源性轉(zhuǎn)錄因子、添加小分子等方法誘導(dǎo)啟動。因?yàn)閕PS細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）一樣可以分化成任何類型的體細(xì)胞,而且克服了分離ES細(xì)胞需要破壞胚胎等倫理道德的問題,所以iPS細(xì)胞的研究在再生醫(yī)學(xué)中有著巨大的潛力。雖然已經(jīng)有很多文章報道了提高iPS細(xì)胞誘導(dǎo)效率的方法,但是如何有效的生成統(tǒng)一的高質(zhì)量的iPS細(xì)胞仍然是一個難題。在生理解剖方面,豬比小鼠更接近人類,所以豬已經(jīng)成為重要的人類疾病研究的大動物模型。因此,建立高質(zhì)量的豬iPS細(xì)胞將極大地促進(jìn)干細(xì)胞的研究和治療,并且豬的iPS細(xì)胞可以通過核移植和嵌合體等方法深入驗(yàn)證iPS細(xì)胞的安全性和有效性。本研究的目的是建立高質(zhì)量的豬iPS細(xì)胞,將豬作為動物模型為iPS細(xì)胞的臨床前研究服務(wù)。實(shí)驗(yàn)設(shè)計主要包括四個方面：（1）建立高質(zhì)量的小鼠的iPS細(xì)胞系,并優(yōu)化小鼠iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)方法,為豬iPS細(xì)胞的研究打下基礎(chǔ)。（2）通過優(yōu)化誘導(dǎo)方法,獲得高質(zhì)量的豬的iPS細(xì)胞系。（3）檢驗(yàn)豬iPS細(xì)胞的多能性,包括嵌合體豬的制備。（4）研究豬的iPS細(xì)胞重編程和維持... 

【文章來源】：南開大學(xué)天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：144 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

多能干細(xì)胞的獲得[nsl和基礎(chǔ)的干細(xì)胞多能性通路研究!}7

得到具有生殖系轉(zhuǎn)移的嵌合體豬，對于干細(xì)胞的臨床應(yīng)用有著先驅(qū)的作用（圖1.6)。分化的體細(xì)胞可以通過體細(xì)胞克隆、與胚胎干細(xì)胞融合、iPS等多種方法發(fā)生不同程度的重編程和去分化，其間最主要的重編程事件有多能性的恢復(fù)以及表觀遺傳學(xué)的重編程（如DNA甲基化、X-染色體失活、組蛋白修飾、染色質(zhì)重塑等等）。研究表明，重編程錯誤或者不徹底，會直接影響體細(xì)胞是否能徹底恢復(fù)發(fā)育的多能性，重編程機(jī)制研究的欠缺也會限制iPS細(xì)胞技術(shù)的推廣應(yīng)用(第六章前言詳細(xì)論述）。因此，iPS細(xì)胞在形成過程中的效率、質(zhì)量和機(jī)制都需要深入的研究。了解這些事件，不僅能豐富我們對細(xì)胞分化、去分化機(jī)制的認(rèn)識，也將能促進(jìn)我們對人iPS細(xì)胞安全性、有效性的研究。本研究選擇小鼠和豬作為主要實(shí)驗(yàn)材料，探索iPS細(xì)胞發(fā)生期間的效率、質(zhì)量和體細(xì)胞重編程的規(guī)律和分子機(jī)制，旨在為未來人類再生醫(yī)學(xué)、組織工程和豬畜牧育種等方面積累知識、尋找思路和創(chuàng)建方法。Applications■ Somatic cellsy f Humart disease nnodelsMH Fibroblasts Reprogrammmg Dif^mntiaf^on ^fMl Keratinocytes ^_^_^Patient-s,^f.c ^ , Drug discoveryUU Hepatocytes fPS cells ‘Bl。。d j 冷 Regenerativemedidtie]\圖1.6誘導(dǎo)多能干細(xì)胞未來在臨床上的應(yīng)用[45]第三節(jié)豬iPS細(xì)胞的研究進(jìn)展通過查找和統(tǒng)計，本人整理了有關(guān)誘導(dǎo)并建立豬iPS細(xì)胞系的研究進(jìn)展17篇。作為論文的參考文獻(xiàn)并列表在下面。具體內(nèi)容和比較將在正文中詳細(xì)分析。下圖主要列出了截止到2013年各個實(shí)驗(yàn)室誘導(dǎo)豬的iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)因子組合和培養(yǎng)條件（表1.1)。7

小鼠和豬的iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)和分析同時進(jìn)行，通過對小鼠iPS細(xì)胞的研究，加深對豬的iPS細(xì)胞的研究和理解（圖1.7)。利用小鼠的研究為豬的研究服務(wù)高效建立具有分化發(fā)育多能性的小鼠的iPS技術(shù)路線 建立安全的具有分化發(fā)言多能性的豬的干細(xì)胞系技術(shù)路線、 纖i細(xì)胞 ‘成體成峰舉“),禾涵轉(zhuǎn)錄赫3? ) (‘ 參考人的和小騎干、小鼠的Oc?、SOX2、；、和小分宇組合J \ 細(xì)胞培考、刪不:.j、+, , Klf4^Dc-MyG ：) \ 一、 謹(jǐn)、^ 同的M養(yǎng)條件 ^安全&穩(wěn)定的細(xì)胞系..、) (‘安全的穩(wěn)定的iP細(xì)胞系Z：、.、③令(D ,一—-(■ / 、抬體 (^111' J (,體豬夕》,C'i 編程 65 分子 II 制.....1?導(dǎo);Gt 程 1乂,.丨

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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