沙門氏菌病是由沙門氏菌屬細(xì)菌引起的疾病總稱。目前沙門氏菌病是全球家禽業(yè)面臨的主要威脅。沙門氏菌屬腸桿菌科,革蘭氏陰性菌,家禽感染的沙門氏菌主要分為雞白痢沙門氏菌、雞傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌和鼠傷寒沙門氏菌等。腸炎沙門氏菌的感染不僅與養(yǎng)殖場的發(fā)病率和死亡率相關(guān),甚至?xí)鹑祟惖奈改c炎,每年因此死亡的人數(shù)達(dá)15萬。雞白痢沙門氏菌主要感染3周齡內(nèi)的雛雞,主要臨床癥狀為排白色糞便,嚴(yán)重者可以造成脫水,甚至大規(guī)模死亡,成年雞被感染后雖多為隱性帶病,但會(huì)導(dǎo)致雞場的受精率、產(chǎn)蛋率和孵化率顯著下降,從而給養(yǎng)殖場造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為了解2019年山東省同一時(shí)期內(nèi)9個(gè)種雞場死胚中沙門氏菌的流行情況,研究其耐藥基因、耐藥表型的水平傳遞情況,本研究選擇同一時(shí)期內(nèi)9個(gè)種雞場的18胚齡未出殼死胚（每個(gè)種雞場90枚）用于評估2019年山東省種雞場死胚中沙門氏菌的流行情況及危害預(yù)警。分別無菌采集810枚未出殼死胚的肝、脾和卵黃,混合研磨,進(jìn)行前增菌、增菌和選擇性培養(yǎng)基的鑒別培養(yǎng),疑似菌落純化后再經(jīng)PCR方法以及微生物質(zhì)譜鑒定等方法完成沙門氏菌分離株的鑒定。同時(shí),本研究對所有沙門氏菌分離株進(jìn)行了血清分型、MLST分... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

沙門氏菌形態(tài)結(jié)構(gòu)圖（ManojKumawatetal.,2020）

山東省部分種雞場死胚中沙門氏菌的鑒定及耐藥特性研究30百日雞場死胚中沙門氏菌陽性率次之為51.11%（46/90）。表3-19個(gè)種雞場沙門氏菌的分離情況統(tǒng)計(jì)表Table3-1ThestatisticaltableofSalmonellaisolatesinninefarms編號雞品種陽性率1百日雞51.11%（46/90）2綠殼蛋雞17.78%（16/90）3瑯琊雞26.67%（24/90）4蘆花雞85.56%（77/90）5青腳麻雞0%（0/90）6青腳麻雞15.56%（14/90）7白羽肉雞0%（0/90）8白羽肉雞0%（0/90）9白羽肉雞0%（0/90）3.1.1山東省5個(gè)陽性雞場沙門氏菌的培養(yǎng)特性分離自陽性雞場的沙門氏菌在XLD培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)（如圖2所示），一種表現(xiàn)為黑色，光滑，外周有一圈透明帶的圓形菌落；另一種表現(xiàn)為無色、透明的小菌落。另外沙門氏菌在半固體培養(yǎng)基上的形態(tài)（如圖3所示），一種在半固體培養(yǎng)基上長鞭毛，其他沙門氏菌則會(huì)長出白色的鞭毛，而另外一種在半固體培養(yǎng)基上不長鞭毛。圖2沙門氏菌在XLD培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特性Fig.2SalmonellaintheXLDmedium

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文31圖3沙門氏菌在LB培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特性Fig.3SalmonellaintheLBmedium3.1.2山東省5個(gè)陽性雞場沙門氏菌的PCR鑒定結(jié)果PCR檢測沙門氏菌的invA基因，檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)810個(gè)樣品中，共檢出177個(gè)invA陽性樣品。部分PCR鑒定結(jié)果見圖4。invA結(jié)果顯示為大約331bp的特異性條帶，結(jié)果與目的條帶相符合。結(jié)果表明，種雞場死胚中沙門氏菌陽性率為55.6（5/9），本次死胚中沙門氏菌分離率為21.85%（177/810）。*泳道1-23為疑似沙門氏菌陽性樣本泳道，泳道-為陰性對照，泳道+為陽性對照，M為DL2000DNAMarker*Lane1-23isasuspectedsalmonellapositivesamplelane,lane-isanegativecontrol,lane+isapositivecontrol,MisDL2000DNAMarker圖4沙門氏菌invA基因擴(kuò)增結(jié)果Fig.4PCRamplificationofinvAgene3.1.3山東省5個(gè)陽性雞場沙門氏菌的質(zhì)譜鑒定結(jié)果結(jié)果表明，單菌落的質(zhì)譜鑒定結(jié)果顯示為沙門氏菌，Log(score)=2.198。177株沙門氏菌的質(zhì)譜鑒定結(jié)果與3.1.2中PCR鑒定結(jié)果100%吻合。

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本文編號：3135700