疫苗的使用在馬立克氏�。∕D）的預(yù)防和控制中起到重要作用。但隨著馬立克氏病毒（MDV）毒力不斷的進(jìn)化,現(xiàn)有疫苗已不能提供較好的保護(hù)。雞白細(xì)胞介素2（ChIL-2）是具有廣泛生物活性的細(xì)胞因子,作為免疫增強(qiáng)劑在疫苗的研制中得到廣泛研究。本研究利用MDV血清Ⅰ型毒株CVI988/Rispens為載體,構(gòu)建表達(dá)ChIL-2基因的重組病毒（rMDV-IL2）,評價(jià)其免疫保護(hù)效力及免疫增強(qiáng)作用,為MD及其他疾病的防制提供疫苗儲備。將ChIL-2基因定向克隆至pEASY-M1表達(dá)載體中,通過PCR方法擴(kuò)增出ChIL-2基因的表達(dá)盒,并與實(shí)驗(yàn)室先前構(gòu)建的含有CVI988/Rispens基因組同源臂的pU/D載體相連,構(gòu)建轉(zhuǎn)移載體pU/IL2/D。將pU/IL2/D與含有GFP報(bào)告基因的CVI988/Rispens基因組共轉(zhuǎn)染CEF細(xì)胞,通過篩選、純化獲得重組病毒rMDV-IL2。PCR、Western-Blot和MTT試驗(yàn)及復(fù)制特性檢測結(jié)果顯示,ChIL-2基因正確插入到MDV基因組中并能成功表達(dá)具有生物活性的ChIL-2,且對病毒在體外的復(fù)制特性無顯著影響。對1日齡雛雞分別免疫rMDV-IL2和C... 

【文章來源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
目錄
符號說明
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 馬立克氏病疫苗的研究進(jìn)展
        1.1 MDV的發(fā)現(xiàn)和分型
        1.2 MDV毒力的進(jìn)化
        1.3 MD疫苗的免疫保護(hù)機(jī)制
        1.4 MD疫苗
    2 雞白細(xì)胞介素-2（ChIL-2）的研究進(jìn)展
        2.1 ChIL-2的免疫增強(qiáng)作用
        2.2 ChIL-2的免疫治療作用
第二章 表達(dá)雞白細(xì)胞介素2的重組馬立克病毒的免疫保護(hù)效力及免疫增強(qiáng)作用
    1 材料
        1.1 質(zhì)粒、細(xì)菌、病毒和細(xì)胞
        1.2 雞胚和實(shí)驗(yàn)動物
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器
    2 方法
        2.1 轉(zhuǎn)移載體的構(gòu)建
        2.2 重組病毒的構(gòu)建
        2.3 rMDV-IL2對雞免疫系統(tǒng)的影響
        2.4 rMDV-IL2的免疫效力試驗(yàn)
        2.5 rMDV-IL2對新城疫La Sota疫苗的免疫增強(qiáng)作用
        2.6 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 轉(zhuǎn)移載體的構(gòu)建
        3.2 重組病毒的挑選與純化
        3.3 rMDV-IL2的鑒定
+、CD8⁺T淋巴細(xì)胞比例的影響">        3.4 rMDV-IL2對雞外周血中CD4⁺、CD8⁺T淋巴細(xì)胞比例的影響
        3.5 rMDV-IL2免疫后對雞免疫器官指數(shù)的影響
        3.6 MDV超強(qiáng)毒株RBIB感染雞后的病理學(xué)觀察
        3.7 rMDV-IL2的免疫保護(hù)效力
        3.8 rMDV-IL2對新城疫La Sota疫苗免疫后抗體滴度的影響
    4 討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3135148