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豬流行性腹瀉病毒變異株(CH/YNKM-8/2013)的分離鑒定和全基因組序列分析

發(fā)布時(shí)間:2021-04-12 05:38
  為研究豬流行性腹瀉病毒(PEDV)變異株特性,通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞病變(CPE)觀察、RT-PCR、間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)和透射電鏡觀察分離鑒定1株P(guān)EDV變異株(CH/YNKM-8/2013株)并分析了全基因組序列。運(yùn)用基因組分段擴(kuò)增方法,測(cè)得該毒株的全基因組序列(GenBank登錄號(hào)為KF761675.1)。該毒株S基因N端比CV777毒株S基因的N端長(zhǎng)9bp,包括15bp的插入和6bp的缺失,表明CH/YNKM-8/2013為變異毒株。同源性分析顯示,該毒株的基因組序列與我國(guó)廣東2011年分離毒株LC的同源關(guān)系最近,相似性為99.6%,與韓國(guó)毒株KNU-1305和美國(guó)毒株USA/Minnesota84/2013的序列相似性均為99.0%,而與CV777疫苗毒株的相似性較低,為96.7%。序列進(jìn)化樹(shù)分析表明該毒株和我國(guó)新近毒株、韓國(guó)及美國(guó)的變異毒株進(jìn)化關(guān)系較近,而與我國(guó)之前流行的PEDV毒株以及疫苗毒株CV777處于不同分支。 

【文章來(lái)源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016,35(04)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 病料的來(lái)源和處理
    1.2 細(xì)胞、菌株和主要試劑
    1.3 病毒分離
    1.4 病毒的鑒定
    1.5 全基因組測(cè)序和序列分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 病毒的分離
    2.2 病毒的鑒定
    2.3 全基因組的序列
    2.4 全基因組和S基因的同源性分析
    2.5 全基因組和全S基因的進(jìn)化樹(shù)分析
    2.6 CH/YNKM-8/2013毒株、CV777毒株和其他參考毒株全基因組和全S基因組序列突變位點(diǎn)分析
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬圓環(huán)病毒2型的分離鑒定及優(yōu)化培養(yǎng)[J]. 嚴(yán)偉東,李文潔,李文濤,汪洋,陳煥春,何啟蓋.  養(yǎng)豬. 2012(04)
[2]豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬A群輪狀病毒多重RT-PCR檢測(cè)方法的建立及臨床應(yīng)用[J]. 張坤,何啟蓋.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(08)
[3]豬流行性腹瀉病毒LJB/03株的分離及膜蛋白基因的原核表達(dá)[J]. 吳凌,李一經(jīng).  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(10)
[4]豬流行性腹瀉弱毒株的培育[J]. 佟有恩,馮力,李偉杰,王明,馬思奇.  中國(guó)畜禽傳染病. 1998(06)
[5]豬流行性腹瀉病毒適應(yīng)Vero細(xì)胞培養(yǎng)及以傳代細(xì)胞毒制備氫氧化鋁滅活疫苗免疫效力試驗(yàn)[J]. 馬思奇,王明,周金法,馮力.  中國(guó)畜禽傳染病. 1994(02)
[6]應(yīng)用豬胎腸單層細(xì)胞培養(yǎng)豬流行性腹瀉病毒的研究[J]. 宣華,邢德坤,王殿瀛,朱維正,趙鳳玉,鞏懷俊,費(fèi)思閣.  獸醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 1984(03)



本文編號(hào):3132727

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