生長(zhǎng)激素對(duì)原代雞肝細(xì)胞差異表達(dá)基因的轉(zhuǎn)錄組分析
發(fā)布時(shí)間：2021-04-11 08:29
生長(zhǎng)激素（GH）可通過調(diào)節(jié)動(dòng)物體內(nèi)三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝而影響動(dòng)物體的生長(zhǎng)發(fā)育，自GH被發(fā)現(xiàn)之后人們對(duì)GH的研究越來越多，其中關(guān)于在動(dòng)物體內(nèi)受GH調(diào)控的基因一直以來都是人們研究的重點(diǎn)。近年來，隨著二代測(cè)序技術(shù)的發(fā)展成熟，人們將其應(yīng)用于生物學(xué)研究的各個(gè)方面，其中轉(zhuǎn)錄組測(cè)序由于在研究基因表達(dá)情況等方面發(fā)揮著重要作用而引起了人們的重視。本研究使用改良型的兩步膠原酶灌流法成功在四周齡AA白羽肉雞中分離出了高活性的肝臟原代細(xì)胞，使用William’s E進(jìn)行培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好。在成功分離出雞原代肝細(xì)胞后我們使用雞生長(zhǎng)激素（cGH）對(duì)其進(jìn)行處理，發(fā)現(xiàn)GH處理雞原代肝細(xì)胞的最佳時(shí)間是1224h。同時(shí)對(duì)經(jīng)GH處理不同時(shí)間后雞原代肝細(xì)胞內(nèi)相關(guān)基因的表達(dá)情況進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)在SOCS家族中的SOCS-2、3、4和CIS的表達(dá)量在GH處理后有顯著上升，而所研究的幾個(gè)HNF家族成員的表達(dá)量在GH處理后并沒有發(fā)生顯著變化。我們采用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的方法來進(jìn)一步系統(tǒng)研究GH處理后雞原代肝細(xì)胞中基因的表達(dá)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在GH處理組和對(duì)照組中共有164個(gè)差異表達(dá)基因。通過生物信息學(xué)分析表明差異基因...
【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省
【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
GH引起的信號(hào)通路[43]
胞核發(fā)揮著重要作用，后來隨著研究的不斷深入人們發(fā)現(xiàn)除了酪氨酸外其它一些氨基酸的磷酸化對(duì)Stats調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄也起到至關(guān)重要的作用，如Stat1和3的Ser727、Stat5a的Ser725、799和Stat5b的Ser730、710、193等[47, 49-51]。除了磷酸化外還有其它一些蛋白修飾形式也對(duì)Stats轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能最大化起作用，如Stats蛋白N-端精氨酸(Arg)的甲基化可通過阻斷Stats蛋白與PIAS蛋白的作用而增加轉(zhuǎn)錄效率，同時(shí)乙�；部梢栽黾愚D(zhuǎn)錄效率等[44, 52, 53]。
生長(zhǎng)中起重要作用。另外，GH刺激下在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮重要作用的因子IGF含量也受到JAK-Stat5的調(diào)控。在機(jī)體內(nèi)JAK-Stats信號(hào)通路是受到嚴(yán)格的以免引起機(jī)體紊亂。有研究表明，持續(xù)激活的Stat5a和Stat5b可通過PPAR牛血清 (fetal calf serum，F(xiàn)BS)的情況下促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化[59]。在體-Stat5的負(fù)向調(diào)控主要是反饋抑制型的，即在細(xì)胞因子的刺激下促進(jìn)某種達(dá)，而這種蛋白反過來又可以抑制信號(hào)通路，其中典型的例子就是SOC，SOCS家族成員可通過使JAKs失活、阻礙Stats接近受體結(jié)合位點(diǎn)以及使蛋白被蛋白酶體降解等多種途徑來抑制信號(hào)通路[60-62]。近期又發(fā)現(xiàn)另外成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21 (fibroblast growth factor，F(xiàn)GF21)也可通過反饋調(diào)來抑制JAK-Stats信號(hào)通路[63]。另外還有以下幾種途徑可以負(fù)向調(diào)控JAK通路：依賴于蛋白酪氨酸磷酸酶 (protein tyrosine phosphatase，PTP)的抑依賴于活化Stats蛋白抑制因子的抑制途徑、依賴于泛素-蛋白酶體的蛋白和依賴于絲氨酸去磷酸化的抑制途徑等[64]。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]動(dòng)物GH/IGF-Ⅰ軸調(diào)控機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 顧志良,王慧娟,郁建鋒. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2011(10)
[2]實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)綜述[J]. 鄧文星,張映. 生物技術(shù)通報(bào). 2007(05)
[3]雞生長(zhǎng)激素cDNA的克隆分析[J]. 李寧,邢寶東,戴茹娟,馮繼東. 中國(guó)家禽. 1997(01)
本文編號(hào)：3130923
【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省
【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
GH引起的信號(hào)通路[43]
胞核發(fā)揮著重要作用，后來隨著研究的不斷深入人們發(fā)現(xiàn)除了酪氨酸外其它一些氨基酸的磷酸化對(duì)Stats調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄也起到至關(guān)重要的作用，如Stat1和3的Ser727、Stat5a的Ser725、799和Stat5b的Ser730、710、193等[47, 49-51]。除了磷酸化外還有其它一些蛋白修飾形式也對(duì)Stats轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能最大化起作用，如Stats蛋白N-端精氨酸(Arg)的甲基化可通過阻斷Stats蛋白與PIAS蛋白的作用而增加轉(zhuǎn)錄效率，同時(shí)乙�；部梢栽黾愚D(zhuǎn)錄效率等[44, 52, 53]。
生長(zhǎng)中起重要作用。另外，GH刺激下在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮重要作用的因子IGF含量也受到JAK-Stat5的調(diào)控。在機(jī)體內(nèi)JAK-Stats信號(hào)通路是受到嚴(yán)格的以免引起機(jī)體紊亂。有研究表明，持續(xù)激活的Stat5a和Stat5b可通過PPAR牛血清 (fetal calf serum，F(xiàn)BS)的情況下促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化[59]。在體-Stat5的負(fù)向調(diào)控主要是反饋抑制型的，即在細(xì)胞因子的刺激下促進(jìn)某種達(dá)，而這種蛋白反過來又可以抑制信號(hào)通路，其中典型的例子就是SOC，SOCS家族成員可通過使JAKs失活、阻礙Stats接近受體結(jié)合位點(diǎn)以及使蛋白被蛋白酶體降解等多種途徑來抑制信號(hào)通路[60-62]。近期又發(fā)現(xiàn)另外成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21 (fibroblast growth factor，F(xiàn)GF21)也可通過反饋調(diào)來抑制JAK-Stats信號(hào)通路[63]。另外還有以下幾種途徑可以負(fù)向調(diào)控JAK通路：依賴于蛋白酪氨酸磷酸酶 (protein tyrosine phosphatase，PTP)的抑依賴于活化Stats蛋白抑制因子的抑制途徑、依賴于泛素-蛋白酶體的蛋白和依賴于絲氨酸去磷酸化的抑制途徑等[64]。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]動(dòng)物GH/IGF-Ⅰ軸調(diào)控機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 顧志良,王慧娟,郁建鋒. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2011(10)
[2]實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)綜述[J]. 鄧文星,張映. 生物技術(shù)通報(bào). 2007(05)
[3]雞生長(zhǎng)激素cDNA的克隆分析[J]. 李寧,邢寶東,戴茹娟,馮繼東. 中國(guó)家禽. 1997(01)
本文編號(hào)：3130923
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