H9N2亞型禽流感病毒的分離及其HA基因的遺傳變異分析
發(fā)布時間:2021-04-09 15:46
H9N2亞型禽流感在全世界廣泛流行,給養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。該亞型最初只在禽類中傳播,后來人們發(fā)現(xiàn)它也可以直接感染哺乳動物,具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。本研究通過對H9N2亞型禽流感病毒的分離、HA基因的克隆及遺傳變異分析,以了解近年來H9N2亞型禽流感病毒的變異規(guī)律,主要獲得以下成果:1、從河南洛陽、陜西咸陽地區(qū)的養(yǎng)殖場,臨床疑似禽流感發(fā)病的雞群中采集病料,通過雞胚接種傳代,血凝試驗和RT-PCR鑒定的方法,先后分離到5株H9N2亞型禽流感病毒,分別命名為LY35、LY36、LY48、LY49、XY。2、參照GenBank中收錄的HA基因序列,合成兩對引物,采用RT-PCR法擴增LY36、XY株H9N2亞型禽流感病毒的HA基因,經(jīng)克隆測序后,進行序列拼接,獲得這兩株病毒的全長HA基因序列并上傳到Genbank,登陸號分別為KF638574、KF638575。3、運用DNAStar軟件將LY36、XY株H9N2亞型禽流感病毒的HA基因序列與Genbank收錄的參考毒株進行比對分析,并用MEGA6軟件繪制系統(tǒng)進化樹。結(jié)果表明,LY36、XY株H9N2亞型禽流感病毒的核苷酸同源性為97...
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:47 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
AIV結(jié)構(gòu)圖(引自Leeetal,2009)
保護遺傳物質(zhì)防止 RNA 酶的降解。M1 蛋白形成基質(zhì)膜,緊層膜內(nèi)側(cè),不僅用來保護核衣殼,也用來支撐和維持病毒的外觀形態(tài)。病種放射性的纖突:棒狀三聚體血凝素 HA 和蘑菇型四聚體神經(jīng)氨酸酶 NA蛋白具有型特異性。其結(jié)構(gòu)如圖 1-1 所示。禽流感病毒的復(fù)制流感病毒的復(fù)制和大多數(shù)的病毒一樣,都是經(jīng)過吸附和穿入、脫殼、裝配幾個步驟,其過程如圖 1-2 所示。
(2)LY36:洛陽市肉雞,40 日齡,7000 只,2013 年 1 月發(fā)病。發(fā)病第 5 天,每天死亡 30~50 只;大腸桿菌,支原體并發(fā);未注射過流感疫苗;腺胃乳頭出血;出血有黏液,初步診斷可能存在流感感染。(3)LY48:洛陽市白羽蛋雞,360 日齡,2000 只,2013 年 1 月發(fā)病。發(fā)病第 4 均每天死亡 4~9 只;最近 3 個月內(nèi),未過注射流感疫苗。剖檢可見腺胃有典型的出,輸卵管內(nèi)有膿樣分泌物,初步診斷為禽流感。(4)LY49:洛陽市蛋雞,70 日齡,約 1000 只,2013 年 1 月發(fā)病。每天死亡數(shù) 10 只發(fā)展為 40 只,越來越多,周邊也出現(xiàn)此情況,病情日益嚴重,不斷擴散。病神沉郁,剖檢可見腺胃出血,初步診斷為禽流感。(5)XY:咸陽蛋雞,35 日齡,約 15 000 只,18 日齡開始發(fā)病,每天死亡 40。病雞精神差,呼吸困難;剖檢可見肝臟腫大,有紅色壞死點,個別呈青銅色;氣濁,有黃色干酪物;包心;氣管環(huán)有出血,略有黃白色黏液,個別雞腺胃有出血點藥情況:18 日齡時:百益康,清瘟敗毒散,死亡略有下降;32 日齡時使用環(huán)丙沙杏石甘散,黃芪多糖,荊防敗毒散,效果不大;35 日齡時用氟苯尼考,抗病毒藥,連未見效果,初步診斷為病毒感染。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]青海湖地區(qū)5株H9N2亞型禽流感病毒全基因組序列進化分析[J]. 劉琳玉,姜雙應(yīng),汪立杰,易虎,趙生倉,唐志堅,徐翠玲,董婕,高榮保,張燁,鄒淑梅,李曉丹,楊磊,楊靜,陳濤,舒躍龍. 病毒學(xué)報. 2014(02)
[2]兩廣地區(qū)2011-2012年H9N2亞型禽流感病毒的HA基因進化分析[J]. 李廣偉,嚴專強,廖昌韜,薛瑜,冀君,陳峰,馬靜云,畢英佐,謝青梅. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2014(03)
[3]10株H9N2亞型禽流感病毒血凝素基因的序列分析[J]. 劉彥云,劉春國,王壽山,張超林,王偉,呂讓,劉明. 中國畜牧獸醫(yī). 2013(08)
[4]H9N2亞型禽流感流行分析及疫苗毒株的篩選[J]. 劉東,宮曉,劉曉東,梁俊超,師東方. 中國動物檢疫. 2013(06)
[5]山東地區(qū)16株H9N2亞型禽流感病毒HA基因的序列分析[J]. 武利利,刁有祥,鞠小軍,于春梅,崔京騰. 病毒學(xué)報. 2012(03)
[6]H9N2亞型禽流感病毒基因組的遺傳進化分析[J]. 李樹純,李心海,仲書官,孫化露,潘金金,陳素娟,彭大新,劉秀梵. 病毒學(xué)報. 2012(01)
[7]Preparation of Anti-Idiotypic Antibody against Avian Influenza Virus Subtype H9[J]. Baoquan Li~1 Jun Peng~1 Zhongxiang Niu~(1,2) Xunhe Yin~1 Faxiao Liu~1 ~1College of Animal Science and Technology,Shandong Agricultural University,Tai’an,China;. Cellular & Molecular Immunology. 2005(02)
[8]全球禽流感的流行形勢[J]. 甘孟侯. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2004(06)
[9]禽流感病毒分子生物學(xué)研究進展[J]. 金元昌,李景鵬,張龍,孫岳,于敏,楊甲芳. 動物醫(yī)學(xué)進展. 2003(01)
[10]我國禽流感防制研究進展[J]. 于康震,付朝陽,崔尚金,步志高,唐秀英. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2001(01)
碩士論文
[1]廣西馬源H9N2亞型流感病毒的分離鑒定與全基因組序列分析[D]. 何奇松.廣西大學(xué) 2012
本文編號:3127890
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:47 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
AIV結(jié)構(gòu)圖(引自Leeetal,2009)
保護遺傳物質(zhì)防止 RNA 酶的降解。M1 蛋白形成基質(zhì)膜,緊層膜內(nèi)側(cè),不僅用來保護核衣殼,也用來支撐和維持病毒的外觀形態(tài)。病種放射性的纖突:棒狀三聚體血凝素 HA 和蘑菇型四聚體神經(jīng)氨酸酶 NA蛋白具有型特異性。其結(jié)構(gòu)如圖 1-1 所示。禽流感病毒的復(fù)制流感病毒的復(fù)制和大多數(shù)的病毒一樣,都是經(jīng)過吸附和穿入、脫殼、裝配幾個步驟,其過程如圖 1-2 所示。
(2)LY36:洛陽市肉雞,40 日齡,7000 只,2013 年 1 月發(fā)病。發(fā)病第 5 天,每天死亡 30~50 只;大腸桿菌,支原體并發(fā);未注射過流感疫苗;腺胃乳頭出血;出血有黏液,初步診斷可能存在流感感染。(3)LY48:洛陽市白羽蛋雞,360 日齡,2000 只,2013 年 1 月發(fā)病。發(fā)病第 4 均每天死亡 4~9 只;最近 3 個月內(nèi),未過注射流感疫苗。剖檢可見腺胃有典型的出,輸卵管內(nèi)有膿樣分泌物,初步診斷為禽流感。(4)LY49:洛陽市蛋雞,70 日齡,約 1000 只,2013 年 1 月發(fā)病。每天死亡數(shù) 10 只發(fā)展為 40 只,越來越多,周邊也出現(xiàn)此情況,病情日益嚴重,不斷擴散。病神沉郁,剖檢可見腺胃出血,初步診斷為禽流感。(5)XY:咸陽蛋雞,35 日齡,約 15 000 只,18 日齡開始發(fā)病,每天死亡 40。病雞精神差,呼吸困難;剖檢可見肝臟腫大,有紅色壞死點,個別呈青銅色;氣濁,有黃色干酪物;包心;氣管環(huán)有出血,略有黃白色黏液,個別雞腺胃有出血點藥情況:18 日齡時:百益康,清瘟敗毒散,死亡略有下降;32 日齡時使用環(huán)丙沙杏石甘散,黃芪多糖,荊防敗毒散,效果不大;35 日齡時用氟苯尼考,抗病毒藥,連未見效果,初步診斷為病毒感染。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]青海湖地區(qū)5株H9N2亞型禽流感病毒全基因組序列進化分析[J]. 劉琳玉,姜雙應(yīng),汪立杰,易虎,趙生倉,唐志堅,徐翠玲,董婕,高榮保,張燁,鄒淑梅,李曉丹,楊磊,楊靜,陳濤,舒躍龍. 病毒學(xué)報. 2014(02)
[2]兩廣地區(qū)2011-2012年H9N2亞型禽流感病毒的HA基因進化分析[J]. 李廣偉,嚴專強,廖昌韜,薛瑜,冀君,陳峰,馬靜云,畢英佐,謝青梅. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2014(03)
[3]10株H9N2亞型禽流感病毒血凝素基因的序列分析[J]. 劉彥云,劉春國,王壽山,張超林,王偉,呂讓,劉明. 中國畜牧獸醫(yī). 2013(08)
[4]H9N2亞型禽流感流行分析及疫苗毒株的篩選[J]. 劉東,宮曉,劉曉東,梁俊超,師東方. 中國動物檢疫. 2013(06)
[5]山東地區(qū)16株H9N2亞型禽流感病毒HA基因的序列分析[J]. 武利利,刁有祥,鞠小軍,于春梅,崔京騰. 病毒學(xué)報. 2012(03)
[6]H9N2亞型禽流感病毒基因組的遺傳進化分析[J]. 李樹純,李心海,仲書官,孫化露,潘金金,陳素娟,彭大新,劉秀梵. 病毒學(xué)報. 2012(01)
[7]Preparation of Anti-Idiotypic Antibody against Avian Influenza Virus Subtype H9[J]. Baoquan Li~1 Jun Peng~1 Zhongxiang Niu~(1,2) Xunhe Yin~1 Faxiao Liu~1 ~1College of Animal Science and Technology,Shandong Agricultural University,Tai’an,China;. Cellular & Molecular Immunology. 2005(02)
[8]全球禽流感的流行形勢[J]. 甘孟侯. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2004(06)
[9]禽流感病毒分子生物學(xué)研究進展[J]. 金元昌,李景鵬,張龍,孫岳,于敏,楊甲芳. 動物醫(yī)學(xué)進展. 2003(01)
[10]我國禽流感防制研究進展[J]. 于康震,付朝陽,崔尚金,步志高,唐秀英. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2001(01)
碩士論文
[1]廣西馬源H9N2亞型流感病毒的分離鑒定與全基因組序列分析[D]. 何奇松.廣西大學(xué) 2012
本文編號:3127890
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