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熱應(yīng)激對小鼠C2C12成肌細胞硒蛋白表達的影響及硒源緩解熱應(yīng)激的機制研究

發(fā)布時間:2021-04-08 21:02
  本研究擬以小鼠肌肉C2C12細胞系為研究材料,構(gòu)建骨骼肌細胞熱應(yīng)激模型,通過兩個試驗:1)考察熱應(yīng)激對小鼠肌肉C2C12細胞分化的影響,并考察在此過程中硒蛋白表達的變化;2)比較兩種不同硒源對小鼠肌肉C2C12熱應(yīng)激的緩解效應(yīng)并探索其可能機制。主要內(nèi)容及結(jié)果如下:實驗一:熱應(yīng)激對小鼠C2C12成肌細胞分化及硒蛋白表達的影響。選擇小鼠C2C12成肌細胞作為試驗材料,構(gòu)建肌肉細胞熱應(yīng)激模型,考察熱應(yīng)激對小鼠C2C12成肌細胞分化的影響,同時考察硒蛋白表達的變化。采用單因子試驗設(shè)計:C2C12細胞首先于37 oC二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)23 d至鋪板率達到80%;然后分成2組進行成肌分化誘導(dǎo):對照組于37.0 oC培養(yǎng)4、6、8 d;熱應(yīng)激組于41.5oC培養(yǎng)4、6、8 d,采用定量PCR技術(shù)考察24個硒蛋白基因、2個分化相關(guān)基因、2個能量調(diào)控基因和2個凋亡基因表達,采用Western-blot考察了HSP70、MYOGENIN蛋白及5個硒蛋白的表達。研究結(jié)果表明:(1)熱應(yīng)激抑制了C2C12細胞分化和損傷了... 

【文章來源】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

熱應(yīng)激對小鼠C2C12成肌細胞硒蛋白表達的影響及硒源緩解熱應(yīng)激的機制研究


2C12細胞分化模式圖

技術(shù)路線圖


技術(shù)路線圖

熱應(yīng)激,C2C12細胞,顯微鏡觀察


圖 3 顯微鏡觀察熱應(yīng)激對 C2C12 細胞分化的影響Fig.3 Microscope inspection of the myogenic differentiated C2C12 cells subject to HS.4.2 熱應(yīng)激對熱休克蛋白 70 及分化相關(guān)基因表達的影響熱應(yīng)激抑制成肌細胞 C2C12 分化為肌管,這可能是改變了分化相關(guān)基因表達所引起?疾炝藷釕(yīng)激對 HSP70 和 4 個分化相關(guān)基因(AMPKα1、AMPKα2、MYOD、MYOGENIN)在 C2C12 細胞分化各個階段的影響,結(jié)果見圖 4。由圖中可見熱應(yīng)激顯著上調(diào)了(P<0.01)C2C12 細胞 HSP70 mRNA 表達,下調(diào)了(P<0.01)C2C12 細胞 MYOD 和 MYOGENIN mRNA 表達量。AMPKα1 和 AMPKα2顯示出 3 種表達模式:在熱應(yīng)激處理 4 d AMPKα1 和 AMPKα2 mRNA 表達顯著(P < 0.05 or 0.01)上調(diào);在熱應(yīng)激處理 6 d 表達無差異(P > 0.05);而在熱應(yīng)激處理 8 d AMPKα2 mRNA 表達顯著(P < 0.05)下調(diào)。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]黑龍江省土壤硒分布及其影響因素研究[J]. 遲鳳琴,徐強,匡恩俊,張久明,魏丹,宿慶瑞,韓錦澤.  土壤學(xué)報. 2016(05)
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[3]有機硒、無機硒、VE單獨使用及有機硒與VE聯(lián)用對大鼠體內(nèi)抗氧化能力的影響[J]. 姚昭,李紅艷,張云龍,鄧澤元.  食品科學(xué). 2013(15)
[4]宰前熱應(yīng)激對肉雞胸肉氧化損傷和蛋白質(zhì)功能特性的影響[J]. 潘曉建,彭增起,周光宏,于紀(jì)棉,鮑恩東.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(06)
[5]不同硒源對肥育豬鮮肉肉色和滴水損失的影響[J]. 占秀安,許梓榮.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2004(05)

碩士論文
[1]熱應(yīng)激對豬腸道IPEC-J2細胞硒蛋白表達的影響及不同硒源緩解熱應(yīng)激機制的研究[D]. 曹蕾.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]日糧硒缺乏對肉雞硒蛋白基因及胰島素信號相關(guān)基因表達的影響[D]. 許敬洋.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]硒蛋白K對T淋巴細胞免疫應(yīng)答影響的研究[D]. 李瑞敏.深圳大學(xué) 2015
[4]超營養(yǎng)劑量硒對肉雞硒蛋白基因及胰島素信號相關(guān)基因表達的影響[D]. 黃曉鳳.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[5]富硒益生菌對高溫條件下仔豬生產(chǎn)性能、抗氧化能力和腸道菌群的影響[D]. 呂晨輝.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[6]母種豬補充不同硒源對后代乳豬生長性能的影響及作用機理的探討[D]. 李星.浙江大學(xué) 2009
[7]有機硒和維生素E對地方雜交雞抗氧化和抗熱應(yīng)激性能的影響[D]. 劉風(fēng)民.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004



本文編號:3126270

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