奶牛的乳腺組織具有合成及分泌乳汁的特殊功能，而這一功能是由乳腺上皮細(xì)胞來完成的，上皮細(xì)胞的數(shù)量及其分泌活性直接影響到奶牛的產(chǎn)奶量。奶牛的乳腺組織具有重塑的功能，伴隨著泌乳周期周而復(fù)始的變化，不斷的進行退化和重塑。如果在乳腺組織重塑的過程中，能夠使具有泌乳功能的上皮細(xì)胞的數(shù)量在有限的空間內(nèi)增加更多，活性更強，那么對乳產(chǎn)量具有重要的意義。有研究證明成年小鼠乳腺中含有對Wnt蛋白敏感的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群中含有豐富的乳腺干細(xì)胞，并證實了Wnt3a蛋白對乳腺干細(xì)胞集落的形成有明顯的促進作用，維持了其形成功能性腺體的功能。推測，Wnt通路的激活可以促進奶牛乳腺上皮細(xì)胞的增殖。本實驗以健康奶牛乳腺組織為原材料，組織塊培養(yǎng)方法進行細(xì)胞培養(yǎng)，用倒置顯微鏡對培養(yǎng)的細(xì)胞進行觀察。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，組織塊培養(yǎng)至3-4天有成纖維細(xì)胞長出，6天左右有鵝卵石樣和鋪路石樣上皮細(xì)胞長出，細(xì)胞核大而明顯，有2至4個核仁，細(xì)胞間隔緊密。細(xì)胞培養(yǎng)液中β-酪蛋白提取方法的改進。因所培養(yǎng)的細(xì)胞為原代單層貼壁細(xì)胞，細(xì)胞數(shù)量有限，故培養(yǎng)液中上皮細(xì)胞分泌物的量很少，不易檢測。本實驗中采用了四種蛋白提取方法對細(xì)胞培養(yǎng)液中的β-酪蛋白進行提取，并... 

【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

奶牛乳腺上皮細(xì)胞Fig.1bovinemammaryepithelialcellsa.培養(yǎng)至4d，成纖維細(xì)胞（裸箭頭）長出，細(xì)胞間隙較大；b.7d時成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞

河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位（畢業(yè)）論文-酪蛋白的提取及鑒定western-blot 鑒定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在接近 25KD小為 24kDa，表明細(xì)胞培養(yǎng)液中卻有 β-酪這些上皮細(xì)胞具有正常分泌乳汁的功能袋濃縮法提取出 β-酪蛋白，冷凍干燥法，而采用調(diào)節(jié)溫度和 pH 方法得到的提可初步確定，通過采用溫度結(jié)合 β-酪蛋更好。

圖 3 細(xì)胞生長曲線Fig.3 Growth curve of BMEC牛乳腺上皮細(xì)胞活性的影響 Western-blot 結(jié)果用 ImageJ 軟件進行分析，合可以看出第一組和第二組 β-酪蛋白的量無而第四組 β-酪蛋白的量明顯多于其他組的量活性無顯著影響；25ng/mLWnt3a 蛋白刺激乳；而 50ng/mL 的 Wnt3a 蛋白作用于細(xì)胞，使

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[3]日本血吸蟲Frizzled家族受體的克隆、表達及其生物學(xué)功能分析[D]. 王孝波.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010
[4]Wnt通路關(guān)鍵基因在絨山羊絨毛生長一個周期中的表達研究[D]. 劉維.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
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本文編號：3123434