SMYD3（SET and MYND domain-containing protein3）是一種 H3K4 甲基化轉(zhuǎn)移酶,屬于SMYD的家族成員。據(jù)報道,過表達SMYD3基因可促進牛體細胞重編程,提高牛胎兒成纖維細胞誘導形成iPSCs的效率。為探究SMYD3基因在豬體細胞重編程過程中的作用,本研究采用RNA干擾（RNAi）和過表達等技術(shù)方法,通過調(diào)控德保豬耳成纖維細胞SMYD3基因的表達,探討其在豬體細胞核移植過程中的重編程作用,為提高豬體細胞克隆的效率奠定基礎(chǔ)。一、豬SMYD3基因表達載體構(gòu)建及其shRNA干擾效率驗證1.豬SMYD3基因編碼區(qū)序列克隆與pLVX-IRES-Zsgreen1 SMYD3真核表達載體構(gòu)建�？寺〉呢iSMYD3基因片段為1404 bp,經(jīng)生物信息學分析發(fā)現(xiàn)其與豬SMYD3基因同源性為99%,與羊、牛SMYD3基因的同源性均為93%。細胞轉(zhuǎn)染試驗結(jié)果顯示,構(gòu)建的SMYD3基因表達載體能在293T細胞中表達。2.根據(jù)文獻報道的其他物種SMYD3基因siRNA和shRNA序列,經(jīng)同源比對分析,獲得兩條豬SMYD3基因shRNA序列,分別構(gòu)建pSicoR-GFP-... 

【文章來源】：廣西大學廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１慢病毒載體ｐＳｉｃｏＲ－ＧＦＰ結(jié)構(gòu)圖??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｍａｐ?ｏｆ?ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ?ｖｅｃｔｏｒ?ｐＳｉｃｏＲ－ＧＦＰ??

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【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]SMYD3在牛著床前胚胎發(fā)育及胎兒成纖維細胞生長中作用的研究[D]. 白海棟.內(nèi)蒙古大學 2015
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碩士論文
[1]水牛SUV39H1基因shRNA片段的篩選及對外源轉(zhuǎn)基因表達效率的影響[D]. 林浪.廣西大學 2013
[2]SMYD3在牛卵母細胞體外成熟過程中表達及功能的研究[D]. 李燕.內(nèi)蒙古大學 2009



本文編號：3121978