H5N1亞型流感病毒是高致病性禽流感病毒。它可以感染多種禽類,并且能夠由禽類直接傳染給人類,對養(yǎng)殖業(yè)以及人類的健康構成巨大的威脅。流感病毒自身包含的遺傳信息很少,是一種嚴格的細胞寄生物。其與宿主之間的相互作用構成了病毒感染、復制、致病及免疫的分子基礎。由于流感病毒是囊膜病毒,在它的整個感染過程中,病毒與宿主細胞膜融合、內(nèi)吞以及組裝與出芽等進程,都必須依賴宿主細胞膜才能夠完成。于是開展對流感病毒感染相關宿主膜蛋白的鑒定這一研究意義重大。因此,本研究以H5N1亞型高致病性禽流感病毒感染前后A549細胞膜蛋白作為研究對象。希望通過膜蛋白質(zhì)組學的方法,鑒定與H5N1流感病毒感染以及宿主應答密切相關的膜蛋白,并對鑒定到的蛋白做進一步的功能研究,揭示流感病毒的致病機理,此外,還期望可以發(fā)現(xiàn)來源于宿主系統(tǒng)的抗病毒藥靶或診斷標志物,為病毒病的預防和診斷治療開辟新的研究方向。主要研究內(nèi)容如下:1.H5N1流感病毒感染相關宿主膜蛋白的鑒定鑒于膜蛋白在流感病毒感染的過程中發(fā)揮著至關重要的作用,本研究以細胞膜蛋白為研究對象,利用雙向電泳技術對流感病毒感染以及模擬感染后6、12、24h的A549細胞膜蛋白進行分... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：150 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１：?Ａ型流感病毒及其基因組的模式圖（Ｋｒｕｇ?ａｎｄ?Ａｒａｍｉｎｉ．，２００９）

毒的入侵、ｖＲＮＰｓ入核、病毒基因組的轉(zhuǎn)錄和復制、ｖＲＮＰｓ的核輸出以及組裝和出??芽這些方面來對流感病毒是如何侵入宿主細胞，在宿主體內(nèi)完成復制，又是怎樣脫??離細胞的作詳細的描述（圖１－２）。??？－?§?一?卿丨?伽＜？？?＝」?ｔ—：?ｒ＊??圖１－２流感病毒的生命周期示意圖（引自ＧａＵｕｓＲｅａｃｔｏｍｅ資源庫）。??Ｆｉｇ．?１－２：?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｉｎｆｌｕｅｎｚａ?ｖｉｍｓ?ｌｉｆｅ?ｃｙｃｌｅ?（Ｆｒｏｍ?Ｇａｌｌｕｓ?Ｒｅａｃｔｏｍｅ?ｄａｔａｂａｓｅ）．??１．２．１流感病毒侵入??在流感病毒侵入宿主細胞的過程中，ＨＡ蛋白發(fā)揮著重要的作用。在流感病毒??囊膜上有大量的釘子狀的ＨＡ三聚體，可以識別宿主細胞表面的唾液酸受體，并與??之結合（Ｓｋｅｈｅｌ?ａｎｄ?Ｗｉｌｅｙ?ｅｔ?ａｌ．，２０００）。ＨＡ前體ＨＡ０的切割是膜融合的前提。ＨＡ０??切割形成ＨＡ１和ＨＡ２蛋白，通過二硫鍵連接在一起。ＨＡ１上面含有受體結合區(qū)域，??ＨＡ２?上面含有融合肽（Ｋｌｅｎｋｅｔａｌ．，?１９９４；Ｈｕａｎｇｅｔａｌ．，２００３）（圖?１－３）。ＨＡ?通過識別??唾液酸ａ－２，３Ｇａｌ和唾液酸ｏｃ－２，６Ｇａｌ來與受體相結合。唾液酸ａ－２，３Ｇａｌ受體和唾液酸??ａ－２，６Ｇａｌ受體決定流感病毒的宿主特異性。人流感病毒識別的是唾液酸ａ－２，６Ｇａｌ受??體

圖１－４：流感病毒侵入細胞時ＨＡ蛋白構象改變的模型（Ｈｕａｎｇ?ｅｔａｌ．，２００３）。Ａ、ＨＡ蛋白構象改??變的模型。Ｂ、ＨＡ的結構圖示。Ｃ、ＨＡ的三維重構影像。??Ｆｉｇ．?１－４：?Ｍｏｄｅｌ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｃｏｎｆｏｎｎａｔｉｏｎａｌ?ｃｈａｎｇｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＨＡ?ｗｈｅｎ?ｉｎｆｌｕｅｎｚａ?ｖｉｍｓ?ｉｎｖａｄｅ?ｉｎｔｏ?ｈｏｓｔ?ｃｅｌｌｓ??（Ｈｕａｎｇ?ｅｔ?ａｌ．，?２００３）．?Ａ．?Ｍｏｄｅｌ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｃｏｎｆｏｍｉａｔｉｏｎａｌ?ｃｈａｎｇｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＨＡ．?Ｂ．?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＨＡ．?Ｃ．?３Ｄ??ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃｒｙｏＥＭ?ｉｍａｇｅｓ?ｆｒｏｍ?ＨＡ．??７??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]神秘莫測的禽流感病毒[J]. 任藝.  首都醫(yī)藥. 2009(09)
[2]Structure and Function of the NS1 Protein of Influenza A Virus[J]. Dongzi LIN~1 Jingfang LAN~2 Zhizhen ZHANG~1* 1 Department of Biochemistry and Molecular Biology,Guangdong Medical College,Zhanjiang 524023,China;2 Department of Clinical Laboratory,Hejin People’s Hospital,Hejin 043300,China.  Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2007(03)



本文編號：3120430