重組人乳鐵蛋白奶粉對(duì)仔豬免疫應(yīng)答和骨形成的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-04-02 10:54
乳鐵蛋白(lactoferrin,LF)的分子量是80kDa,它是一種鐵結(jié)合性的糖蛋白,是轉(zhuǎn)鐵家族成員之一,具有調(diào)節(jié)免疫、鐵離子平衡、調(diào)節(jié)腸道菌群、骨形成以及抗菌、抗氧化、抗炎、抗病毒和抗腫瘤等多種生物學(xué)功能。LF作為功能性食品、保健品和藥品具有廣闊的應(yīng)用和開發(fā)前景。LF主要由中性粒細(xì)胞和外分泌腺的上皮細(xì)胞分泌,其含量在人類母乳中為1-5mg/mL,而在嬰兒奶粉中只有0.02-0.2mg/mL.本實(shí)驗(yàn)室利用含有人LF基因的BAC成功獲得了能夠生產(chǎn)重組人乳鐵蛋白(rhLF)的轉(zhuǎn)基因克隆奶牛,乳中rhLF的表達(dá)量高達(dá)3.4g/L。而該hLF對(duì)嬰兒免疫和骨發(fā)育的影響尚不清楚。本研究以新生仔豬作為嬰兒的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)?zāi)P?研究含有該rhLF的奶粉對(duì)新生兒免疫應(yīng)答和骨形成的影響及作用機(jī)制。將18頭出生7天的長白公豬分為3組進(jìn)行rhLF轉(zhuǎn)基因奶粉30天飼喂實(shí)驗(yàn),OM組飼喂普通奶粉作為對(duì)照,MM組飼喂普通奶粉和rhLF奶粉1:1混合的奶粉,LFM組飼喂rhLF奶粉。飼喂過程中每天觀察記錄自然條件下仔豬發(fā)生腹瀉的情況。飼喂實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)仔豬進(jìn)行宰殺,采集各種樣品進(jìn)行后續(xù)分析,包括仔豬是否出現(xiàn)過敏反應(yīng)、免疫應(yīng)答...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:121 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞
第一章 引言
1.1 乳鐵蛋白的理化性質(zhì)
1.1.1 LF基因的表達(dá)調(diào)控
1.1.2 LF的結(jié)構(gòu)
1.1.3 LF的肽段
1.1.4 LF的穩(wěn)定性
1.1.5 LF分子結(jié)合性質(zhì)
1.2 乳鐵蛋白的生物學(xué)功能
1.2.1 抗菌活性
1.2.2 抗病毒活性
1.2.3 抗真菌活性
1.2.4 抗寄生蟲活性
1.2.5 抗腫瘤活性
1.2.6 促進(jìn)鐵吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)
1.2.7 調(diào)節(jié)腸道菌群
1.2.8 抗過敏
1.2.9 阻斷自由基
1.3 乳鐵蛋白在胃腸道中的存在形式
1.4 乳鐵蛋白對(duì)免疫系統(tǒng)的影響
1.4.1 免疫系統(tǒng)
1.4.2 免疫調(diào)節(jié)活性
1.4.3 LF對(duì)固有免疫的影響
1.4.4 LF對(duì)細(xì)胞免疫的影響
1.4.5 LF對(duì)體液免疫的影響
1.4.6 LF影響免疫的可能機(jī)理
1.5 乳鐵蛋白對(duì)骨生長發(fā)育的影響
1.5.1 骨生長的生理演化
1.5.2 影響骨骼發(fā)育的因素
1.5.3 骨代謝疾病
1.5.4 LF對(duì)成骨細(xì)胞的作用
1.5.5 LF對(duì)破骨細(xì)胞的作用
1.5.6 LF促進(jìn)骨生長
1.6 乳鐵蛋白發(fā)揮生物活性的機(jī)制
1.7 乳鐵蛋白作為疾病的生物標(biāo)記
1.8 乳鐵蛋白的其他作用
1.9 乳鐵蛋白的應(yīng)用情況
1.9.1 LF在食品保健品中的應(yīng)用
1.9.2 LF在醫(yī)藥衛(wèi)生中的應(yīng)用
1.9.3 LF在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用
1.10 人乳鐵蛋白轉(zhuǎn)基因的研究進(jìn)展
1.10.1 LF基因在真菌中的表達(dá)
1.10.2 LF基因在植物及動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá)
1.10.3 LF基因在動(dòng)物乳腺中的表達(dá)
1.11 本實(shí)驗(yàn)室關(guān)于乳鐵蛋白的研究工作
1.12 本研究的目的、意義及方案
1.12.1 研究目的及意義
1.12.2 研究方案
第二章 材料和方法
2.1 主要儀器設(shè)備與試劑、溶液的配制
2.1.1 主要儀器設(shè)備
2.1.2 工具酶及主要試劑
2.1.3 主要藥品及試劑的配制
2.1.4 分析工具軟件
2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
2.2.2 飼養(yǎng)管理
2.2.3 體重測定
2.2.4 腹瀉監(jiān)測
2.2.5 樣品采集和血常規(guī)測定
2.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.3.1 勻漿液制備
2.3.2 免疫球蛋白、組胺和細(xì)胞因子表達(dá)分析
2.3.3 腸絨毛形態(tài)分析
2.3.4 免疫和過敏相關(guān)基因mRNA表達(dá)分析
2.3.5 成骨細(xì)胞培養(yǎng)
2.3.6 血清鈣測定
2.3.7 骨密度分析
2.3.8 骨生物力學(xué)分析
2.3.9 成骨細(xì)胞增殖MTT分析
2.3.10 成骨細(xì)胞分化堿性磷酸酶活性測定
2.3.11 ERK1/2磷酸化分析
2.4 統(tǒng)計(jì)分析
第三章 結(jié)果與分析
3.1 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬日增重的影響
3.2 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬腹瀉的影響
3.3 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬血常規(guī)的影響
3.4 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬過敏反應(yīng)的影響
3.5 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬體液免疫應(yīng)答的影響
3.6 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬細(xì)胞免疫應(yīng)答的影響
3.7 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬腸道組織形態(tài)的影響
3.8 重組人乳鐵蛋白影響仔豬免疫力的機(jī)制探討
3.9 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬血清鈣水平的影響
3.10 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬骨密度和骨礦鹽含量的影響
3.11 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬骨強(qiáng)度的影響
3.12 重組人乳鐵蛋白對(duì)成骨細(xì)胞增殖的影響
3.13 重組人乳鐵蛋白對(duì)成骨細(xì)胞分化的影響
3.14 重組人乳鐵蛋白對(duì)成骨細(xì)胞ERK1/2磷酸化的影響
第四章 討論與展望
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Inhibition of tryptase release from human colon mast cells by protease inhibitors[J]. Shao-Heng He Hua Xie,Allergy and Inflammation Research Institute,Shantou University Medical College,Shantou 515031,Guangdong Province,ChinaShao-Heng He,Immunopharmacology Group,University of Southampton,Southampton,UK. World Journal of Gastroenterology. 2004(03)
[2]Non-invasive investigation of inflammatory bowel disease[J]. JA Tibble,IBjarnason. World Journal of Gastroenterology. 2001(04)
本文編號(hào):3115145
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:121 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞
第一章 引言
1.1 乳鐵蛋白的理化性質(zhì)
1.1.1 LF基因的表達(dá)調(diào)控
1.1.2 LF的結(jié)構(gòu)
1.1.3 LF的肽段
1.1.4 LF的穩(wěn)定性
1.1.5 LF分子結(jié)合性質(zhì)
1.2 乳鐵蛋白的生物學(xué)功能
1.2.1 抗菌活性
1.2.2 抗病毒活性
1.2.3 抗真菌活性
1.2.4 抗寄生蟲活性
1.2.5 抗腫瘤活性
1.2.6 促進(jìn)鐵吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)
1.2.7 調(diào)節(jié)腸道菌群
1.2.8 抗過敏
1.2.9 阻斷自由基
1.3 乳鐵蛋白在胃腸道中的存在形式
1.4 乳鐵蛋白對(duì)免疫系統(tǒng)的影響
1.4.1 免疫系統(tǒng)
1.4.2 免疫調(diào)節(jié)活性
1.4.3 LF對(duì)固有免疫的影響
1.4.4 LF對(duì)細(xì)胞免疫的影響
1.4.5 LF對(duì)體液免疫的影響
1.4.6 LF影響免疫的可能機(jī)理
1.5 乳鐵蛋白對(duì)骨生長發(fā)育的影響
1.5.1 骨生長的生理演化
1.5.2 影響骨骼發(fā)育的因素
1.5.3 骨代謝疾病
1.5.4 LF對(duì)成骨細(xì)胞的作用
1.5.5 LF對(duì)破骨細(xì)胞的作用
1.5.6 LF促進(jìn)骨生長
1.6 乳鐵蛋白發(fā)揮生物活性的機(jī)制
1.7 乳鐵蛋白作為疾病的生物標(biāo)記
1.8 乳鐵蛋白的其他作用
1.9 乳鐵蛋白的應(yīng)用情況
1.9.1 LF在食品保健品中的應(yīng)用
1.9.2 LF在醫(yī)藥衛(wèi)生中的應(yīng)用
1.9.3 LF在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用
1.10 人乳鐵蛋白轉(zhuǎn)基因的研究進(jìn)展
1.10.1 LF基因在真菌中的表達(dá)
1.10.2 LF基因在植物及動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá)
1.10.3 LF基因在動(dòng)物乳腺中的表達(dá)
1.11 本實(shí)驗(yàn)室關(guān)于乳鐵蛋白的研究工作
1.12 本研究的目的、意義及方案
1.12.1 研究目的及意義
1.12.2 研究方案
第二章 材料和方法
2.1 主要儀器設(shè)備與試劑、溶液的配制
2.1.1 主要儀器設(shè)備
2.1.2 工具酶及主要試劑
2.1.3 主要藥品及試劑的配制
2.1.4 分析工具軟件
2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
2.2.2 飼養(yǎng)管理
2.2.3 體重測定
2.2.4 腹瀉監(jiān)測
2.2.5 樣品采集和血常規(guī)測定
2.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.3.1 勻漿液制備
2.3.2 免疫球蛋白、組胺和細(xì)胞因子表達(dá)分析
2.3.3 腸絨毛形態(tài)分析
2.3.4 免疫和過敏相關(guān)基因mRNA表達(dá)分析
2.3.5 成骨細(xì)胞培養(yǎng)
2.3.6 血清鈣測定
2.3.7 骨密度分析
2.3.8 骨生物力學(xué)分析
2.3.9 成骨細(xì)胞增殖MTT分析
2.3.10 成骨細(xì)胞分化堿性磷酸酶活性測定
2.3.11 ERK1/2磷酸化分析
2.4 統(tǒng)計(jì)分析
第三章 結(jié)果與分析
3.1 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬日增重的影響
3.2 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬腹瀉的影響
3.3 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬血常規(guī)的影響
3.4 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬過敏反應(yīng)的影響
3.5 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬體液免疫應(yīng)答的影響
3.6 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬細(xì)胞免疫應(yīng)答的影響
3.7 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬腸道組織形態(tài)的影響
3.8 重組人乳鐵蛋白影響仔豬免疫力的機(jī)制探討
3.9 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬血清鈣水平的影響
3.10 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬骨密度和骨礦鹽含量的影響
3.11 重組人乳鐵蛋白對(duì)仔豬骨強(qiáng)度的影響
3.12 重組人乳鐵蛋白對(duì)成骨細(xì)胞增殖的影響
3.13 重組人乳鐵蛋白對(duì)成骨細(xì)胞分化的影響
3.14 重組人乳鐵蛋白對(duì)成骨細(xì)胞ERK1/2磷酸化的影響
第四章 討論與展望
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Inhibition of tryptase release from human colon mast cells by protease inhibitors[J]. Shao-Heng He Hua Xie,Allergy and Inflammation Research Institute,Shantou University Medical College,Shantou 515031,Guangdong Province,ChinaShao-Heng He,Immunopharmacology Group,University of Southampton,Southampton,UK. World Journal of Gastroenterology. 2004(03)
[2]Non-invasive investigation of inflammatory bowel disease[J]. JA Tibble,IBjarnason. World Journal of Gastroenterology. 2001(04)
本文編號(hào):3115145
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