雞傳染性支氣管炎（Infectious bronchitis, IB）是由冠狀病毒雞傳染性支氣管炎病毒（Infectious bronchitis virus, IBV）引起的一種急性高度接觸傳染性呼吸道疾病,給養(yǎng)禽業(yè)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。IBV是典型的嗜黏膜病原,主要通過呼吸道黏膜途徑感染機(jī)體。黏膜免疫可誘導(dǎo)局部黏膜免疫和誘導(dǎo)全身免疫,在抗IBV感染免疫應(yīng)答中發(fā)揮非常重要的作用。禽類的氣管黏膜和哈德氏腺是黏膜免疫系統(tǒng)的重要組成部分,因此研究IBV感染對氣管黏膜和哈德氏腺免疫功能的影響非常重要。本研究采用IBV廣西分離株GX-YL5人工感染免疫雞和非免疫雞,應(yīng)用實時熒光定量RT-PCR方法檢測不同時相氣管黏膜和哈德氏腺中與天然免疫相關(guān)的部分模式識別受體（TLR2、TLR3、TLR6和TLR7）和細(xì)胞因子（IFN-α、IFN-β、Mx、IL-6、 IL-10、IL-1β、MMP3、MIP-1β、CXCR4和CCR6）的mRNA轉(zhuǎn)錄水平與IBV病毒載量動態(tài),同時使用ELISA檢測氣管黏膜和哈德氏腺分泌型免疫球蛋白A （sIgA）和血清IgG抗體,旨在從分子水平探究IBV對雞氣管黏膜和哈德氏腺... 

【文章來源】：廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 雞傳染性支氣管炎病毒天然免疫研究概況
        1.1.1 傳染性支氣管炎病毒
        1.1.2 天然免疫
        1.1.3 IBV感染的天然免疫應(yīng)答研究進(jìn)展
    1.2 家禽黏膜免疫
        1.2.1 家禽呼吸道黏膜免疫
        1.2.2 家禽的哈德氏腺
        1.2.3 雞分泌型免疫球蛋白A
            1.2.3.1 雞分泌型免疫球蛋白A的結(jié)構(gòu)
            1.2.3.2 slgA的功能
            1.2.3.3 slgA介導(dǎo)的黏膜免疫
    1.3 實時熒光定量PCR
        1.3.1 實時熒光定量PCR原理
        1.3.2 實時熒光定量PCR定量方法
        1.3.3 實時熒光定量PCR的應(yīng)用
            1.3.3.1 定性分析
            1.3.3.2 病毒感染的定量監(jiān)測
            1.3.3.3 基因mRNA表達(dá)量分析
    1.4 本課題的研究目的和意義
第二章 IBV GX-YL5感染對雞氣管黏膜和哈德氏腺TLR2、TLR3、TLR6和TLR7 mRNA轉(zhuǎn)錄水平的影響
    摘要
    2.1 材料
        2.1.1 實驗動物和病毒
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 動物分組和攻毒
        2.2.2 實驗動物樣品的采集和處理
        2.2.3 RNA的抽提
        2.2.4 RNA質(zhì)量和濃度檢測
        2.2.5 反轉(zhuǎn)錄
        2.2.6 Real-time PCR反應(yīng)
        2.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 臨床癥狀和剖檢病理變化
        2.3.2 RNA質(zhì)量和濃度檢測結(jié)果
        2.3.3 氣管黏膜和哈德氏腺TLR2、TLR3、TLR6和TLR7mRNA轉(zhuǎn)錄水平
    2.4 小結(jié)與討論
第三章 IBV GX-YL5感染對雞氣管黏膜和哈德氏腺部分細(xì)胞因子mRNA轉(zhuǎn)錄水平的影響
    摘要
    3.1 材料
        3.1.1 實驗動物和病毒
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器
    3.2 方法
        3.2.1 動物實驗
        3.2.2 實驗動物樣品的采集和處理
        3.2.3 RNA的抽提
        3.2.4 RNA質(zhì)量和濃度檢測
        3.2.5 反轉(zhuǎn)錄
        3.2.6 Real-time PCR反應(yīng)
        3.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 氣管黏膜和哈德氏腺細(xì)胞因子mRNA轉(zhuǎn)錄水平
    3.4 小結(jié)與討論
第四章 IBV GX-YL5感染雞后不同時相氣管黏膜和哈德氏腺IBV載量的變化動態(tài)
    摘要
    4.1 材料
        4.1.1 實驗動物和病毒
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要儀器
    4.2 方法
        4.2.1 動物實驗
        4.2.2 實驗動物樣品的采集和處理
        4.2.3 RNA的抽提
        4.2.4 RNA質(zhì)量和濃度檢測
        4.2.5 反轉(zhuǎn)錄
        4.2.6 Real-time PCR反應(yīng)
        4.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 IBV感染雞后氣管黏膜和哈德氏腺病毒載量變化情況
    4.4 小結(jié)與討論
第五章 IBV GX-YL5感染雞后不同時相氣管洗液與哈德氏腺sIgA抗體和血清IgG抗體變化情況
    摘要
    5.1 材料
        5.1.1 實驗動物和病毒
        5.1.2 主要試劑及配制
        5.1.3 主要儀器
    5.2 方法
        5.2.1 動物實驗
        5.2.2 實驗動物樣品的采集和處理
        5.2.3 sIgA抗體的檢測
        5.2.4 血清IgG抗體的檢測
        5.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 攻毒后不同時相氣管洗液sIgA濃度
        5.3.2 攻毒后不同時相哈德氏腺sIgA濃度
        5.3.3 攻毒后不同時相血清IgG抗體水平
    5.4 小結(jié)與討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
個人簡歷
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況及參加科研項目



本文編號：3108741