豬脾轉(zhuǎn)移因子的制備及其檢測(cè)方法的建立
發(fā)布時(shí)間:2021-03-25 07:37
本試驗(yàn)以健康豬脾臟為原料,分別采用常規(guī)的透析法與超濾法各生產(chǎn)3批轉(zhuǎn)移因子。通過(guò)對(duì)豬脾TF主要成分多肽與核糖含量的檢測(cè)及其實(shí)際生產(chǎn)情況的評(píng)估,比較這兩種工藝的優(yōu)劣,選擇出最適合實(shí)際情況的生產(chǎn)工藝。本試驗(yàn)制訂了超濾法生產(chǎn)豬脾TF的檢驗(yàn)規(guī)程,用于保證豬脾轉(zhuǎn)移因子的質(zhì)量,規(guī)范生產(chǎn)過(guò)程。首先,建立了相關(guān)的原料藥標(biāo)準(zhǔn),豬脾TF外觀呈淡黃色,澄清透明,有特殊的腥味。pH值為6.5。重金屬、砷鹽、氯化物的檢測(cè)結(jié)果顯示各組TF供試品的顏色均比標(biāo)準(zhǔn)品淺,證明含量在控制范圍內(nèi)。蛋白質(zhì)檢測(cè)呈陰性。超濾法生產(chǎn)的豬脾TF多肽的含量為8.53mg/ml以上,核糖的含量為218.34μg/ml以上。經(jīng)紫外光譜分析,豬脾TF在波長(zhǎng)250-260nm處有峰值,大分子物質(zhì)所占比例小于0.5%,游離氨基酸含量大于4mg/ml。對(duì)豬脾TF進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè)、過(guò)敏反應(yīng)檢測(cè)、安全性檢測(cè)、熱源檢驗(yàn),結(jié)果均無(wú)異常。在E-玫瑰花環(huán)試驗(yàn)中,豬脾TF能使花環(huán)的數(shù)量與形成率都顯著提高。細(xì)胞吞噬功能試驗(yàn)中,豬脾TF能顯著提高巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)與吞噬率。通過(guò)豬脾轉(zhuǎn)移因子原液及各層析組分阻斷小鼠免疫抑制模型的試驗(yàn),結(jié)果表明TF原液與各組分對(duì)免疫抑制小鼠的...
【文章來(lái)源】:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)江西省
【文章頁(yè)數(shù)】:36 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 佐劑的發(fā)展歷程
1.1 佐劑的研究進(jìn)程
1.2 佐劑的類型
1.3 佐劑的作用方式
1.4 佐劑作用機(jī)理:
1.5 佐劑研究的新趨向
2 轉(zhuǎn)移因子的發(fā)現(xiàn)及研究現(xiàn)狀
2.1 TF 的分類
2.2 TF 的理化特性
2.3 TF 的制備方法
2.4 TF 質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)
3 TF 的功能
4 TF 的作用機(jī)制
5 TF的生物學(xué)特性研究
5.1 TF 是非抗原物質(zhì)
5.2 TF 的特異性與非特異性
6 TF 在臨床上的應(yīng)用
6.1 TF 在人醫(yī)臨的應(yīng)用
6.1.1 呼吸道疾病
6.1.2 皮膚病
6.1.3 惡性腫瘤
6.1.4 其他疾病
6.2 TF 在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用
6.2.1 TF 在家畜疾病防治上的應(yīng)用
6.2.2 TF 在家禽疾病防治上的應(yīng)用
6.2.3 TF 在寵物疾病防治上的應(yīng)用
7 研究的目的和意義
第二章 豬脾轉(zhuǎn)移因子的制備及檢測(cè)方法的建立
1.材料與方法
1.1 原材料
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
1.3 主要藥物與試劑
1.4 主要試驗(yàn)儀器
2.豬脾轉(zhuǎn)移因子的制備
2.1 方法的篩選
2.1.1 凍融透析法
2.1.2 常規(guī)超濾法
2.1.3 改良超濾法
3.豬脾轉(zhuǎn)移因子質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的建立
3.1 制定豬脾轉(zhuǎn)移因子的原料藥標(biāo)準(zhǔn)
3.1.1 性狀
3.1.2 一般雜質(zhì)檢查
3.1.3 氯化物的檢測(cè)
3.1.4 蛋白質(zhì)的檢測(cè)
3.2 豬脾轉(zhuǎn)移因子生物學(xué)特性檢測(cè)
3.2.1 無(wú)菌檢測(cè)
3.2.2 過(guò)敏反應(yīng)檢測(cè)
3.2.3 安全性檢測(cè)
3.2.4 熱源檢驗(yàn)
3.3 對(duì) TF 的主要成分含量的測(cè)定
3.3.1 多肽含量的測(cè)定
3.3.2 核糖含量的測(cè)定
3.4 轉(zhuǎn)移因子分子量和氨基酸含量的檢測(cè)
3.4.1 轉(zhuǎn)移因子分子量的檢測(cè)
3.4.2 轉(zhuǎn)移因子氨基酸的檢測(cè)
3.4.3 轉(zhuǎn)移因子層析分離
3.5 轉(zhuǎn)移因子活性的測(cè)定
3.5.1 E-玫瑰花環(huán)試驗(yàn)
3.5.2 小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能試驗(yàn)
3.5.3 豬脾轉(zhuǎn)移因子阻斷小鼠免疫模型的試驗(yàn)
4.結(jié)果與分析
4.1 擬定為原料藥標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)結(jié)果
4.1.1 性狀
4.1.2 一般雜質(zhì)
4.1.3 蛋白質(zhì)檢測(cè)
4.2 TF 主要成分的測(cè)定結(jié)果
4.2.1 改良超濾法的產(chǎn)品含量測(cè)定結(jié)果
4.2.2 超濾法生產(chǎn)的 TF 分子量和氨基酸的檢測(cè)結(jié)果
4.3 生物學(xué)檢測(cè)結(jié)果
4.4 體內(nèi)外活性檢測(cè)結(jié)果
4.4.1 小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能試驗(yàn)
4.4.2 E-玫瑰花環(huán)試驗(yàn)
4.4.3 豬脾轉(zhuǎn)移因子阻斷小鼠免疫模型的試驗(yàn)
5.討論
6.小結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)移因子治療小兒反復(fù)呼吸道感染療效分析[J]. 鄭君英. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2013(04)
[2]豬脾轉(zhuǎn)移因子的制備及臨床應(yīng)用[J]. 喬宏興,白靜. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2011(07)
[3]雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合癥油乳劑滅活疫苗的免疫效力及保護(hù)試驗(yàn)[J]. 蘭信海,馮永勝. 山東畜牧獸醫(yī). 2010(07)
[4]利用轉(zhuǎn)移因子提高豬瘟免疫效果的研究[J]. 劉雁,李堅(jiān),袁明龍,朱偉明. 上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2009(06)
[5]豬脾轉(zhuǎn)移因子(TF)的生物活性及臨床療效研究[J]. 劉進(jìn)輝,周建華,劉湘新,楊丹丹,譚妍. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志. 2007(06)
[6]雞和豬脾轉(zhuǎn)移因子活性組分的提取及免疫活性研究[J]. 凌紅麗,陸承平,王宏華,郭占軍,郭艷萍,孫海新,王雷. 畜牧與獸醫(yī). 2007(04)
[7]疫苗免疫佐劑及其研究進(jìn)展[J]. 臧力銘,胡松華. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2004(03)
[8]轉(zhuǎn)移因子在動(dòng)物醫(yī)學(xué)上的研究進(jìn)展[J]. 何理平. 湖北畜牧獸醫(yī). 2003(06)
[9]轉(zhuǎn)移因子對(duì)雞傳染性喉氣管炎滅活疫苗作用的研究[J]. 黃建文,何維明,姜艷芬,馬秋明,劉璐,朱旭東. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2003(01)
[10]動(dòng)物轉(zhuǎn)移因子研究與在畜禽疫病防治中de應(yīng)用[J]. 喬彥良. 中國(guó)禽業(yè)導(dǎo)刊. 2002(23)
本文編號(hào):3099316
【文章來(lái)源】:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)江西省
【文章頁(yè)數(shù)】:36 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 佐劑的發(fā)展歷程
1.1 佐劑的研究進(jìn)程
1.2 佐劑的類型
1.3 佐劑的作用方式
1.4 佐劑作用機(jī)理:
1.5 佐劑研究的新趨向
2 轉(zhuǎn)移因子的發(fā)現(xiàn)及研究現(xiàn)狀
2.1 TF 的分類
2.2 TF 的理化特性
2.3 TF 的制備方法
2.4 TF 質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)
3 TF 的功能
4 TF 的作用機(jī)制
5 TF的生物學(xué)特性研究
5.1 TF 是非抗原物質(zhì)
5.2 TF 的特異性與非特異性
6 TF 在臨床上的應(yīng)用
6.1 TF 在人醫(yī)臨的應(yīng)用
6.1.1 呼吸道疾病
6.1.2 皮膚病
6.1.3 惡性腫瘤
6.1.4 其他疾病
6.2 TF 在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用
6.2.1 TF 在家畜疾病防治上的應(yīng)用
6.2.2 TF 在家禽疾病防治上的應(yīng)用
6.2.3 TF 在寵物疾病防治上的應(yīng)用
7 研究的目的和意義
第二章 豬脾轉(zhuǎn)移因子的制備及檢測(cè)方法的建立
1.材料與方法
1.1 原材料
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
1.3 主要藥物與試劑
1.4 主要試驗(yàn)儀器
2.豬脾轉(zhuǎn)移因子的制備
2.1 方法的篩選
2.1.1 凍融透析法
2.1.2 常規(guī)超濾法
2.1.3 改良超濾法
3.豬脾轉(zhuǎn)移因子質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的建立
3.1 制定豬脾轉(zhuǎn)移因子的原料藥標(biāo)準(zhǔn)
3.1.1 性狀
3.1.2 一般雜質(zhì)檢查
3.1.3 氯化物的檢測(cè)
3.1.4 蛋白質(zhì)的檢測(cè)
3.2 豬脾轉(zhuǎn)移因子生物學(xué)特性檢測(cè)
3.2.1 無(wú)菌檢測(cè)
3.2.2 過(guò)敏反應(yīng)檢測(cè)
3.2.3 安全性檢測(cè)
3.2.4 熱源檢驗(yàn)
3.3 對(duì) TF 的主要成分含量的測(cè)定
3.3.1 多肽含量的測(cè)定
3.3.2 核糖含量的測(cè)定
3.4 轉(zhuǎn)移因子分子量和氨基酸含量的檢測(cè)
3.4.1 轉(zhuǎn)移因子分子量的檢測(cè)
3.4.2 轉(zhuǎn)移因子氨基酸的檢測(cè)
3.4.3 轉(zhuǎn)移因子層析分離
3.5 轉(zhuǎn)移因子活性的測(cè)定
3.5.1 E-玫瑰花環(huán)試驗(yàn)
3.5.2 小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能試驗(yàn)
3.5.3 豬脾轉(zhuǎn)移因子阻斷小鼠免疫模型的試驗(yàn)
4.結(jié)果與分析
4.1 擬定為原料藥標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)結(jié)果
4.1.1 性狀
4.1.2 一般雜質(zhì)
4.1.3 蛋白質(zhì)檢測(cè)
4.2 TF 主要成分的測(cè)定結(jié)果
4.2.1 改良超濾法的產(chǎn)品含量測(cè)定結(jié)果
4.2.2 超濾法生產(chǎn)的 TF 分子量和氨基酸的檢測(cè)結(jié)果
4.3 生物學(xué)檢測(cè)結(jié)果
4.4 體內(nèi)外活性檢測(cè)結(jié)果
4.4.1 小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能試驗(yàn)
4.4.2 E-玫瑰花環(huán)試驗(yàn)
4.4.3 豬脾轉(zhuǎn)移因子阻斷小鼠免疫模型的試驗(yàn)
5.討論
6.小結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)移因子治療小兒反復(fù)呼吸道感染療效分析[J]. 鄭君英. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2013(04)
[2]豬脾轉(zhuǎn)移因子的制備及臨床應(yīng)用[J]. 喬宏興,白靜. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2011(07)
[3]雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合癥油乳劑滅活疫苗的免疫效力及保護(hù)試驗(yàn)[J]. 蘭信海,馮永勝. 山東畜牧獸醫(yī). 2010(07)
[4]利用轉(zhuǎn)移因子提高豬瘟免疫效果的研究[J]. 劉雁,李堅(jiān),袁明龍,朱偉明. 上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2009(06)
[5]豬脾轉(zhuǎn)移因子(TF)的生物活性及臨床療效研究[J]. 劉進(jìn)輝,周建華,劉湘新,楊丹丹,譚妍. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志. 2007(06)
[6]雞和豬脾轉(zhuǎn)移因子活性組分的提取及免疫活性研究[J]. 凌紅麗,陸承平,王宏華,郭占軍,郭艷萍,孫海新,王雷. 畜牧與獸醫(yī). 2007(04)
[7]疫苗免疫佐劑及其研究進(jìn)展[J]. 臧力銘,胡松華. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2004(03)
[8]轉(zhuǎn)移因子在動(dòng)物醫(yī)學(xué)上的研究進(jìn)展[J]. 何理平. 湖北畜牧獸醫(yī). 2003(06)
[9]轉(zhuǎn)移因子對(duì)雞傳染性喉氣管炎滅活疫苗作用的研究[J]. 黃建文,何維明,姜艷芬,馬秋明,劉璐,朱旭東. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2003(01)
[10]動(dòng)物轉(zhuǎn)移因子研究與在畜禽疫病防治中de應(yīng)用[J]. 喬彥良. 中國(guó)禽業(yè)導(dǎo)刊. 2002(23)
本文編號(hào):3099316
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