腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase, AMPIC）是細胞發(fā)育過程中的重要調控因子。FOXO3作為AMPK重要的下游分子,廣泛參與細胞增殖、凋亡、分化、代謝等過程。然而,AMPK/FOXO3通路對鴨肌肉發(fā)育調控還未見相關研究,為了探討腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK/FOXO3）信號通路在鴨成肌細胞凋亡與分化中的調控作用。首先,我們分別利用地塞米松和2%孕馬血清誘導鴨成肌細胞凋亡和分化,檢測AMPK和F0X03的表達量,然后,改變AMPK/FOXO3通路活性并檢測細胞活性和周期以及相關標志基因表達量。1.分別用不同濃度的AMPK抑制劑（0.25μM、0.5μM、1μM、）和激活劑（0.5mM、1 mM、1.5 mM）處理成肌細胞,CCK-8和qRT-PCR結果顯示0.5μM和1mM分別為抑制劑和激活劑的最佳處理濃度。鴨成肌細胞轉染pEGFP-N1-FOXO3真核表達載體12、24、36、48h后檢測FOX03的表達量,與對照組（Control和pEGFP-N1組）相比,在24小時鴨FOXO3的表達量顯著上升。2.高濃度（1000ng/mL、10000... 

【文章來源】：四川農業(yè)大學四川省 211工程院校

【文章頁數】：63 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－１－２－２不同濃度ＡＩＣＡ民處理后尸和八）爪Ｗ?ｍＲＮＡ表達量??Ｉ＾ｉｕｒｅ?３－１－２－２?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｅｘｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ＡＭＰＫ?ａｎｄ?ＦＯＸ０３??

０．０５）（圖３－１－３－１?），而０．２５＾ｉＭ組／？－心你公和ＦＯＹＷ蛋白表達量無明顯變化；??不同濃度激活劑處理蛋白表達量均顯著性高于對照組（Ｐ＜０．０５），而??八化ａ？在０．５ｍＭ和ｌｍＭ高于對照組（Ｐ＜０．０５）（圖３－：ｌ－３－２）。因此，分別將??０．５＾ｉＭ和ＩｍＭ作為抑制劑和激活劑的最佳處理濃度。??Ｓ?化１?Ｉ?１?，??Ｗ?Ｉ?？?Ｉ?畫?Ｃｏｎｔｒｏｌ??穿?８－?而１?巧?巧?０．２５ｉｊｌ＼／ｌ??Ｉ?鑛?ｇ?宜?０．５１ＪＭ??Ｈ?６－?圓Ｓ昌?圓１ＨＭ??Ｉ－?圍ｉ圍??Ｉ?２－ｒＳｉｆｎｎ圍圓圍??Ｉ。Ｊｊ圍ＪＬ圍Ｉ圍??Ｓ?Ｕ?＂ＩＩＷＩ?，?■?ＩＩＩ＂??ｔ?／?＜／??圖３－１－３－１不同濃度Ｄｏｒｓｏｍｏｒｐｈｉｎ?２ＨＣ１處理２４ｈ后護＾４的戶／：和蛋白表達??且??里??Ｆｉｇｕｒｅ?３－１－３－１?Ｔｈｅ?ｐｒｏ化ｉｎ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆａｎｄ??ａｔ?２４ｈ?ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ?Ｄｏｒｓｏｍｏｒｐｈｉｎ?２ＨＣ１?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ??注：＊表明基因表達量差異顯著（Ｐ＜０Ｘ）５）。??Ｎｏｔｅ；?＊?ｓｈｏｗ?ｔｈａｔ

京鴨的腿�。悖模粒螢槟０暹M行擴增，ＰＣＲ產物用１．５％瓊脂糖凝膠電泳檢測，電??泳電壓為１８０Ｖ，電泳１５ｍｉｎ，最終得到產物清晰且特異性較好的目的條帶，長??度與推算結果相符（如圖３－２－１）。??膽??２５??


本文編號：3095275