為建立一種快速、準確地檢測H1和H3亞型豬流感病毒（swine influence virus,SIV）的方法,根據H1和H3亞型SIV血凝素（hemagglutinin,HA）基因保守序列,分別設計2對特異性引物和2條Taq Man探針,建立雙重實時熒光定量RT-PCR方法。結果顯示,該方法敏感性高,可檢測到最低拷貝數為102拷貝/μL;重復性良好,重復孔Ct值的變異系數均在5%以下;特異性好,除H1和H3亞型SIV外,H4、H5、H7、H9亞型SIV、豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、口蹄疫病毒、偽狂犬病病毒檢測均為陰性;在田間樣品中成功檢出1株H1和1株H3亞型SIV,檢出率為1.16%。該方法準確、快速、靈敏、特異,可為H1、H3亞型SIV的快速鑒別檢測及流行病學調查提供有效的技術手段。 

【文章來源】：中國畜牧獸醫(yī). 2017,44(10)北大核心

【文章頁數】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 毒株
        1.1.2 主要試劑和儀器
    1.2 方法
        1.2.1 引物及探針的設計與合成
        1.2.2 RNA或DNA提取
        1.2.3 標準陽性質粒的制備與鑒定
        1.2.4 反應體系與程序的優(yōu)化
        1.2.5 標準曲線的繪制
        1.2.6 敏感性試驗
        1.2.7 特異性試驗
        1.2.8 重復性試驗
        1.2.9 田間樣品的檢測
2 結果
    2.1 雙重實時熒光定量RT-PCR反應條件優(yōu)化
    2.2 標準曲線的建立
    2.3 敏感性試驗結果
    2.4 特異性試驗結果
    2.5 重復性試驗結果
    2.6 田間樣品的檢測
3 討論
4 結論


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3091271