本試驗旨在探究魏斯氏乳桿菌（L. weissella）、唾液乳桿菌（L. salivarius）和約氏乳桿菌（L.johnsonii）聯合殼聚糖季銨鹽（CQN）對奶牛子宮內膜炎的影響。通過乳酸脫氫酶（LDH）釋放檢測法篩選致病性大腸桿菌（EPEC）最佳處理濃度和時間,建立奶牛子宮內膜上皮細胞炎癥模型。誘導細胞炎癥后,單獨添加0.01 mg/mL CQN、108CFU/mL乳桿菌處理以及乳桿菌聯合CQN處理,ELISA法和RT-qPCR法檢測細胞因子IL-6、IL-8和IL-10的變化。結果表明:單獨添加3株乳桿菌處理與單獨添加CQN處理均降低了IL-6的蛋白和mRNA表達（P<0.05）,但對IL-8的表達無顯著影響;相比單獨添加處理,約氏乳桿菌與CQN混合處理降低了IL-6和IL-8的表達（P<0.05）,并恢復了IL-6/IL-10和IL8/IL-10的平衡;與CQN混合處理后,約氏乳桿菌對奶牛子宮內膜上皮細胞的黏附率提升（P<0.001）。結果提示,約氏乳桿菌聯合CQN具有良好的抗炎潛力,可用于奶牛子宮內膜炎的治療。 

【文章來源】：中國畜牧雜志. 2020,56(08)北大核心

【文章頁數】：6 頁

【部分圖文】：

細菌黏附變化

不同處理對細胞因子的影響

本試驗首先添加了不同濃度的大腸桿菌對奶牛子宮內膜上皮細胞進行長時間的處理，發(fā)現106 CFU/mL的大腸桿菌處理3 h后，細胞因子IL-6和IL-8的表達顯著上升，且在24 h內持續(xù)上升，確定了奶牛子宮內膜上皮細胞炎癥的持續(xù)發(fā)生。致炎處理后，單獨添加乳桿菌和單獨CQN處理細胞12 h后均顯著降低了IL-6的釋放，但是未降至正常水平，且對IL-8的釋放無顯著影響，這可能是由于持續(xù)性的炎癥需要更長時間的治療。Wang等[13]在添加植物乳桿菌處理炎癥細胞時也觀察到相似現象，于是將治療時間延長后發(fā)現促炎因子的顯著下調。然而，本試驗發(fā)現約氏乳桿菌和CQN混合添加處理炎癥細胞后，細胞因子IL-6、IL-8和IL-10均恢復至正常水平，這表明乳桿菌和CQN混合后大大提高了其抗炎效果。有研究表明，大腸桿菌依賴菌體表面黏蛋白黏附于細胞膜進行侵染[4]。因此，本研究對大腸桿菌和約氏乳桿菌的黏附細胞的狀態(tài)進行了觀察，發(fā)現約氏乳桿菌和CQN混合處理盡管沒有顯著降低大腸桿菌對細胞的黏附率，但是抑制了其生長，并且CQN的添加顯著增強了約氏乳桿菌的黏附率，這可能是導致細胞炎癥減緩的重要原因之一。Inturri等[14]研究發(fā)現，長雙歧桿菌和鼠李糖乳桿菌的聯合使用可有效降低革蘭氏陰性菌的黏附性能。大量研究表明，乳桿菌聯合中藥、維生素和一些糖類可以有效減緩炎癥的發(fā)生并提高機體的免疫功能[15-17]。這些證據均表明，乳桿菌聯合多種物質將會是高效治療奶牛子宮內膜炎的新走向。盡管本研究發(fā)現約氏乳桿菌和殼聚糖季銨鹽的混合處理可以有效抑制細胞因子的上升，但其是基于細胞層面的體外研究，且機制尚不明確，需要更深入的研究。圖3 不同處理對細胞因子的影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]健康奶牛陰道乳酸菌分離鑒定及作為候選益生菌株的體外評價[J]. 田豐松,王軍,劉暢,李長久,丁赫,楊雨江,呂文發(fā).  中國預防獸醫(yī)學報. 2016(06)



本文編號：3087479