喹嗯啉類藥物作為飼料添加劑在我國(guó)畜牧業(yè)上應(yīng)用廣泛,其在動(dòng)物體內(nèi)眾多代謝物對(duì)藥效和毒性均會(huì)產(chǎn)生影響。研究建立該類藥物及代謝物殘留的快速篩選和確證分析方法能夠?yàn)槠浒踩u(píng)估和藥理毒理學(xué)研究提供參考技術(shù)。對(duì)喹乙醇進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造合成半抗原,采用活化酯法與牛血清白蛋白偶聯(lián)后免疫新西蘭大白兔,獲得喹嗯啉類多克隆抗體,建立了豬肝中8種喹嗯啉類藥物及代謝物（喹乙醇、卡巴氧、乙酰甲喹、喹烯酮、1—脫氧喹賽多、脫二氧喹烯酮、脫二氧乙酰甲喹和喹嗯啉—2—羧酸）殘留的間接酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)方法。包被原采用2-丙烯酸-1,4-脫二氧喹噁啉。該方法的IC50為0.10-2.50μg·L-1。樣品經(jīng)0.2mol·L-1-乙腈（3+5,v/v）提取,濃縮后檢測(cè)。在1-100μg·kg-1的添加濃度范圍內(nèi),各化合物的平均回收率為80.14-96.90%,批內(nèi)變異系數(shù)為5.67-13.82%,批間變異系數(shù)為6.22-14.19%。方法的檢測(cè)限為0.03-0.79μg·kg-1。采用活化酯法合成3—甲基喹噁啉—2—羧酸（MQCA）—牛血清白蛋白偶聯(lián)物后免疫巴比小鼠,采用體內(nèi)腹水誘生法獲得MQCA的單克隆抗體,建立了豬肝組織中MQ... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
圖表目錄
縮略語(yǔ)表
第一章 喹噁啉類藥物研究背景
    1 研究目的和意義
    2 喹噁啉類藥物研究進(jìn)展
        2.1 喹噁啉類藥物的種類及介紹
        2.2 喹噁啉類藥物的毒性研究
        2.3 喹噁啉類藥物的代謝研究
        2.4 喹噁啉類藥物的殘留檢測(cè)技術(shù)研究
    3 研究?jī)?nèi)容和方法
        3.1 研究?jī)?nèi)容
        3.2 研究方法
第二章 喹噁啉類藥物多殘留ELISA方法研究
    1 材料與方法
        1.1 試劑和藥品
        1.2 儀器與設(shè)備
        1.3 酶聯(lián)免疫檢測(cè)溶液系統(tǒng)
    2 方法
        2.1 喹噁啉類藥物半抗原和抗原的制備
        2.2 喹噁啉類藥物抗體的制備
        2.3 ELISA檢測(cè)條件的優(yōu)化
        2.4 ELISA檢測(cè)方法的建立
    3 結(jié)果分析
        3.1 半抗原的合成和純化鑒定
        3.2 人工抗原的合成和鑒定
        3.3 抗血清的篩選
        3.4 包被原的篩選
        3.5 包被原稀釋度和抗體稀釋度的確定
        3.6 包被溫度和時(shí)間的優(yōu)化
        3.7 競(jìng)爭(zhēng)時(shí)間的選擇
        3.8 抗體特異性的檢測(cè)
        3.9 喹噁啉類藥物及主要代謝物標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        3.10 ELISA方法靈敏度的測(cè)定
        3.11 ELISA方法準(zhǔn)確度和精密度的測(cè)定
        3.12 陽(yáng)性樣品的檢測(cè)
    4 討論
    5 小結(jié)
第三章 3-甲基喹噁啉-2-羧酸的ELISA方法研究
    1 材料與設(shè)備
        1.1 試劑和藥品
        1.2 儀器與設(shè)備
        1.3 試驗(yàn)動(dòng)物和融合細(xì)胞
        1.4 單克隆抗體制備溶液系統(tǒng)
        1.5 酶聯(lián)免疫檢測(cè)溶液系統(tǒng)
        1.6 標(biāo)準(zhǔn)溶液和其它溶液
    2 方法
        2.1 免疫原和包被原的制備和鑒定
        2.2 單克隆抗體的制備
        2.3 ELISA檢測(cè)程序
        2.4 ELISA檢測(cè)條件的優(yōu)化
        2.5 豬肉組織樣品的檢測(cè)
        2.6 方法的準(zhǔn)確度、精密度和靈敏度評(píng)估
        2.7 陽(yáng)性樣品的制備和確證檢測(cè)
    3 結(jié)果與分析
        3.1 免疫原和包被原的合成和鑒定
        3.2 單克隆抗體的制備
        3.3 ELISA檢測(cè)條件的優(yōu)化
        3.4 ELISA方法特異性的檢測(cè)
        3.5 ELISA方法的驗(yàn)證
        3.6 陽(yáng)性樣品檢測(cè)
    4 討論
    5 小結(jié)
第四章 喹烯酮及其代謝物的殘留確證分析方法研究
    1 材料與設(shè)備
        1.1 藥品及代謝物來(lái)源
        1.2 試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 主要溶液
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
        2.2 儀器分析條件
        2.3 樣品前處理過(guò)程
    3 結(jié)果與分析
        3.1 UPLC-Q-TOF MS條件的優(yōu)化
        3.2 喹烯酮及其代謝物的Q-TOF-MS定量分析方法的建立
        3.3 喹烯酮及其代謝物的Q-TOF-MS/MS定性確證分析
        3.4 喹烯酮及其代謝物的Q-TOF-MS定量分析方法的驗(yàn)證
        3.5 實(shí)際樣品檢測(cè)
    4. 討論
        4.1 方法學(xué)討論
        4.2 樣品前處理方法的研究
    5. 小結(jié)
第五章 喹賽多及其代謝物的殘留確證分析方法研究
    1 材料與設(shè)備
        1.1 材料
        1.2 主要儀器
        1.3 主要溶液
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 樣品的制備
        2.2 樣品前處理
        2.3 檢測(cè)條件的設(shè)置
        2.4 基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        2.5 檢測(cè)限與定量限的測(cè)定
        2.6 準(zhǔn)確度、精密度和重復(fù)性的測(cè)定
        2.7 樣品的確證
    3 結(jié)果與分析
        3.1 儀器分析條件的優(yōu)化
        3.2 檢測(cè)方法的線性關(guān)系驗(yàn)證
        3.3 檢測(cè)限和定量限的確定
        3.4 方法的準(zhǔn)確度、精密度和重復(fù)性
        3.5 方法的確證分析
    4 討論
    5 小結(jié)
第六章 喹噁啉類藥物及其主要代謝物的多殘留確證分析方法研究
    1 材料與設(shè)備
        1.1 藥品及代謝物來(lái)源
        1.2 試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 主要溶液
    2 方法
        2.1 樣品的制備和來(lái)源
        2.2 儀器分析條件
        2.3 樣品前處理過(guò)程
    3 結(jié)果與分析
        3.1 樣品溶解液對(duì)13種化合物色譜行為的影響
        3.2 質(zhì)譜條件的優(yōu)化研究
        3.3 基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
        3.4 檢測(cè)限和定量限的確定
        3.5 方法的準(zhǔn)確度、精密度和重復(fù)性
        3.6 方法的確證分析
    4 討論
    5 小結(jié)
第七章 結(jié)論和創(chuàng)新點(diǎn)
    1 結(jié)論
        1.1 制備了喹噁啉類藥物多克隆抗體,建立了喹噁啉類藥物及其代謝物多殘留的酶聯(lián)免疫測(cè)定方法
        1.2 制備了3-甲基喹噁啉-2-羧酸單克隆抗體,建立了三種喹噁啉類藥物共同代謝物的酶聯(lián)免疫測(cè)定方法
        1.3 建立了喹烯酮及其代謝物多殘留的超高效液相色譜—飛行時(shí)間質(zhì)譜確證分析方法
        1.4 建立了喹賽多及其代謝物多殘留的超高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜確證分析方法
        1.5 建立了喹噁啉類藥物及其代謝物多殘留的超高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜確證分析方法
    2 創(chuàng)新點(diǎn)
        2.1 制備了包被半抗原2-丙烯酸-1,4-二氮喹噁啉,并將其用于酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法
        2.2 建立了豬肝中8種喹噁啉類藥物及代謝物多殘留的ELISA測(cè)定方法和3-甲基喹噁啉-2-羧酸殘留的ELISA快速篩選方法
        2.3 建立了動(dòng)物組織中喹烯酮及其代謝物、喹賽多及其代謝物和13種喹噁啉類藥物及代謝物多殘留的液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用確證分析方法
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高效液相色譜-電噴霧離子阱飛行時(shí)間質(zhì)譜法鑒定乙酰甲喹及其代謝物[J]. 劉迎春,司紅彬,賀利民,丁煥中,黃顯會(huì),陳建新,陳杖榴,曾振靈.  分析化學(xué). 2010(01)
[2]乙酰甲喹在試驗(yàn)性肝功能損害家兔體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究[J]. 陸晨薇,李引乾,關(guān)永娟,張煜波,白東英,苗小樓,熊永潔.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2008(12)
[3]豬飼料中喹噁啉類藥物酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法的建立[J]. 趙春保,彭大鵬,陶燕飛,陳冬梅,袁宗輝.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2008(S2)
[4]喹乙醇在我國(guó)的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 馬敬中,武冬梅,汪有生.  化學(xué)世界. 2008(10)
[5]喹乙醇的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 董堯,王前勇.  畜牧獸醫(yī)雜志. 2008(03)
[6]乙酰甲喹在綿羊體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)研究[J]. 黃勇旗,李引乾,楊亞軍,苗小樓,謝沄,白東英,陸晨薇,孫黎,馬寶禎.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2008(02)
[7]喹乙醇在水產(chǎn)動(dòng)物中的應(yīng)用及其安全性評(píng)價(jià)[J]. 楊波,陳吉紅.  獸藥與飼料添加劑. 2006(02)
[8]新獸藥喹烯酮亞慢性經(jīng)口毒性研究[J]. 許建寧,王全凱,崔濤,黃齊頤,王建國(guó).  中國(guó)獸藥雜志. 2005(03)
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[10]喹賽多對(duì)家禽常見(jiàn)病原菌的體外抗菌活性研究[J]. 黃玲利,袁宗輝,范盛先,劉登才,陳品,王大菊.  華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2003(02)

博士論文
[1]喹唑啉類化合物庫(kù)的固相合成、生物活性篩選及釤試劑在有機(jī)合成中的應(yīng)用[D]. 章硯東.浙江大學(xué) 2007
[2]喹賽多促進(jìn)豬生長(zhǎng)的內(nèi)分泌機(jī)理研究[D]. 朱惠玲.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[3]新型喹唑啉類衍生物合成及生物活性研究[D]. 劉剛.貴州大學(xué) 2006
[4]喹賽多對(duì)仔豬及幼齡牛羊生長(zhǎng)的影響研究[D]. 丁明星.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[5]喹賽多在肉雞的有效性與安全性研究[D]. 黃玲利.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[6]液相組合合成喹喔啉醇類化合物化學(xué)庫(kù)及其優(yōu)化和ADME特性初探[D]. 張亮.中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 2005
[7]喹乙醇對(duì)鯉魚(yú)的生理生化效應(yīng)及其在組織中的殘留[D]. 葉繼丹.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003
[8]喹賽多在豬體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)和殘留研究[D]. 邱銀生.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003

碩士論文
[1]豬肝細(xì)胞黃嘌呤氧化還原酶代謝喹賽多的結(jié)構(gòu)和功能研究[D]. 陳持綱.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]喹賽多對(duì)恒化器模型中人腸道菌群的影響[D]. 郭衛(wèi)革.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]喹噁啉類在大鼠和豬肝微粒體中脫氧速率與肝細(xì)胞中毒性的研究[D]. 張華海.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[4]氚標(biāo)乙酰甲喹的合成及其在動(dòng)物體內(nèi)的處置研究[D]. 尹伏軍.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[5]小鼠喹乙醇急性與蓄積性中毒試驗(yàn)研究[D]. 羅明剛.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[6]喹烯酮抗菌促生長(zhǎng)作用及在鯉、斑點(diǎn)叉尾鮰體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)研究[D]. 楊莉.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[7]喹唑啉化合物庫(kù)內(nèi)小分子促小鼠胚胎干細(xì)胞心肌分化活性篩選及相關(guān)分子事件研究[D]. 胡穎.浙江大學(xué) 2010
[8]喹唑啉類抗腫瘤化合物的設(shè)計(jì)、合成及生物活性篩選[D]. 丁文波.浙江大學(xué) 2010
[9]喹喔啉酮類化合物逆轉(zhuǎn)多藥耐藥作用及QA3逆轉(zhuǎn)機(jī)制研究[D]. 孫麗蕊.山東大學(xué) 2009
[10]HPLC同時(shí)測(cè)定飼料中喹噁啉類三種藥物方法的研究[D]. 劉發(fā)全.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



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