Prox1 （prospero-related homeobox protein 1）作為轉(zhuǎn)錄因子,在胚胎發(fā)育與癌癥發(fā)生中具有重要作用。為預(yù)測(cè)和鑒定雞（Gallus gallus） Prox1蛋白核定位信號(hào)（nuclear localization signal, NLS）,首先對(duì)雞Prox1蛋白進(jìn)行截短表達(dá),通過(guò)熒光觀察和亞細(xì)胞定位分析確定其N(xiāo)LS所在區(qū)域。運(yùn)用在線(xiàn)軟件預(yù)測(cè)雞Prox1蛋白截短體中假定的NLS （putative NLS, pNLS）,構(gòu)建雞Prox1蛋白pNLS缺失體重組真核表達(dá)載體并轉(zhuǎn)染細(xì)胞,通過(guò)觀察缺失體重組蛋白的亞細(xì)胞定位確定NLS;進(jìn)一步將鑒定的雞Prox1蛋白NLS進(jìn)行保守性分析,并檢測(cè)其對(duì)外源蛋白的核輸入能力;另外,利用NLS點(diǎn)突變鑒定雞Prox1蛋白NLS中的關(guān)鍵堿性氨基酸位點(diǎn)。結(jié)果表明,雞Prox1蛋白N端（1～220 aa）具有細(xì)胞核定位特征,NLS預(yù)測(cè)結(jié)果顯示其N(xiāo)端存在2個(gè)pNLS,分別為pNLS1 (¹⁵KRRR¹⁸)和pNLS2 (¹⁶³RAKRAR¹⁶⁸... 

【文章來(lái)源】：農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2020,28(11)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：12 頁(yè)

【部分圖文】：

雞Prox1蛋白截短體片段擴(kuò)增(A)及重組真核表達(dá)載體的酶切鑒定(B)

雞Prox1截短體重組蛋白的亞細(xì)胞定位

雞Prox1蛋白p NLS缺失體的overlap PCR擴(kuò)增(A)及重組真核表達(dá)載體的酶切鑒定(B)


本文編號(hào)：3085256