病原感染會引起免疫系統(tǒng)改變,而炎癥是常見的早期癥狀。不同病原引起的炎癥反應(yīng)程度不同,輕度炎癥可促進機體清除病原,但不引起器官的炎性損傷,而重度炎癥反應(yīng),會使免疫細(xì)胞發(fā)生過度應(yīng)激反應(yīng)。當(dāng)病原侵襲宿主時,巨噬細(xì)胞不僅在宿主免疫反應(yīng)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用,還能調(diào)控炎癥反應(yīng)的平衡。巨噬細(xì)胞通常分成兩種炎癥極化表型:經(jīng)典激活（M1）型和替代激活（M2）型。不同表型有不同的表面標(biāo)志物,并通過分泌不同的細(xì)胞因子、趨化因子和酶,來更好的應(yīng)對生理環(huán)境的變化。確定病原感染宿主時巨噬細(xì)胞的極化表型,對于病原致病機制研究和確定治療策略十分重要。目前,由于缺少馬巨噬細(xì)胞極化標(biāo)志物對應(yīng)的單克隆抗體,鑒定表型的方法仍比較單一。本研究旨在制備馬巨噬細(xì)胞極化標(biāo)志物CD80和CD163的單克隆抗體,為了獲得馬源CD80和CD163的基因序列,我們提取馬外周血巨噬細(xì)胞RNA,以其為模板反轉(zhuǎn)錄并擴增目的片段。通過合成肽和重組表達,分別獲得兩種蛋白并將它們作為免疫原免疫小鼠。Western blot表明,這些抗體既能特異性識別真核表達的蛋白,也能與馬內(nèi)源性蛋白結(jié)合。利用熒光定量PCR技術(shù)檢測CD80和CD163的mRNA水平,在M1... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

CD80蛋白跨膜區(qū)預(yù)測

合成人工抗原示意圖及合成肽質(zhì)檢測試報告Fig.2-2Schematicdiagramofsyntheticartificialantigenandqualitytestreportofsyntheticpeptide

血清抗體效價檢測Fig.2-4Serumantibodyefficacytest

【參考文獻】：
期刊論文
[1]M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CD163與腫瘤的研究進展[J]. 丁婷婷,泮紅飛,張紅,龍潤瑩,羅軍敏,馮繼紅.  中國免疫學(xué)雜志. 2018(07)



本文編號：3084702