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鹿流行性出血病病毒可視化RT-LAMP現(xiàn)場檢測方法的建立

發(fā)布時間:2021-03-15 01:13
  為建立鹿流行性出血病病毒(EHDV)可視化RT-LAMP檢測方法。本研究根據(jù)EHDV內(nèi)衣殼蛋白(VP7)基因保守序列設計2對特異性引物,通過反應條件優(yōu)化,建立了EHDV可視化RT-LAMP檢測方法。本研究建立的RT-LAMP方法的最佳反應條件為62℃1 h;利用該方法檢測口蹄疫病毒、牛病毒性腹瀉病毒、藍舌病病毒、非洲馬瘟病毒和4個血清型EHDV的RNA樣品,結(jié)果顯示該方法能檢測4個血清型EHDV RNA,與其他病毒RNA無交叉反應,特異性較強;該方法最低可檢測到4.7×10-8ng/?L的RNA,敏感性是普通RT-PCR方法的1 000倍。應用建立的RT-LAMP和普通RT-PCR方法分別對85份牛血液樣品進行檢測,結(jié)果顯示,二者陽性和陰性符合率分別為100%和98.8%。本研究建立的EHDV可視化RT-LAMP檢測方法具有特異性強、敏感性高、快速和高通量檢測的優(yōu)點,為牛EHDV感染提供了快速可視化現(xiàn)場檢測方法。 

【文章來源】:中國獸醫(yī)科學. 2020,50(12)北大核心

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

鹿流行性出血病病毒可視化RT-LAMP現(xiàn)場檢測方法的建立


EHDV RT-LAMP最佳反應體系和反應條件下的反應結(jié)果

鹿流行性出血病病毒可視化RT-LAMP現(xiàn)場檢測方法的建立


EHDV RT-LAMP特異性試驗

鹿流行性出血病病毒可視化RT-LAMP現(xiàn)場檢測方法的建立


EHDV RT-LAMP的敏感性試驗

【參考文獻】:
期刊論文
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[4]流行性出血病病毒一步法RT-PCR檢測方法的建立及應用[J]. 楊振興,朱建波,廖德芳,李占鴻,肖雷,高林,李楠,楊恒,李華春.  中國獸醫(yī)科學. 2019(03)
[5]小反芻獸疫病毒可視化RT-LAMP檢測方法的建立[J]. 李富祥,楊仕標,趙文華,李華春.  中國獸醫(yī)科學. 2018(12)
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本文編號:3083294

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