精氨酸水平對體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白表達(dá)的影響
發(fā)布時間:2021-03-14 13:25
乳蛋白是構(gòu)成牛奶營養(yǎng)品質(zhì)的主要物質(zhì)基礎(chǔ),既涉及乳品質(zhì)量安全,又是奶業(yè)核心競爭力的標(biāo)志。因此,立足我國乳品質(zhì)的現(xiàn)實,建立改善乳蛋白的理論和方法已經(jīng)成為奶業(yè)持續(xù)健康發(fā)展的需求。研究表明,乳腺中精氨酸的攝入量超過其乳中精氨酸分泌量的2-4倍,提示精氨酸除用于乳蛋白合成外,其乳腺冗余還可能有其他代謝途徑或作為功能性氨基酸參與代謝調(diào)控。本課題則研究了不同精氨酸水平對體外培養(yǎng)乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白表達(dá)的影響及其分子機(jī)制。該試驗以體外培養(yǎng)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞為模型,研究培養(yǎng)基中不同水平的Arg對奶牛乳腺上皮細(xì)胞生長以及細(xì)胞增殖活性的影響。試驗以無Arg的培養(yǎng)基即Arg0倍組(0.00mg/L)為對照,Arg0.25倍組(69.500mg/L)、0.5倍組(139.00mg/L)、1倍組(278.00mg/L)、2倍組(556.00mg/L)、4倍組(1112.00mg/L)、8倍組(2224.00mg/L)為試驗處理組。研究結(jié)果表明:(1)添加精氨酸能顯著促進(jìn)乳腺上皮細(xì)胞的增殖(P<0.05)。(2)添加精氨酸能促進(jìn)as-casein和β-casein等酪蛋白的表達(dá),并以2倍組(556.00mg/L...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
圖表清單
縮寫說明
第一章:緒論
1 乳蛋白的合成
2 乳腺細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的調(diào)控
2.1 乳蛋白合成調(diào)控的研究概況
2.2 限制性氨基酸對乳蛋白合成調(diào)控的研究
2.3 功能性氨基酸對乳蛋白合成的調(diào)控作用
3 精氨酸的生理生化功能
3.1 精氨酸—NO途徑
3.2 促進(jìn)蛋白質(zhì)合成
3.3 精氨酸作為內(nèi)分泌促分泌物
3.4 體外精氨酸對細(xì)胞培育的影響
4. 精氨酸的代謝途徑
5. 本研究的立題與主要內(nèi)容
第二章:試驗研究:精氨酸水平對奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白表達(dá)的影響
1. 前言
2. 材料和方法
2.1 試驗設(shè)計
2.2 奶牛乳腺上皮細(xì)胞(CMEC)的純化培養(yǎng)
2.3 噻唑藍(lán)比色(MTT)法檢測細(xì)胞增殖
2.4 乳腺上皮細(xì)胞總蛋白的提取
2.5 乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)αs-、β-酪蛋白合成量的測定
2.6 RNA提取及質(zhì)量鑒定
2.7 反轉(zhuǎn)錄與RT-PCR
2.8 數(shù)據(jù)處理與分析
3. 結(jié)果與分析
3.1 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞增殖的影響
3.2 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞酪蛋白表達(dá)的影響
3.3 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞酪蛋白基因轉(zhuǎn)錄的影響
3.4 Arg乳腺上皮細(xì)胞中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄的影響
3.5 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞精氨酸代謝酶的影響
4. 討論
4.1 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞酪蛋白表達(dá)的影響
4.2 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞增殖的的影響
4.3 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞酪蛋白基因轉(zhuǎn)錄的影響
4.4 Arg對乳腺上皮細(xì)胞中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄的影響
4.5 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞精氨酸代謝酶的影響
第五章:結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]精氨酸水平對奶牛乳腺上皮細(xì)胞體外生長及κ-酪蛋白基因表達(dá)的影響[J]. 徐柏林,王夢芝,張興夫,哈斯,王春艷,敖長金,王洪榮. 動物營養(yǎng)學(xué)報. 2012(05)
[2]陰外動脈灌注氨基酸對奶山羊乳腺攝取乳成分前體物的影響[J]. 王強(qiáng),敖長金,嘎爾迪,盧德勛,高民,段斌,馮子琪. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(21)
[3]母豬精氨酸營養(yǎng)研究進(jìn)展[J]. 劉俊鋒,胡慧,孔祥峰,吳琛,何若鋼. 動物營養(yǎng)學(xué)報. 2010(04)
[4]牛乳腺β-酪蛋白基因的克隆及其表達(dá)載體的構(gòu)建[J]. 田甜,寨鴻瑞,劉若余,王兆龍. 中國畜牧獸醫(yī). 2009(08)
[5]四(4-磺酸基苯基)卟啉錳鈉鹽-NO配合物的合成及NO釋放效能和生物學(xué)活性研究[J]. 肖麗波,魯燕妮,劉凌鵬,吳鵬飛,馮清. 有機(jī)化學(xué). 2009(06)
[6]家畜泌乳生物學(xué)的研究進(jìn)展[J]. 高玉云,蔣宗勇,李大剛. 飼料工業(yè). 2009(08)
[7]奶山羊乳腺中瘦素及其受體的表達(dá)與作用[J]. 李萌,李慶章. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(12)
[8]L-精氨酸抑制非對稱性二甲基精氨酸對內(nèi)皮祖細(xì)胞的增殖作用[J]. 何晉,謝秀梅,方葉青,陳曉彬. 中國動脈硬化雜志. 2007(10)
[9]高溫下精氨酸對一氧化氮和細(xì)胞增殖的影響[J]. 羅海吉,周愛軍,吉雁鴻. 中國公共衛(wèi)生. 2005(03)
[10]L-精氨酸對Hela細(xì)胞增殖的調(diào)控作用研究[J]. 董矜,田亞平,房征宇. 軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報. 2004(02)
博士論文
[1]奶牛乳腺發(fā)育及泌乳重要功能基因的篩選[D]. 侯曉明.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[2]王不留行、黃芪對奶牛乳腺上皮細(xì)胞體外增殖與分泌功能影響的研究[D]. 丁月云.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[3]必需氨基酸及蛋氨酸二肽供給模式對奶牛乳腺組織αs-酷蛋白合成的影響[D]. 吳慧慧.浙江大學(xué) 2007
[4]微量元素鋅(Zn)對山羊β-酪蛋白合成及分泌影響的研究[D]. 白英.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
碩士論文
[1]奶牛乳腺上皮細(xì)胞中賴氨酸蛋氨酸配比模式對酪蛋白合成的影響及機(jī)理研究[D]. 李喜艷.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011
[2]必需氨基酸濃度對奶牛乳腺酪蛋白αs1基因表達(dá)的影響[D]. 來金良.浙江大學(xué) 2006
本文編號:3082266
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
圖表清單
縮寫說明
第一章:緒論
1 乳蛋白的合成
2 乳腺細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的調(diào)控
2.1 乳蛋白合成調(diào)控的研究概況
2.2 限制性氨基酸對乳蛋白合成調(diào)控的研究
2.3 功能性氨基酸對乳蛋白合成的調(diào)控作用
3 精氨酸的生理生化功能
3.1 精氨酸—NO途徑
3.2 促進(jìn)蛋白質(zhì)合成
3.3 精氨酸作為內(nèi)分泌促分泌物
3.4 體外精氨酸對細(xì)胞培育的影響
4. 精氨酸的代謝途徑
5. 本研究的立題與主要內(nèi)容
第二章:試驗研究:精氨酸水平對奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白表達(dá)的影響
1. 前言
2. 材料和方法
2.1 試驗設(shè)計
2.2 奶牛乳腺上皮細(xì)胞(CMEC)的純化培養(yǎng)
2.3 噻唑藍(lán)比色(MTT)法檢測細(xì)胞增殖
2.4 乳腺上皮細(xì)胞總蛋白的提取
2.5 乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)αs-、β-酪蛋白合成量的測定
2.6 RNA提取及質(zhì)量鑒定
2.7 反轉(zhuǎn)錄與RT-PCR
2.8 數(shù)據(jù)處理與分析
3. 結(jié)果與分析
3.1 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞增殖的影響
3.2 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞酪蛋白表達(dá)的影響
3.3 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞酪蛋白基因轉(zhuǎn)錄的影響
3.4 Arg乳腺上皮細(xì)胞中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄的影響
3.5 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞精氨酸代謝酶的影響
4. 討論
4.1 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞酪蛋白表達(dá)的影響
4.2 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞增殖的的影響
4.3 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞酪蛋白基因轉(zhuǎn)錄的影響
4.4 Arg對乳腺上皮細(xì)胞中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄的影響
4.5 Arg對乳腺上皮細(xì)胞細(xì)胞精氨酸代謝酶的影響
第五章:結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]精氨酸水平對奶牛乳腺上皮細(xì)胞體外生長及κ-酪蛋白基因表達(dá)的影響[J]. 徐柏林,王夢芝,張興夫,哈斯,王春艷,敖長金,王洪榮. 動物營養(yǎng)學(xué)報. 2012(05)
[2]陰外動脈灌注氨基酸對奶山羊乳腺攝取乳成分前體物的影響[J]. 王強(qiáng),敖長金,嘎爾迪,盧德勛,高民,段斌,馮子琪. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(21)
[3]母豬精氨酸營養(yǎng)研究進(jìn)展[J]. 劉俊鋒,胡慧,孔祥峰,吳琛,何若鋼. 動物營養(yǎng)學(xué)報. 2010(04)
[4]牛乳腺β-酪蛋白基因的克隆及其表達(dá)載體的構(gòu)建[J]. 田甜,寨鴻瑞,劉若余,王兆龍. 中國畜牧獸醫(yī). 2009(08)
[5]四(4-磺酸基苯基)卟啉錳鈉鹽-NO配合物的合成及NO釋放效能和生物學(xué)活性研究[J]. 肖麗波,魯燕妮,劉凌鵬,吳鵬飛,馮清. 有機(jī)化學(xué). 2009(06)
[6]家畜泌乳生物學(xué)的研究進(jìn)展[J]. 高玉云,蔣宗勇,李大剛. 飼料工業(yè). 2009(08)
[7]奶山羊乳腺中瘦素及其受體的表達(dá)與作用[J]. 李萌,李慶章. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(12)
[8]L-精氨酸抑制非對稱性二甲基精氨酸對內(nèi)皮祖細(xì)胞的增殖作用[J]. 何晉,謝秀梅,方葉青,陳曉彬. 中國動脈硬化雜志. 2007(10)
[9]高溫下精氨酸對一氧化氮和細(xì)胞增殖的影響[J]. 羅海吉,周愛軍,吉雁鴻. 中國公共衛(wèi)生. 2005(03)
[10]L-精氨酸對Hela細(xì)胞增殖的調(diào)控作用研究[J]. 董矜,田亞平,房征宇. 軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報. 2004(02)
博士論文
[1]奶牛乳腺發(fā)育及泌乳重要功能基因的篩選[D]. 侯曉明.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[2]王不留行、黃芪對奶牛乳腺上皮細(xì)胞體外增殖與分泌功能影響的研究[D]. 丁月云.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[3]必需氨基酸及蛋氨酸二肽供給模式對奶牛乳腺組織αs-酷蛋白合成的影響[D]. 吳慧慧.浙江大學(xué) 2007
[4]微量元素鋅(Zn)對山羊β-酪蛋白合成及分泌影響的研究[D]. 白英.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
碩士論文
[1]奶牛乳腺上皮細(xì)胞中賴氨酸蛋氨酸配比模式對酪蛋白合成的影響及機(jī)理研究[D]. 李喜艷.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011
[2]必需氨基酸濃度對奶牛乳腺酪蛋白αs1基因表達(dá)的影響[D]. 來金良.浙江大學(xué) 2006
本文編號:3082266
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