構(gòu)建腺病毒重組表達(dá)載體pADTrack-ISL1-AdEasy,經(jīng)293A細(xì)胞的包裝和擴(kuò)增,獲得具有感染性的重組腺病毒,將其按感染復(fù)數(shù)（MOI）=100感染犬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞（adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs）,觀察感染后4,7,10,13,16 d綠色熒光蛋白表達(dá)情況、細(xì)胞形態(tài)變化和胰島β細(xì)胞發(fā)育相關(guān)基因的mRNA表達(dá)情況。結(jié)果顯示,含ISL1基因的重組腺病毒感染犬ADSCs 48 h后,綠色熒光蛋白開(kāi)始表達(dá);13 d后犬ADSCs出現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)變化,由梭形變?yōu)樯窠?jīng)細(xì)胞樣;qRT-PCR分析表明在犬ADSCs中過(guò)表達(dá)ISL1基因提高了PDX1、NGN3、MNX1、MAFA和NKX6.1基因的內(nèi)源性表達(dá)。結(jié)果表明,含ISL1基因的重組腺病毒成功感染犬ADSCs,并可促進(jìn)其向胰島樣前體細(xì)胞分化,具有進(jìn)一步誘導(dǎo)形成胰島樣細(xì)胞的可能。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,40(08)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

ISL1基因的PCR結(jié)果

圖2 雙酶切結(jié)果

pADTrack-ISL1-AdEasy轉(zhuǎn)染293A細(xì)胞結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]犬糖尿病胰島素療法[J]. 杜宏超,龐海東,林德貴.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2017(03)
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本文編號(hào)：3080261