構(gòu)建腺病毒重組表達載體pADTrack-ISL1-AdEasy,經(jīng)293A細胞的包裝和擴增,獲得具有感染性的重組腺病毒,將其按感染復(fù)數(shù)（MOI）=100感染犬脂肪間充質(zhì)干細胞（adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs）,觀察感染后4,7,10,13,16 d綠色熒光蛋白表達情況、細胞形態(tài)變化和胰島β細胞發(fā)育相關(guān)基因的mRNA表達情況。結(jié)果顯示,含ISL1基因的重組腺病毒感染犬ADSCs 48 h后,綠色熒光蛋白開始表達;13 d后犬ADSCs出現(xiàn)細胞形態(tài)變化,由梭形變?yōu)樯窠?jīng)細胞樣;qRT-PCR分析表明在犬ADSCs中過表達ISL1基因提高了PDX1、NGN3、MNX1、MAFA和NKX6.1基因的內(nèi)源性表達。結(jié)果表明,含ISL1基因的重組腺病毒成功感染犬ADSCs,并可促進其向胰島樣前體細胞分化,具有進一步誘導(dǎo)形成胰島樣細胞的可能。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)學(xué)報. 2020,40(08)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

ISL1基因的PCR結(jié)果

圖2 雙酶切結(jié)果

pADTrack-ISL1-AdEasy轉(zhuǎn)染293A細胞結(jié)果

【參考文獻】：
期刊論文
[1]犬糖尿病胰島素療法[J]. 杜宏超,龐海東,林德貴.  中國獸醫(yī)雜志. 2017(03)
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本文編號：3080261