已有研究證明microRNA（miRNAs）在肌肉細(xì)胞增殖和分化過程中發(fā)揮了重要作用,目前有關(guān)miRNAs對牛肌肉生長發(fā)育影響的相關(guān)研究還比較少,本研究通過建立牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞體外成肌誘導(dǎo)分化模型,結(jié)合前期研究結(jié)果,對miR-128在牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖及成肌分化過程中所起到的調(diào)控作用進(jìn)行了深入研究。1.本研究采用膠原酶聯(lián)合胰酶的酶消化法,從牛胎兒中分離肌衛(wèi)星細(xì)胞,利用差速貼壁法進(jìn)行純化,對純化后的衛(wèi)星細(xì)胞進(jìn)行了誘導(dǎo)分化,并對標(biāo)志性基因進(jìn)行了RT-PCR及免疫熒光染色檢測。結(jié)果表明,純化后的肌衛(wèi)星細(xì)胞標(biāo)志性基因Pax7呈陽性表達(dá),且通過陽性細(xì)胞所占比例計算分離出來的衛(wèi)星細(xì)胞純度在93%以上;肌管標(biāo)志性基因肌球蛋白重鏈（MHC）呈陽性表達(dá),表明分離出來的肌衛(wèi)星細(xì)胞具有良好的體外分化能力。本研究建立了牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞分離鑒定和體外成肌誘導(dǎo)的方法,可以為肌肉發(fā)育分化和后續(xù)研究提供良好的細(xì)胞模型。2.前期研究中,我們發(fā)現(xiàn)miR-128在牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞成肌分化中表達(dá)水平顯著上調(diào),本研究中我們深入探討了miR-128在牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖分化過程中的生物學(xué)作用。通過雙熒光素酶實驗確定了miR-... 

【文章來源】：天津農(nóng)學(xué)院天津市

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

牛肌衛(wèi)星細(xì)胞標(biāo)志基因Pax7反轉(zhuǎn)錄PCR分析

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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