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寬譜沙門氏菌噬菌體STP4-a的發(fā)酵制備及其在蛋雞體內(nèi)的抑菌研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-09 09:32
  沙門氏菌(Salmonella)是自然界普遍存在的人畜共患病致病菌,在全世界范圍內(nèi),沙門氏菌引起的食物性中毒一直排在前三位。隨著抗生素的大量和長(zhǎng)期使用,越來(lái)越多的沙門氏菌產(chǎn)生了耐藥性,如何解決這一全球普遍性問(wèn)題一直是科學(xué)家們的研究熱點(diǎn)。目前,噬菌體已被科學(xué)家廣泛的應(yīng)用在食品安全防護(hù)中,因此噬菌體作為取代抗生素的生物抑菌劑是有開(kāi)發(fā)前景的。為了保證高效和安全的應(yīng)用,對(duì)噬菌體進(jìn)行安全性評(píng)估和生產(chǎn)應(yīng)用研究是十分必要的。因此,本研究以沙門氏菌噬菌體STP4-a為研究對(duì)象,主要的研究?jī)?nèi)容與結(jié)論如下:1.噬菌體STP4-a的安全性分析:從分子水平上對(duì)噬菌體STP4-a全基因組的所有開(kāi)放式閱讀框進(jìn)行BLAST比對(duì),并將其與過(guò)敏原數(shù)據(jù)庫(kù)繼續(xù)進(jìn)行比對(duì),從而判斷其安全性;然后,通過(guò)使用1010pfu/mL噬菌體STP4-a進(jìn)行經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)以評(píng)價(jià)其安全性。結(jié)果表明:噬菌體STP4-a所有的開(kāi)放式閱讀框不含與已知的毒物、毒素或者是與宿主沙門氏菌或其他病原菌相關(guān)的蛋白或基因產(chǎn)物的同源基因,經(jīng)過(guò)敏原比較分析也不具有產(chǎn)過(guò)敏原基因;噬菌體對(duì)小鼠體重、臟器重量、臟器發(fā)育等方面無(wú)顯著性影響,通過(guò)大體解剖和組織切片觀察未發(fā)現(xiàn)... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)海洋大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
0 前言
    0.1 沙門氏菌及其噬菌體的簡(jiǎn)介
        0.1.1 沙門氏菌的傳播及危害
        0.1.2 沙門氏菌的耐藥性趨勢(shì)
        0.1.3 噬菌體的生物學(xué)特性
    0.2 噬菌體的安全性研究現(xiàn)狀
        0.2.1 噬菌體防控病原菌的優(yōu)勢(shì)
        0.2.2 噬菌體潛在危害概述
        0.2.3 噬菌體安全性研究現(xiàn)狀
    0.3 噬菌體國(guó)內(nèi)外應(yīng)用研究現(xiàn)狀
        0.3.1 噬菌體的生產(chǎn)制備研究
        0.3.2 噬菌體在食源性致病菌防控中的應(yīng)用研究
        0.3.3 噬菌體在動(dòng)物疾病治療中的應(yīng)用研究
        0.3.4 噬菌體在其他方面的應(yīng)用研究
    0.4 研究目的及意義
1 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 的安全性分析
    1.1 引言
    1.2 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2.1 菌種
        1.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2.3 培養(yǎng)基
        1.2.4 主要儀器
        1.2.5 主要試劑、材料
        1.2.6 主要試劑配制
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3.1 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 分子水平上安全性評(píng)估
        1.3.2 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 的經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)
        1.3.3 數(shù)據(jù)分析方法
    1.4 結(jié)果與討論
        1.4.1 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 分子水平上安全性分析結(jié)果
        1.4.2 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 的經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1.5 小結(jié)
2 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 的生產(chǎn)制備探究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 菌種
        2.2.2 培養(yǎng)基
        2.2.3 主要儀器
        2.2.4 主要試劑
        2.2.5 主要試劑配制
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 最適液體增殖條件優(yōu)化
        2.3.2 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 發(fā)酵罐試驗(yàn)
        2.3.3 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 的凍干貯藏
        2.3.4 數(shù)據(jù)分析方法
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 最適液體增殖條件結(jié)果
        2.4.2 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 發(fā)酵罐驗(yàn)證結(jié)果
        2.4.3 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 的凍干活性結(jié)果
    2.5 小結(jié)
3 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 在蛋雞體內(nèi)抑菌的初步研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 菌種
        3.2.2 培養(yǎng)基
        3.2.3 主要儀器
        3.2.4 主要試劑
        3.2.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 病雞中沙門氏菌的分離及鑒定
        3.3.2 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 裂解譜的確定
        3.3.3 沙門氏菌噬菌體 STP4-a 在蛋雞體內(nèi)抑菌的實(shí)驗(yàn)方案
        3.3.4 數(shù)據(jù)分析方法
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 沙門氏菌分離結(jié)果
        3.4.2 沙門氏菌 16S rDNA 鑒定結(jié)果
        3.4.3 噬菌體 STP4-a 的裂解譜測(cè)定結(jié)果
        3.4.4 沙門氏菌雞體內(nèi)治療結(jié)果
    3.5 本章小結(jié)
4 論文總結(jié)
5 論文的創(chuàng)新性
參考文獻(xiàn)
附表1
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]噬菌體對(duì)食品加工過(guò)程沙門氏菌污染的防控研究[D]. 李萌.中國(guó)海洋大學(xué) 2011
[2]河南省部分地區(qū)雞沙門氏菌的分離鑒定和耐藥性研究[D]. 錢明珠.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



本文編號(hào):3072652

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