發(fā)布時(shí)間：2021-03-08 17:09

　　為了直觀、原位且特異性的檢測(cè)豬薩佩羅病毒（porcine sapelovirus,PSV）在感染仔豬后器官和組織中病毒核酸的分布,本研究根據(jù)GenBank中PSV的5′端非編碼區(qū)基因的保守序列設(shè)計(jì)并合成1對(duì)引物,利用PCR地高辛探針合成的方法制備成原位雜交檢測(cè)探針,建立了PSV原位雜交組織切片檢測(cè)的方法。應(yīng)用該方法檢測(cè)PSV感染仔豬小腸組織,結(jié)果表明陽性信號(hào)主要存在與在于腸絨毛上皮細(xì)胞和固有層淋巴細(xì)胞中,陰性對(duì)照無顯色。該方法可以用于組織切片中的PSV核酸的定位,為豬薩佩羅病毒在感染仔豬后器官和組織中病毒核酸分布及致病機(jī)理研究奠定基礎(chǔ)。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,40(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

PSV組織免疫組化結(jié)果

PCR擴(kuò)增目的條帶結(jié)果

對(duì)ISH檢測(cè)陽性的連續(xù)切片進(jìn)行免疫組化染色。結(jié)果顯示,陽性信號(hào)呈棕黃色,位于小腸絨毛上皮細(xì)胞的胞質(zhì)中。觀察染色結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)這2種方法對(duì)PSV定位具有相同的結(jié)果(圖3)。圖3 PSV組織免疫組化結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬薩佩羅病毒RT-PCR檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用[J]. 孫杰,劉暢,朱琳,焦點(diǎn),郭容利,徐業(yè)芬,李彬,何孔旺.  畜牧與獸醫(yī). 2018(07)
[2]我國部分地區(qū)原種豬場(chǎng)3種豬腹瀉病毒的血清學(xué)調(diào)查[J]. 王婧怡,申之義,原霖,倪建強(qiáng),張瑜,陳亞娜,李文杰.  中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2018(02)
[3]豬薩佩羅病毒研究進(jìn)展[J]. 趙婷婷,李晶嬌,沈小娟,李飴,華修國.  上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)科學(xué)版). 2017(06)
[4]豬肺炎支原體量子點(diǎn)熒光原位雜交研究方法的建立與應(yīng)用[J]. 王占偉,熊祺琰,馮志新,劉茂軍,路璐,范志鵬,邵國青.  中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(12)
[5]豬圓環(huán)病毒2型原位雜交檢測(cè)方法的建立[J]. 劉雯,李勇,張寧,馬麗敏,李琳,胡樂鵬,靳朝,夏志平.  中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(01)

碩士論文
[1]偽狂犬病毒變異株與經(jīng)典株滴鼻感染小鼠后時(shí)空分布規(guī)律的研究[D]. 付祖權(quán).華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]豬腹瀉病原多重PCR檢測(cè)方法的建立及主要病毒進(jìn)化分析[D]. 孟麗.上海海洋大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3071362