J亞群禽白血病病毒（Subgroup J Avian leukosis Virus，ALV-J）是上世紀(jì)90年代從肉用型雞群中分離的一種新型禽白血病病毒，主要引起骨髓細(xì)胞瘤。1999年中國首次從白羽肉雞中分離到ALV-J，近年來研究表明ALV-J已傳播到我國不同地區(qū)的地方品系雞及蛋用型雞群中，給我國養(yǎng)雞業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。本課題旨在通過脂質(zhì)體包被ALV-J gp85蛋白疫苗制備及其免疫效果研究，為臨床應(yīng)用脂質(zhì)體蛋白疫苗預(yù)防ALV-J的科學(xué)前景提供有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。采用原核誘導(dǎo)表達(dá)方法制備重組gp85蛋白：首先將gp85基因重組于表達(dá)載體PET-28a，然后將構(gòu)建好的重組載體PET-28a-gp85轉(zhuǎn)化入Rosetta（DE3）菌株，以0.5mMIPTG于37℃誘導(dǎo)6h后收獲菌體蛋白，并對(duì)包涵體蛋白通過十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）和蛋白印跡（Western-blot）方法進(jìn)行驗(yàn)證，最后對(duì)gp85蛋白進(jìn)行純化及濃度的測定。蛋白濃度測定結(jié)果為2mg/mL。采用逆相蒸發(fā)法制備gp85蛋白脂質(zhì)體疫苗，并應(yīng)用魚精蛋白法檢測其包封率。結(jié)果顯示：卵磷脂/膽固醇（摩爾比）為1：... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

重組表達(dá)載體的雙酶切鑒定結(jié)果

15000500025001000250100007500 1 重組表達(dá)載體的雙酶酶切的重組表達(dá)載體；) identification using doud digested by double enzbp

3 重組蛋白 gp85 的 SDS-PAGE 結(jié)果8a 載體誘導(dǎo)結(jié)果；1：重組表達(dá)載體 PETmbinant gp85 protein(unpurified) expressedein expression of empty plasmid(PET-28a);ecombinant plasmid(PET-28a-gp85).M 0 1202025120855035

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]J亞群禽白血病病毒Env蛋白分子生物學(xué)特性研究[D]. 葉建強(qiáng).揚(yáng)州大學(xué) 2005

碩士論文
[1]中國株J亞群禽白血病病毒全基因組序列的測定與分析[D]. 吳永平.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
[2]雞新城疫基因工程亞單位疫苗的研究[D]. 劉長梅.山東師范大學(xué) 2001



本文編號(hào)：3063346