J亞群禽白血病病毒（Subgroup J Avian leukosis Virus，ALV-J）是上世紀90年代從肉用型雞群中分離的一種新型禽白血病病毒，主要引起骨髓細胞瘤。1999年中國首次從白羽肉雞中分離到ALV-J，近年來研究表明ALV-J已傳播到我國不同地區(qū)的地方品系雞及蛋用型雞群中，給我國養(yǎng)雞業(yè)造成嚴重的經(jīng)濟損失。本課題旨在通過脂質(zhì)體包被ALV-J gp85蛋白疫苗制備及其免疫效果研究，為臨床應(yīng)用脂質(zhì)體蛋白疫苗預(yù)防ALV-J的科學(xué)前景提供有力的實驗依據(jù)。采用原核誘導(dǎo)表達方法制備重組gp85蛋白：首先將gp85基因重組于表達載體PET-28a，然后將構(gòu)建好的重組載體PET-28a-gp85轉(zhuǎn)化入Rosetta（DE3）菌株，以0.5mMIPTG于37℃誘導(dǎo)6h后收獲菌體蛋白，并對包涵體蛋白通過十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）和蛋白印跡（Western-blot）方法進行驗證，最后對gp85蛋白進行純化及濃度的測定。蛋白濃度測定結(jié)果為2mg/mL。采用逆相蒸發(fā)法制備gp85蛋白脂質(zhì)體疫苗，并應(yīng)用魚精蛋白法檢測其包封率。結(jié)果顯示：卵磷脂/膽固醇（摩爾比）為1：... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

重組表達載體的雙酶切鑒定結(jié)果

15000500025001000250100007500 1 重組表達載體的雙酶酶切的重組表達載體；) identification using doud digested by double enzbp

3 重組蛋白 gp85 的 SDS-PAGE 結(jié)果8a 載體誘導(dǎo)結(jié)果；1：重組表達載體 PETmbinant gp85 protein(unpurified) expressedein expression of empty plasmid(PET-28a);ecombinant plasmid(PET-28a-gp85).M 0 1202025120855035

【參考文獻】：
期刊論文
[1]An Evaluation of the Infection Status and Source of Subgroup J Avian Leukosis Virus in Cloned Free-Range Layers[J]. ZHANG Pei-pei,LIU Shao-qiong,WANG Jian,WANG Bo,ZHAO Cheng-di,ZHANG Yong-guang,SUN Shu-hong.  Journal of Integrative Agriculture. 2013(04)
[2]ALV-Jgp85重組蛋白與免疫佐劑聯(lián)合接種雛雞誘導(dǎo)免疫保護的研究[J]. 竇文文,李宏梅,成子強,劉建柱,劉海港,井維芳,崔治中,郭慧君.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2013(03)
[3]脂質(zhì)體作為抗生素載體的研究進展[J]. 楊杜明,徐永清,李福兵,劉華.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2012(11)
[4]乙醇注入法制備莪術(shù)醇脂質(zhì)體[J]. 張曉麗,吳品昌,劉宇,李鐵福.  中國實驗方劑學(xué)雜志. 2012(04)
[5]阿霉素脂質(zhì)體的研究進展[J]. 賈晉斌,韋青燕.  中國腫瘤. 2011(05)
[6]獸用疫苗佐劑的研究及應(yīng)用現(xiàn)狀[J]. 任銳,呂雪峰,孟憲奎.  吉林畜牧獸醫(yī). 2011(05)
[7]誘發(fā)血管瘤型J亞群禽白血病病毒gp85基因的克隆與表達[J]. 邱波,劉功振,王曉偉,王峰,陳洪博,成子強.  病毒學(xué)報. 2011(02)
[8]正交試驗優(yōu)選黃芪多糖脂質(zhì)體的制備工藝[J]. 范云鵬,王德云,胡元亮,劉家國,高煥,王遠壘,郭利偉.  中草藥. 2011(03)
[9]我國近10年雞白血病流行病學(xué)報道與研究分析[J]. 王洪進,張青禪,趙冬敏,柴家前,常維山,崔治中,郭慧君.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2011(02)
[10]J亞群禽白血病毒gp85基因表達及初步應(yīng)用[J]. 張偉偉,楊宗偉,陳宗艷,王超,李傳峰,劉光清.  中國動物傳染病學(xué)報. 2011(01)

博士論文
[1]J亞群禽白血病病毒Env蛋白分子生物學(xué)特性研究[D]. 葉建強.揚州大學(xué) 2005

碩士論文
[1]中國株J亞群禽白血病病毒全基因組序列的測定與分析[D]. 吳永平.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
[2]雞新城疫基因工程亞單位疫苗的研究[D]. 劉長梅.山東師范大學(xué) 2001



本文編號：3063346