枯草芽孢桿菌具有產(chǎn)生芽孢和消化酶的性能，鼠李糖乳桿菌具有產(chǎn)生乳酸和乳酸菌素的性能，二種菌均為益生菌，但各有優(yōu)缺點(diǎn)。本研究以枯草芽孢桿菌和鼠李糖乳桿菌為親本菌株，制備出原生質(zhì)體后進(jìn)行融合，以獲得兼具兩親本優(yōu)良性狀的融合子，并進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)，探討其對(duì)三黃雞免疫功能及腸道菌群的影響。將兩株菌分別接種于枯草芽孢桿菌和鼠李糖乳桿菌活化培養(yǎng)基中，36℃培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)中期，添加適量的青霉素和甘氨酸，繼續(xù)培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)末期；將培養(yǎng)物離心，收集菌體細(xì)胞，用不同濃度的溶菌酶處理，測(cè)定原生質(zhì)體的形成率；將兩株菌的原生質(zhì)體接種于再生培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24h，測(cè)定原生質(zhì)體的再生率。結(jié)果表明，兩株菌培養(yǎng)時(shí)，甘氨酸添加量為4mg/mL，作用時(shí)間2h；枯草芽孢桿菌培養(yǎng)時(shí)，青霉素添加量為6U/mL，作用時(shí)間2h；鼠李糖乳桿菌培養(yǎng)時(shí)，青霉素添加量為4U/mL，作用時(shí)間2h；當(dāng)溶菌酶濃度為2mg/mL、酶解溫度為37℃、酶解時(shí)間為30min時(shí)，枯草芽孢桿菌的原生質(zhì)體形成率和再生率最高，分別為63.1%和56.0%、91.2%和88.5%、78.3%和91.2%，當(dāng)溶菌酶溶液pH值為7.5時(shí)，枯草芽孢桿菌的原生質(zhì)體形成率最高，... 

【文章來源】：廣東海洋大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

枯草芽孢桿菌原生質(zhì)體Fig.2-9ProtoplastofBacillussubtilis

15圖 2-10 鼠李糖乳桿菌原生質(zhì)體Fig. 2-10 Protoplast of Lactobacillus rhamnosus度對(duì)原生質(zhì)體形成率和再生率的影響對(duì)枯草芽孢桿菌和鼠李糖乳桿菌原生質(zhì)體形成率和再生2-2，由表可以看出，在 4~37 ℃時(shí)，枯草芽孢桿菌和鼠和再生率均逐漸上升，42 ℃時(shí)稍微下降，而 56 ℃時(shí)則活性的影響有關(guān)。由表 2-1 可以看出，當(dāng)酶解溫度為 3體的形成率由 4 ℃時(shí)的 29.5 %上升至 91.2 %，再生率則 56 ℃時(shí)形成率則下降至 73.7 %，再生率下降至 56.0 %溫度為 37 ℃時(shí)，鼠李糖乳桿菌原生質(zhì)體的形成率由 4 ℃再生率則由 18.7 %上升至 85.3 %，而 56 ℃時(shí)形成率則

及 pH 值對(duì)原生質(zhì)體融合率的影響體混合液中加入不同濃度和不同 pH 的 PEG，處理后，下計(jì)數(shù)，取 0.1 mL 于再生固體培養(yǎng)基上倒平板，37 ℃培算融合率。及融合時(shí)間對(duì)原生質(zhì)體融合率的影響原生質(zhì)體混合液的分別置于不同溫度下進(jìn)行融合，每經(jīng) 10 倍系列稀釋后在顯微鏡下計(jì)數(shù)，取 0.1 mL 于再生養(yǎng) 24~36 h 后計(jì)算菌落數(shù)，計(jì)算融合率。存質(zhì)體融合子懸浮于高滲液中，并于 4 ℃條件下保存，合如圖 3-1，原生質(zhì)體之間在外力的作用下相互接觸，通合，最后形成一個(gè)新的融合子。


本文編號(hào)：3062900