本研究旨在研究血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）在斷奶仔豬中體內(nèi)的表達分布及在胃酸分泌中的作用與機理。研究包括以下三個方面的主要內(nèi)容：1血管緊張索轉(zhuǎn)化酶2的基因克隆及在仔豬體內(nèi)的表達分布本研究通過克隆仔豬ACE2基因,確定ACE2基因在健康斷奶仔豬體內(nèi)的表達分布及在胃腸道中的細胞學定位,為進一步研究該蛋白的功能奠定理論基礎。實驗采取6頭35日齡健康斷奶仔豬心、肝、脾、肺、腎、胃腸道及腦等組織樣品,進行如下試驗1)克隆ACE2基因、擴增并鑒定仔豬ACE2基因序列片段,進行同源性及遺傳進化分析；2)RT-PCR法確定ACE2基因在斷奶仔豬體內(nèi)各組織器官中的表達分布；3)免疫組化法確定ACE2蛋白在組織中的細胞定位。結(jié)果1)本實驗成功克隆出了仔豬ACE2基因部分序列,該核苷酸序列與GenBank上公布的野豬ACE2核苷酸序列同源性達到98%。與歐洲牛的同源性為87.8%,與人的同源性為78.8%,與禽類（雞）的同源性較低。遺傳進化分析發(fā)現(xiàn)該擴增片段與牛的遺傳距離最近,與雞則處在完全不同的2個分枝上。氨基酸進化與基因遺傳進化結(jié)果一致。2)RT-PCR結(jié)果顯示：ACE2基因在仔豬體內(nèi)廣泛分布,尤其在... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一篇 文獻綜述
    第一章 腎素-血管緊張素系統(tǒng)在胃腸道中的作用
        1 腎素-血管緊張素系統(tǒng)的兩條通路
            1.1 腎素-血管緊張素系統(tǒng)的經(jīng)典通路
            1.2 腎素-血管緊張素系統(tǒng)新的通路
        2 腎素-血管緊張素系統(tǒng)在胃腸道中的作用
            2.1 RAS各組分在胃腸道中的分布
            2.2 RAS與腸道葡萄糖和氨基酸轉(zhuǎn)運
            2.3 RAS在胃腸道病理生理中的作用
    第二章 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）及其研究
        1 ACE2的發(fā)現(xiàn)及其結(jié)構(gòu)
        2 ACE2的分布及其表達
        3 ACE2的催化功能及其抑制劑
            3.1 ACE2的催化功能
            3.2 ACE2的抑制劑
        4 ACE2的主要生物學功能
            4.1 ACE2的保護功能
            4.2 ACE2作為SARS的受體
            4.3 ACE2協(xié)助氨基酸的轉(zhuǎn)運
    第三章 動物胃腸道生物學功能及斷奶仔豬胃腸道的發(fā)育特點
        1 胃酸分泌及其調(diào)控
            1.1 胃酸的產(chǎn)生及功能
            1.2 胃酸分泌的調(diào)控
        2 腸道功能及其調(diào)節(jié)
            2.1 腸道的葡萄糖吸收及其轉(zhuǎn)運機制
            2.2 腸道氨基酸的吸收及其轉(zhuǎn)運機制
        3 斷奶仔豬胃腸道發(fā)育特點
            3.1 斷奶仔豬胃腸道發(fā)育變化概述
            3.2 斷奶仔豬胃酸分泌
            3.3 胃內(nèi)酶的活性變化
            3.4 斷奶仔豬腸道發(fā)育特點
    參考文獻
第二篇 試驗研究
    第四章 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）的基因克隆及在仔豬體內(nèi)的表達分布
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 實驗材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 總RNA濃度、純度及完整性
            2.2 ACE2基因PCR擴增
            2.3 ACE2的克隆及擴增產(chǎn)物的測序
            2.4 ACE2基因序列的同源性及遺傳進化分析
            2.5 仔豬ACE2基因的氨基酸序列分析與物種進化樹分析
            2.6 仔豬不同組織中ACE2基因的表達
            2.7 不同組織中ACE2的量化比較
            2.8 ACE2蛋白的細胞學定位
        3 討論
        Abstract
        參考文獻
    第五章 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）在不同日齡仔豬胃腸道中表達差異比較
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 實驗材料
            1.2 方法
            1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
        2 結(jié)果
            2.1 不同日齡斷奶仔豬胃腸道中ACE2基因表達差異分析
            2.2 不同日齡斷奶仔豬胃腸道ACE2蛋白表達分析
            2.3 不同日齡仔豬胃腸道中RNA/DNA的測定結(jié)果
            2.4 ACE2蛋白水平和胃腸道發(fā)育指標相關性分析
        3 討論
        Abstract
        參考文獻
    第六章 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）對不同日齡仔豬胃酸分泌的影響及其機制初探
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 實驗材料
            1.2 方法
            1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
        2 結(jié)果
            2.1 不同日齡仔豬胃食糜中pH變化
            2.2 胃泌素的含量比較
            2.3 不同日齡仔豬胃底組織中相關酶的測定結(jié)果
            2.4 不同日齡仔豬胃底組織中RAS各成員的差異變化
            2.5 ACE mRNA/ACE2 mRNA及其受體比值分析
            2.6 ACE2蛋白與胃酸相關指標的相關性分析
        3 討論
        Abstract
        參考文獻
全文結(jié)論
攻讀碩士學位期間發(fā)表論文與學術交流情況
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3061742