為了研究豬MOV10基因功能及其在豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）感染過程中的作用,試驗成功克隆出豬MOV10基因并進(jìn)行序列比對,在細(xì)胞水平上過表達(dá)豬MOV10基因并檢測其在細(xì)胞中的表達(dá)和定位,通過雙熒光報告系統(tǒng)檢測試劑盒和實時熒光定量PCR檢測豬MOV10基因誘導(dǎo)Ⅰ型干擾素的表達(dá),以及Western-blot和空斑試驗檢測MOV10基因?qū)RRSV增殖的影響。結(jié)果表明:豬MOV10基因氨基酸序列與人MOV10基因的同源性為92.1%,豬MOV10基因能在細(xì)胞中表達(dá),且為胞漿定位蛋白; PK-15細(xì)胞過表達(dá)豬MOV10基因可誘導(dǎo)IFN-β的表達(dá),Marc-145細(xì)胞過表達(dá)豬MOV10基因可顯著抑制PRRSV的增殖。說明豬的免疫系統(tǒng)與人的相似度較高,有可能成為研究人類免疫更好的動物模型,MOV10基因可抑制PRRSV的增殖,也為PRRSV防治藥物的開發(fā)提供了新藥物靶標(biāo)。 

【文章來源】：黑龍江畜牧獸醫(yī). 2020,(09)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

PRRSV增殖的空斑試驗檢測結(jié)果

NSP2蛋白表達(dá)情況的Western-blot檢測結(jié)果見圖7,過表達(dá)的豬MOV10基因可顯著抑制NSP2蛋白的表達(dá);進(jìn)一步通過空斑試驗檢測PRRSV增殖情況,結(jié)果同樣證實過表達(dá)的豬MOV10基因可顯著抑制PRRSV的增殖,見圖8。圖8 PRRSV增殖的空斑試驗檢測結(jié)果

PRRS給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失,截止目前仍無有效的控制措施。豬MOV10基因的功能及其在PRRSV感染中的作用未見報道,本試驗首先對豬源MOV10基因進(jìn)行克隆,通過序列比對分析發(fā)現(xiàn)豬MOV10基因氨基酸序列與人MOV10基因氨基酸序列的同源性高達(dá)92.1%,顯著高于小鼠與人的同源性,該結(jié)果也進(jìn)一步證實與小鼠相比,豬的免疫系統(tǒng)與人的相似度更高,有可能成為研究人類免疫更好的動物模型;隨后的亞細(xì)胞定位也證實豬MOV10基因與人MOV10基因的亞細(xì)胞定位相同;最后探究了豬MOV10基因在PRRSV增殖中的作用,證實豬MOV10基因可以抑制PRRSV增殖,這也為PRRSV防治藥物開放提供了新的藥物靶標(biāo)。


本文編號：3059455