為了了解山東省某肉種雞孵化場(chǎng)死胚中鮑曼不動(dòng)桿菌的感染情況及其致病性和耐藥性,試驗(yàn)對(duì)6個(gè)不同批次種蛋孵化后隨機(jī)抽檢的174枚啄殼未出殼死胚的卵黃液和胎糞利用4種不同培養(yǎng)基進(jìn)行了細(xì)菌的分離,對(duì)分離細(xì)菌進(jìn)行了鮑曼不動(dòng)桿菌碳?xì)涿瓜┟窸XA-51基因的測(cè)序鑒定。6個(gè)批次各取1株鮑曼不動(dòng)桿菌分離株進(jìn)行生化試驗(yàn)、小鼠攻毒試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)和同源性分析。結(jié)果表明:在174枚死胚的卵黃和胎糞中分離得到鮑曼不動(dòng)桿菌,分離率分別為9.8%和10.9%。檢測(cè)的6株鮑曼不動(dòng)桿菌分離株對(duì)氨芐西林、氟苯尼考、林可霉素和阿莫西林均100%耐藥,所有菌株均表現(xiàn)為多重耐藥現(xiàn)象。6株鮑曼不動(dòng)桿菌分離株對(duì)小鼠均表現(xiàn)出較強(qiáng)的致病性�；趓ecA基因的序列分析表明,鮑曼不動(dòng)桿菌分離株同源性存在一定差異。說明鮑曼不動(dòng)桿菌在死胚中分離率較高,并具有高度耐藥性和較強(qiáng)致病性。 

【文章來源】：黑龍江畜牧獸醫(yī). 2020,(24)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

6株鮑曼不動(dòng)桿菌分離株碳?xì)涿瓜┟?br>

6株鮑曼不動(dòng)桿菌分離株recA基因PCR擴(kuò)增均獲得963 bp大小的片段(見圖2)。測(cè)序結(jié)果進(jìn)行BLAST比對(duì),下載與分離菌株同源性高的基因序列(CP026125、CP045428、CP046536、CP043910、CP033858)構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(見圖3)。分離菌株SD29-1、SD30-1和SD35-1分別與來自中國(guó)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)室、加拿大微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室和美國(guó)華盛頓大學(xué)醫(yī)學(xué)院分離得到的鮑曼不動(dòng)桿菌(CP046536、CP043910、CP045428)親緣關(guān)系相近,SD40-2和SD48-2與源自美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生研究院臨床中心的鮑曼不動(dòng)桿菌(CP026125)親緣關(guān)系接近,而SD42-3處于單獨(dú)的分支,說明與其他分離菌株親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。4 討論

本試驗(yàn)針對(duì)6個(gè)不同批次的174枚死胚卵黃液和胎糞進(jìn)行了鮑曼不動(dòng)桿菌的分離鑒定,為了觀察分離菌在不同培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特性,試驗(yàn)選擇了普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、SS瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基和血瓊脂培養(yǎng)基4種培養(yǎng)基。鮑曼不動(dòng)桿菌在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,說明其對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不嚴(yán)格;在血瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)旺盛而不溶血,說明該菌的致病因子不是溶血素基因;麥康凱瓊脂和SS瓊脂均為選擇培養(yǎng)基,SS瓊脂培養(yǎng)基中含有亮綠和高濃度的膽鹽抑制了鮑曼不動(dòng)桿菌的生長(zhǎng),而麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的選擇性較弱,故仍能生長(zhǎng)。分離菌株革蘭氏染色鏡檢的形態(tài)特征與鮑曼不動(dòng)桿菌形態(tài)完全吻合。分離菌株的生化特性雖然符合細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)的標(biāo)準(zhǔn),但其生化特性并不完全一致,本試驗(yàn)就有2株能夠發(fā)酵葡萄糖且M.R.試驗(yàn)為陽性,而另外4株鮑曼不動(dòng)桿菌分離株不發(fā)酵葡萄糖,由此也說明生化試驗(yàn)可以作為細(xì)菌鑒定的輔助手段,確診尚需結(jié)合其他鑒定結(jié)果。本試驗(yàn)分離的鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)健康昆明系小鼠具有明顯的致病性,與王孝武等[8]、馬文昭等[9]報(bào)道的從患奶牛子宮內(nèi)膜炎和發(fā)病蛋雞內(nèi)臟組織器官中分離到的鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)小鼠的致病結(jié)果一致。鮑曼不動(dòng)桿菌因具有超強(qiáng)耐藥性已成為超級(jí)細(xì)菌家族一員,人醫(yī)臨床幾乎沒有敏感的抗生素。目前,多黏菌素E被視為治療鮑曼不動(dòng)桿菌感染唯一可用的體外活性抗菌劑[11]。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明,雞胚源鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)獸醫(yī)臨床常用抗生素也表現(xiàn)出較高的耐藥性和多重耐藥性。雞苗若攜帶本菌也將會(huì)因耐藥性傳遞而嚴(yán)重影響獸醫(yī)臨床治療藥物效果。本研究為對(duì)雞胚攜帶鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行溯源等后續(xù)工作的開展奠定了基礎(chǔ)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2株禽源鮑曼不動(dòng)桿菌recA及16S rRNA基因的序列分析[J]. 馬文昭,迪力拜爾·阿木提,姚惠霞,王川慶,王新衛(wèi),劉慧敏.  揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2018(03)
[2]牛源鮑曼不動(dòng)桿菌的鑒定及體外藥敏試驗(yàn)[J]. 王孝武,王旭榮,李建喜,王學(xué)智,林杰,楊志強(qiáng).  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2015(05)
[3]鮑曼不動(dòng)桿菌醫(yī)院感染相關(guān)危險(xiǎn)因素及預(yù)防[J]. 王濤,王瑞蘭.  中國(guó)感染與化療雜志. 2015(01)
[4]不動(dòng)桿菌分離與鑒定的研究進(jìn)展[J]. 牟成泉.  成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2012(04)



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