本試驗(yàn)的目的是研究食淀粉乳桿菌（Lactobacillus amylovorus）代謝產(chǎn)物中起抑制致病菌和抗豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）的成分是否具有一致作用,同時(shí)探索TGEV感染豬小腸上皮細(xì)胞（IPEC-J2）時(shí),食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞完整性及屏障功能的影響,為抑菌與抗病毒的益生菌制劑的研制提供理論依據(jù)。為研究食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物中起抑菌和抗病毒的成分是否具有一致作用,采用酸、過(guò)氧化氫酶及蛋白酶等處理食淀粉乳桿菌培養(yǎng)上清液,并利用瓊脂擴(kuò)散法（牛津杯法）和MTT法分別檢測(cè)了食淀粉乳桿菌培養(yǎng)上清液對(duì)大腸桿菌、沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌的抑菌活力及對(duì)TGEV感染IPEC-J2細(xì)胞的抗病毒活性。結(jié)果顯示,經(jīng)酸、過(guò)氧化氫酶及蛋白酶處理后的食淀粉乳桿菌培養(yǎng)上清液的抑菌效果和抗病毒活性均有不同程度的降低,經(jīng)蛋白酶K處理后的食淀粉乳桿菌培養(yǎng)上清液的抑菌效果和抗病毒活性均明顯減弱（P<0.05）,表明培養(yǎng)上清液中對(duì)蛋白酶K敏感的物質(zhì)抑菌與抗病毒能力具有一致性。為研究食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞完整性的影響,先將代謝產(chǎn)物與病毒共同孵育后感染IPEC-J2細(xì)胞,試驗(yàn)組為代謝產(chǎn)物預(yù)處理病毒,同時(shí)設(shè)立... 

【文章來(lái)源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 益生菌概述
        1.1.1 益生菌抗病毒和抑菌研究進(jìn)展
        1.1.2 益生菌腸道功能研究進(jìn)展
        1.1.3 食淀粉乳桿菌概述
    1.2 TGEV的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 TGEV的感染機(jī)制
    1.3 腸上皮細(xì)胞
        1.3.1 IPEC-J2細(xì)胞概述
        1.3.2 細(xì)胞完整性的研究進(jìn)展
        1.3.3 腸上皮細(xì)胞屏障功能
        1.3.4 腸上皮細(xì)胞與病毒的關(guān)系
        1.3.5 腸上皮細(xì)胞與腸道益生菌的關(guān)系
    1.4 目的和意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 菌株、細(xì)胞和病毒
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要溶液及配制方法
        2.1.4 主要儀器設(shè)備
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物抑菌與抗病毒的比較研究
        2.2.2 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)IPEC-J2細(xì)胞完整性的影響
        2.2.3 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)IPEC-J2細(xì)胞屏障功能的影響
    2.3 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
    3.1 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物抑菌與抗病毒的比較研究結(jié)果
        3.1.1 牛津杯法抑菌試驗(yàn)結(jié)果
        3.1.2 TGEV滴度測(cè)定結(jié)果
        3.1.3 細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果
        3.1.4 MTT法抗病毒試驗(yàn)結(jié)果
    3.2 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)IPEC-J2細(xì)胞完整性的影響
        3.2.1 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)IPEC-J2細(xì)胞形態(tài)的影響
        3.2.2 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)IPEC-J2細(xì)胞增殖的影響
        3.2.3 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)IPEC-J2細(xì)胞分化的影響
        3.2.4 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)IPEC-J2細(xì)胞活性的影響
    3.3 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)IPEC-J2細(xì)胞屏障功能的影響
        3.3.1 目的基因的PCR鑒定
        3.5.2 標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒的構(gòu)建
        3.5.3 IPEC-J2細(xì)胞MUC1、CLDN-3及KRT8 mRNA熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立
        3.5.4 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)IPEC-J2細(xì)胞屏障功能的影響
4 討論
    4.1 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物抑菌與抗病毒的比較分析
    4.2 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物調(diào)節(jié)IPEC-J2細(xì)胞完整性的抗病毒作用
    4.3 食淀粉乳桿菌代謝產(chǎn)物對(duì)IPEC-J2細(xì)胞屏障功能的影響
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]乳酸菌及其培養(yǎng)液對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、腸道菌群及腸道結(jié)構(gòu)的影響[D]. 馬治宇.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3058454