禽致病性大腸桿菌（avian pathogenic Escherichia coli,APEC）DE205B基因組中存在前噬菌體phiv205-1。本文利用RED同源重組技術(shù)構(gòu)建前噬菌體phiv205-1缺失株,采用倍比稀釋的方法檢測(cè)野生株DE205B和前噬菌體缺失株DE205BΔphiv205-1在酸、鹽和氧化應(yīng)激等不利條件下的存活率,分析前噬菌體對(duì)APEC環(huán)境適應(yīng)力的影響。結(jié)果顯示,與野生株相比,前噬菌體缺失株DE205BΔphiv205-1酸性耐受力下降了56.62%（P<0.001）,在氧化應(yīng)激條件下的存活率下降了91.78%（P<0.001）。為研究前噬菌體phiv205-1中影響宿主細(xì)菌對(duì)酸和氧化應(yīng)激耐受的基因,采用real-time PCR檢測(cè)了部分phiv205-1基因在氧化應(yīng)激環(huán)境中的表達(dá)量,結(jié)果顯示基因2971、2989、3327及Erf的表達(dá)量顯著升高。進(jìn)一步構(gòu)建了Δ2971、Δ2989、Δ3327及ΔErf的單基因缺失株,環(huán)境耐受實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與野生株相比,單基因缺失株Δ2971、Δ2989、Δ3327及ΔErf在H₂O

【文章來(lái)源】：畜牧與獸醫(yī). 2020,52(04)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 菌株、質(zhì)粒與引物
    1.2 主要試劑和培養(yǎng)基
    1.3 前噬菌體phiv205-1缺失株及單基因缺失株的構(gòu)建
    1.4 耐酸試驗(yàn)
    1.5 耐滲透壓試驗(yàn)
    1.6 耐氧化應(yīng)激試驗(yàn)
    1.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
    1.8 Δ2971、Δ2989、Δ3327及ΔErf缺失株的氧化應(yīng)激相對(duì)存活率測(cè)定
    1.9 統(tǒng)計(jì)相對(duì)存活率
2 結(jié)果
    2.1 前噬菌體缺失株DE205BΔphiv205-1的構(gòu)建
    2.2 前噬菌體缺失株DE205BΔphiv205-1對(duì)酸的耐受性
    2.3 前噬菌體缺失株DE205BΔphiv205-1在高滲狀態(tài)下的存活率
    2.4 前噬菌體缺失株DE205BΔphiv205-1在氧化應(yīng)激狀態(tài)下的存活率
    2.5 基因2971、2989、3327及Erf在氧化應(yīng)激條件下的轉(zhuǎn)錄水平
    2.6 Δ2971、Δ2989及ΔErf單基因缺失株在氧化應(yīng)激狀態(tài)下的存活率顯著下降
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]禽致病性大腸桿菌O1、O2、O78血清型三重PCR檢測(cè)方法的建立[J]. 王娟芳,戴建君,姜敏,任建鸞,李德志,張鵬,孫建和,湯芳.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020(01)
[2]大腸桿菌抗酸堿環(huán)境的分子機(jī)制[J]. 喬佳鑫,范麗菲,姚遠(yuǎn).  中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2018(01)
[3]auf基因?qū)η葜虏⌒源竽c桿菌鴨源株的細(xì)胞黏附及動(dòng)物致病性的影響[J]. 王顥錦,湯芳,諸葛祥凱,胡林,陳玲,李亞芯,李德志,戴建君.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(04)
[4]禽致病性大腸桿菌研究進(jìn)展[J]. 王少輝,戴建君,陸承平.  河北科技師范學(xué)院學(xué)報(bào). 2010(04)

博士論文
[1]大腸桿菌快速適應(yīng)氧化應(yīng)激中tRNA介導(dǎo)的翻譯調(diào)控機(jī)制研究[D]. 鐘嘉泳.暨南大學(xué) 2018

碩士論文
[1]禽致病性大腸桿菌ArcA基因的缺失及其致病機(jī)理的研究[D]. 安春霞.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]Stx噬菌體的溶原對(duì)大腸桿菌MG1655耐酸性影響的研究[D]. 李慧琴.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3056944