PCV2是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）的主要病原,傳播性廣泛,導(dǎo)致的經(jīng)濟(jì)損失巨大。PCV2感染后,可引起仔豬嚴(yán)重的免疫抑制。Toll樣受體（TLR）可識別一種或多種病原相關(guān)分子模式（PAMP）,能連接適應(yīng)性免疫和先天性免疫。PCV2在幼豬體內(nèi)主要侵襲巨噬細(xì)胞,它是病毒增殖和傳播的關(guān)鍵細(xì)胞；同時巨噬細(xì)胞具有強(qiáng)大的吞噬功能,在固有免疫中發(fā)揮重要的作用；肺臟是PCV2感染后損傷的主要器官,因此,對PCV2感染豬肺泡巨噬細(xì)胞（PAMs）后TLRs變化的研究,有利于揭示PCV2引起免疫抑制的機(jī)制。選用12頭豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）和豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）血清抗體和抗原均為陰性的普通斷奶仔豬,無菌分離PAMs,分為對照組和PCV2感染組（PCV2組）進(jìn)行體外培養(yǎng),分別在培養(yǎng)0、6、12、24和48 h收集PAMs。采用間接免疫熒光法檢測PCV2感染PAMs情況；熒光定量PCR法檢測TLR2、TLR3、TLR4、 TLR7、TLR8和TLR9 mRNA表達(dá)情況。Western blot方法檢測TLR3、TLR4 和 TLR9蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明,TLR2 mRNA的表達(dá)量在感... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
部分縮寫的中英文對照
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 PCV2與TLR的研究進(jìn)展
        1 PCV2致感染仔豬免疫抑制的研究進(jìn)展
            1.1 PCV2的發(fā)現(xiàn)
            1.2 PCV2的病原學(xué)特征
            1.3 PMWS的基本表現(xiàn)
            1.4 PCV2對巨噬細(xì)胞的影響
            1.5 PCV2與免疫抑制
        2 TLR的研究近況
            2.1 TLR的發(fā)現(xiàn)
            2.2 TLR結(jié)構(gòu)特征
            2.3 TLR的分布
            2.4 TLR的分類及配體
            2.5 TLRs介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)通路
            2.6 TLRs信號傳導(dǎo)的負(fù)調(diào)控機(jī)制
            2.7 與病毒相關(guān)的TLRs
        3 研究的目的和意義
第二篇 試驗研究
    第二章 PCV2感染仔豬肺泡巨噬細(xì)胞TOLL樣受體mRNA轉(zhuǎn)錄的變化
        摘要
        ABSTRACT
        1 材料與方法
            1.1 主要儀器與試劑
            1.2 病毒
            1.3 實驗動物及處理
            1.4 PAMs感染PCV2情況的檢測
            1.5 體外培養(yǎng)PAMs TLRs mRNA轉(zhuǎn)錄變化
            1.6 統(tǒng)計學(xué)處理
        2 結(jié)果與分析
            2.1 PCV2感染體外培養(yǎng)PAMs情況
            2.2 總RNA提取結(jié)果
            2.3 cDNA的純度測定
            2.4 RT-PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
            2.5 PCV2對PAMs TLRs mRNA水平的影響
        3 討論
    第三章 PCV2對體外培養(yǎng)PAMs TLR3、TLR4和TLR9蛋白表達(dá)的影響
        摘要
        ABSTRACT
        1 材料與方法
            1.1 主要儀器與試劑
            1.2 病毒
            1.3 實驗動物及處理
            1.4 Western blot法檢測TLR3、TLR4和TLR9蛋白的表達(dá)
            1.5 數(shù)據(jù)處理和分析
        2 結(jié)果
            2.1 PCV2對PAMs TLR3蛋白含量的影響
            2.2 PCV2對PAMs TLR4蛋白含量的影響
            2.3 PCV2對PAMs TLR9蛋白含量的影響
        3 討論
參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
碩士期間發(fā)表論文
致謝



本文編號：3056733