表觀遺傳修飾是基因表達(dá)調(diào)控的一種途徑,營養(yǎng)素的攝入可通過改變DNA甲基化模式來調(diào)控基因的表達(dá)。葉酸是否通過影響一碳單位循環(huán)和DNA甲基化模式影響脂肪沉積和代謝還有待研究。本課題以北京油雞為試驗(yàn)動(dòng)物,在細(xì)胞水平上研究不同葉酸濃度對雞前體脂肪細(xì)胞增殖分化的影響及表觀修飾的機(jī)制；在成體水平上,研究不同劑量的葉酸對后代胚胎期脂質(zhì)代謝基因表達(dá)和DNA甲基化的影響,為研究葉酸調(diào)控脂質(zhì)代謝的分子機(jī)理提供科學(xué)依據(jù)。葉酸對雞脂肪細(xì)胞分化和DNA甲基化的影響。利用原代培養(yǎng)前體脂肪細(xì)胞,分別以0（對照組）、4、8、12、16mg/L的葉酸添加處理未分化的前體脂肪細(xì)胞（增殖第一天）和分化的前體脂肪細(xì)胞（分化第一天）。結(jié)果發(fā)現(xiàn),葉酸顯著促進(jìn)北京油雞前體脂肪細(xì)胞增殖,降低單個(gè)細(xì)胞的脂肪沉積,在分化第六天的效應(yīng)達(dá)到最顯著。葉酸降低了分化第6天脂肪過氧化物體增殖劑活化受體γ（PPARγ）、CAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α（C/EBPα）及脂肪酸合成酶（FAS） mRNA的表達(dá)量,顯著上調(diào)了DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶（DNMT1）及亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）的基因表達(dá),且均呈現(xiàn)劑量依賴效應(yīng)。16mg/kg葉酸添加組的C/EB... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

葉酸對脂肪細(xì)胞分化的影響

圖2.3前脂肪細(xì)胞(增殖第3天)及脂肪細(xì)胞(分化第6天)基因表達(dá)量Fig 2.3 Effects of gene mRNA expression in preadipocyte(day3) andadipocyte (day6) by folate2.3.5葉酸對脂肪細(xì)胞脂質(zhì)代謝關(guān)鍵基因PPARY, C/EBPa甲基化的影響根據(jù)尸/?辦基因5'上游序列特征，擴(kuò)增了ATG位點(diǎn)上游-408?-49,共4個(gè)CpG位點(diǎn)，每個(gè)位點(diǎn)的甲基化水平在50%~100%之間。在對照組中4個(gè)CpG位點(diǎn)甲基化比率較一致，最低為（80%)，最高為（90%);而4 mg/L葉酸組中甲基化比率第二個(gè)CpG位點(diǎn)甲基化比率最�。�50%); 8 mg/L葉酸組中甲基化比率第3個(gè)CpG位點(diǎn)甲基化比率最大（100%)?綜合分析得出，對照組、4 mg/L、8 mg/L、12 mg/L和 16 mg/L葉酸組的甲基化比率分別為82.50%、77.50%、80.0%、77.50%和82.50%,各組之間差異不顯著(尸>0.05)。根據(jù)C/￡5Pa基因5'上游序列特征，擴(kuò)增了ATG位點(diǎn)上游-1542?-1372,共7個(gè)CpG位點(diǎn)，每個(gè)位點(diǎn)的甲基化水平在12.5?88.9%之間。對照組在第一（50%)及第四（12.5%) CpG位點(diǎn)中極顯著低于葉酸添加組（91.25%)及（50.78%),其它CpG位點(diǎn)沒有顯著的差異（P>0.05)�？傮w甲基化水平是對照組（62.5%)小于葉酸添加組（76.25%),且達(dá)到顯著差異（尸<0.05)。綜合分析得出，對照組4mg/L、8 mg/L. 12 mg/L和丨6 mg/L葉酸組的甲基化比率分別為62.50%、68.50%、69.6%、82.50%和84.30%，各組之間差異顯著(P<0.05 )。PPiRy 4CpGs 二SA -J L_j_！ rr.……

3.3.3.1母體葉黢對后代胚胎期肉雞肝臟?WfEfiP-lc基因表達(dá)的影響由圖3.1可知，胚胎早期，肉雞肝臟inRNA水平表達(dá)量較低，隨著日齡增加，其表達(dá)呈逐漸上升的趨勢，1日齡達(dá)到最大峰值。組間比較，E10時(shí)表達(dá)量較低，組間差異不明顯，E13時(shí)，5.0mg/kg葉酸水平降低S/?￡BiMcmRNA的表達(dá)量，隨著胚齡的增加表達(dá)上調(diào)，E16時(shí)

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本文編號(hào)：3052845